【正文】 初步鑒定。 31 第三十一頁，共七十四頁。早期囊胚 ICM細(xì)胞全部呈強(qiáng)陽性，晚期囊胚中局部 ICM呈強(qiáng)陽性，局部呈弱陽性，少局部為陰性。在胚胎的原始外胚層細(xì)胞、 ES細(xì)胞、 EC細(xì)胞和原始生殖細(xì)胞的外表均可檢測(cè)到 SSEA－ 1的表達(dá)。 30 第三十頁，共七十四頁。豬、兔的桑椹胚和早期囊胚 AKP呈陽性。 堿性磷酸酶的表達(dá) 許多資料說明，小鼠、大鼠的桑椹胚細(xì)胞和囊胚細(xì)胞均有堿性磷酸酶〔 AKP〕表達(dá)，小鼠的 EC細(xì)胞和 ES細(xì)胞中均含有豐富的 AKP。 *用 ES細(xì)胞作核供體進(jìn)行細(xì)胞核移植，可以得到可發(fā)育重 構(gòu)胚和動(dòng)物個(gè)體。 3. ES細(xì)胞可進(jìn)行誘導(dǎo)分化 *用 RA〔維生素 A酸或視黃酸〕作誘導(dǎo) 90％以上的 ES細(xì)胞 分化為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞， *聚集培養(yǎng)的 ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化那么可分化為有節(jié)律性收縮 的心肌細(xì)胞。 ES細(xì)胞的高度分化潛能 ES細(xì)胞的全能性是其區(qū)別于成 纖維細(xì)胞等體細(xì)胞的顯著特點(diǎn) 1. ES細(xì)胞在體外需在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)才能維持其未分 化狀態(tài)，一旦脫離飼養(yǎng)層就自發(fā)地進(jìn)行分化。凍存的細(xì)胞可在需要時(shí)隨時(shí)解凍，繼續(xù)培養(yǎng)不失其原有特性，并且來自一個(gè)克隆的細(xì)胞具有同樣的特征。 5. ES細(xì)胞增殖迅速，每 18— 24 h分裂增殖 1次。正常 ES細(xì)胞染色體正常，如發(fā)生異常那么其很難發(fā)育分化形成動(dòng)物個(gè)體。 2. ES細(xì)胞與卵圓柱期〔 egg cylinder stage〕胚胎外胚層和胎兒生殖峙的原始生殖細(xì)胞類似，而與 ICM細(xì)胞有差異。 2. ES細(xì)胞生物學(xué)特性 細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及核型 細(xì)胞的高度分化潛能 堿性磷酸酶的表達(dá) 胚胎階段特異性細(xì)胞外表抗原的表達(dá) 27 第二十七頁，共七十四頁。這是檢驗(yàn)一個(gè)細(xì)胞系是否為 ES細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)。通過控制 ES細(xì)胞生長環(huán)境，或遺傳操縱特定基因表達(dá)， ES細(xì)胞可直接分化成某特定種系細(xì)胞，例如將神經(jīng)決定基因 NeuroD2和 NeuroD3轉(zhuǎn)人 ES細(xì)胞，可使之分化為神經(jīng)細(xì)胞； ④形成嵌合體。培養(yǎng) ES細(xì)胞在非粘附底物中懸浮生長，或控制增殖細(xì)胞數(shù)目。 1. ES細(xì)胞的全能性主要表達(dá)在以下幾方面： ①形成畸胎瘤。 A phase contrast image of the pluripotent murine embryonic germ cell 24 第二十四頁，共七十四頁。 ES細(xì)胞的體外培養(yǎng) 〔取自 干細(xì)胞和發(fā)育生物學(xué) ， 葉鑫生等編， 〕 22 第二十二頁，共七十四頁。 20 第二十頁，共七十四頁。由此培養(yǎng)的細(xì)胞株，證實(shí)具有全能干細(xì)胞的特征。 John D. Gearhart在 Johns Hopkins大學(xué)領(lǐng)導(dǎo)另一個(gè)研究小組也從人胚胎組織中建立了干細(xì)胞株。經(jīng)測(cè)試這些細(xì)胞株的細(xì)胞外表 marker 和酶活性，證實(shí)它們就是胚胎干細(xì)胞。 1998年美國有兩個(gè)小組分別培養(yǎng)出了人多能 ( pluripotent )干細(xì)胞： James A. Thomson在 Wisconsin大學(xué)領(lǐng)導(dǎo)一個(gè)研究小組從人胚胎組織中培養(yǎng)出了干細(xì)胞株。 根據(jù)干細(xì)胞組織發(fā)生的名稱進(jìn)行分類 : ?胎胎干細(xì)胞 ?造血干細(xì)胞 ?骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 ?肌肉干細(xì)胞 ?成骨干細(xì)胞 ?內(nèi)胚層干細(xì)胞 ?視網(wǎng)膜干細(xì)胞 ?胰腺干細(xì)胞 17 第十七頁，共七十四頁。 15 第十五頁，共七十四頁。如骨髓多能造血干細(xì)胞是典型的例 子，它可分化出至少十二種血細(xì)胞 。如受精卵，胚胎干細(xì)胞。 14 第十四頁，共七十四頁。 至今已別離得到的胚胎干細(xì)胞物種有： 金黃地鼠〔 1988〕、貂〔 1993〕、豬〔 1994， 1997〕、雞〔 1996〕、恒河猴〔 1995〕、絨猴〔 1996〕。 13 第十三頁，共七十四頁。 Alternative models for stem cell development. (A) Invariant asym metry. A stem cell (S) gives rise by asymmetric division to a prog enitor (P) with a more restricted proliferation potential, which differentiates in response to extri nsic cues. The stem cell phenotype is regulated by reciprocal short and/or longrange signaling (thick colored arrows). (B) Populational asymmetry. Stem cells give rise to daughter cells that can be either stem cells or else progenitors that differentiate along different pathways (1, 2, and 3) depending on the bination of extrinsic factors to which they are exposed. ECM, extracellular matrix. 11 第十一頁，共七十四頁。 9 第九頁，共七十四頁。 8 第八頁，共七十四頁。 干細(xì)胞研究成為繼人類基因組大規(guī)模測(cè)序之后最具活力、最有影響和最有應(yīng)用前景的生命學(xué)科研究領(lǐng)域， 1999年干細(xì)胞研究被美國 ?科學(xué) ?雜志評(píng)為 1999年度世界十大科學(xué)之冠， 2024年干細(xì)胞研究再次被 ?科學(xué) ?雜志評(píng)為該年度世界十大科學(xué)成就之一。 一、干細(xì)胞的概念 干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。 Geic abnormalities detected with Vysis Inc.39。 One cell is removed from an eightcell embryo in preparation for preimplantation geic diagnosis. 4 第四頁，共七十四頁。s Fanconi anemia. 2024年十月發(fā)生在美國 Colorado的一個(gè)故事 2 第二頁，共七十四頁。第七章 干細(xì)胞研究及其應(yīng)用 山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 1 第一頁，共七十四頁。 In early October, a Colorado couple has a baby named Adam, whose umbilical cord stem cells could cure his sixyearold sister Molly39。 3 第三頁，共七十四頁。 Two separated blastomeres subjected to FISH analysis to check the chromosomes 5 第五頁，共七十四頁。s MultiVysion PGT technology. 6 第六頁，共七十四頁。 7 第七頁，共七十四頁。 組織工程是以干細(xì)胞研究為根底開展起來，它有望解決臨床上急需的人工組織與器官問題，進(jìn)展極為迅速，已經(jīng)成為干細(xì)胞應(yīng)用的主要方向。 干細(xì)胞有幾個(gè)主要特征 ?干細(xì)胞本身不是