【正文】
73 第七十四頁(yè),共七十四頁(yè)。正常 ES細(xì)胞染色體正常,如發(fā)生異常那么其很難發(fā)育分化形成動(dòng)物個(gè)體。s cloning ban will still allow stem cell experiments Nature 404, 321 (2024) [LONDON] European panel rejects creation of human embryos for research Nature 408, 277 (2024) 72 第七十二頁(yè),共七十四頁(yè)。 69 第六十九頁(yè),共七十四頁(yè)。 65 第六十五頁(yè),共七十四頁(yè)。 Neural Stem Cells Able to Repair Damage Throughout Brain Sciences USA 96, 70297034, June 8, 1999 In studies with mice, neural stem cells have been shown to globally replace damaged brain tissue. The study, performed by researchers at Harvard Medical School, involved transplanting neural stem cells from born mice into the brains of “ shiverer〞 mice, a model for Parkinson’ s and similar central nervous system diseases. The neural stem cells were able to migrate throughout the brain to repair damaged tissue. Treated mice showed a decrease in tremors. 62 第六十二頁(yè),共七十四頁(yè)。 Successful Trial of Gene Therapy in France Uses “ Adult〞 Stem Cells Science 288, 669672, April 28, 2024. French researchers recently reported what appears to be the first successful trial of human gene therapy, boosting the immune systems of two infants with severe bined immunodeficiency by injecting them with their own stem cells containing a normal copy of the gene that they lacked. Researchers removed stem cells from the infants’ bone marrow, added a working copy of the gene to the cells’ DNA, and injected the repaired stem cells back into the infants (8 and 11 months old at the time of treatment) 58 第五十八頁(yè),共七十四頁(yè)。 Science 284, 11681170。 BBC, July 19, 2024. 5, Neil Theise et al.。 Cell Differentiation: Hepatocytes from NonHepatic Adult Stem Cells。 Isolation of Primary and Immortalized CD34– Hematopoietic and Mesenchymal Stem Cells from Various Sources Stem Cells, Vol. 18, No. 1, 19, January 2024 54 第五十四頁(yè),共七十四頁(yè)。 however, the term 39。 51 第五十一頁(yè),共七十四頁(yè)。 造血干細(xì)胞作為干細(xì)胞研究 與應(yīng)用的突破口 1. 造血細(xì)胞是細(xì)胞增殖分化的最佳答案模型。 47 第四十七頁(yè),共七十四頁(yè)。即便是發(fā)育完整的來(lái)自自然機(jī)體的器官 , 要離體培養(yǎng)并維持其正常的生理功能目前還無(wú)法做到 , 器官的體外保存和維持仍是器官移植中的難題。但如何誘導(dǎo) ES細(xì)胞定向分化成單一類型的分化細(xì)胞 , 是至今仍未解決的難題。如何平衡這一對(duì)矛盾 , 必須篩選適宜的培養(yǎng)條件。 胚胎干細(xì)胞〔 embryonic stem cell, ES細(xì)胞〕也可被稱為多能干細(xì)胞〔 pluripotent stem cell, PSC〕,是胚胎或原始生殖細(xì)胞經(jīng)體外抑制分化培養(yǎng)后篩選出的具有發(fā)育全能性的細(xì)胞。 40 第四十頁(yè),共七十四頁(yè)。 1. 直接由動(dòng)物體內(nèi)獲取囊胚再別離 ICM的方法,這樣得到的囊胚數(shù)量少,質(zhì)量也可能不高,由此會(huì)影響別離ES細(xì)胞的效率。 步驟①杜氏 PBS洗 3次 ,2% Triton作用 20 min; ②再以杜氏 PBS洗 3次 ,封閉液中置 20min; ③以杜氏 PBS洗 3次,加第 1抗體于 4℃ 過(guò)液; ④以杜氏 PBS洗 3次,加第 2抗體于 30℃ 溫箱置 30min; ⑤再以杜氏 PBS洗 3次后用甘油 PBS封片。小鼠 3. 5日齡胚胎 ICM為強(qiáng)陽(yáng)性。 33 第三十三頁(yè),共七十四頁(yè)。因此, SSEA也常作為 ES細(xì)胞鑒定的一個(gè)標(biāo)志。 胚胎階段特異性細(xì)胞外表抗原的表達(dá) 早期胚胎細(xì)胞外表均表達(dá)胚胎階段特異性外表抗原〔 SSEA- 1〕。而在已分化的 EC細(xì)胞和 ES細(xì)胞中 AKP呈弱陽(yáng)性或陰性。 *將 ES細(xì)胞注射到同源動(dòng)物皮下,可形成組織瘤,其細(xì)胞 組成可代表 3個(gè)胚層細(xì)胞。 28 第二十八頁(yè),共七十四頁(yè)。 4. ES細(xì)胞在體外分化抑制培養(yǎng)中,呈克隆狀生長(zhǎng),細(xì)胞緊密地聚集在一起,形似鳥巢,細(xì)胞界限不清,克隆周圍有時(shí)可見(jiàn)單個(gè) ES細(xì)胞和分化的扁平狀上皮細(xì)胞。 ES細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)及核型 1. 各種動(dòng)物的 ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),胞體體積小,核大,有一個(gè)或幾個(gè)核仁。將 ES細(xì)胞注射到同種動(dòng)物囊胚腔中后,可以形成嵌合體〔 chimera〕, ES細(xì)胞可以參與嵌合體各個(gè)器官包括生殖腺的發(fā)育。將 ES細(xì)胞注人同源動(dòng)物皮下可形成畸胎瘤,包括三個(gè)胚層細(xì)胞; ②形成類胚體。 Pluripotent murine embryonic germ cells identified by red staining 23 第二十三頁(yè),共七十四頁(yè)。 19 第十九頁(yè),共七十四頁(yè)。用這種方法,每個(gè)胚胎可取得 15- 20個(gè)細(xì)胞用于培養(yǎng)。 三、胚胎干細(xì)胞 18 第十八頁(yè),共七十四頁(yè)。 專能干細(xì)胞〔 multipotent stem cell 〕,這類干細(xì)胞只能向 一種類型或密切相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞分化,如上皮組織 基底層干細(xì)胞、肌肉中的成肌細(xì)胞等。 二、干細(xì)胞的分類 按分化潛能大小來(lái)分類