免疫組化、免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用比較及常見問題分析-展示頁
2024-10-03 13:52本頁面
【正文】 物素化二抗～ SABC復(fù)合物 。 特點(diǎn)：該法孵育時(shí)間短〔通常為 10min〕，靈敏度高以及低背景染色等特點(diǎn)。 2. SP法 原理：根據(jù)生物素 (Biotin) 與鏈霉親和素 (Streptavidin)具有強(qiáng)結(jié)合力的原理設(shè)計(jì)。 組織芯片 /切片應(yīng)用 第六頁，共三十五頁。研究者一次可有效利用成百上千份正?；蚣膊顟B(tài)下的組織標(biāo)本來研究特定基因及其所表達(dá)的蛋白質(zhì)與疾病之間的關(guān)系。 免疫組化染色〔 IHC〕； 原位雜交〔 ISH〕； 熒光原位雜交〔 FISH〕； 原位末端標(biāo)記分析〔 TUNEL〕； 原位 PCR 以及激光捕獲顯微別離系統(tǒng)輔助的 cDNA雜交。 組織切片 /芯片制作 第五頁，共三十五頁。 免疫組織化學(xué) 〔 Immunohistochemistry, IHC〕 第三頁，共三十五頁。 免疫組織化學(xué)原理及特點(diǎn) 利用抗原與抗體的特異性結(jié)合原理和特殊的標(biāo)記技術(shù)，通過化學(xué)反響使標(biāo)記抗體顯色，對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的特異性抗原進(jìn)行定位、定性、定量檢測的一門技術(shù)。免疫組化、免疫熒光、 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用比較 及常見問題分析 宋硯明 song_yanmingwuxiapptec 第一頁，共三十五頁。 ? 免疫組化〔 IHC〕的應(yīng)用介紹 ?免疫熒光〔 IF〕的應(yīng)用介紹 ? 流式細(xì)胞術(shù)〔 FC〕的應(yīng)用介紹 ?IHC、 IF、 FC區(qū)別與聯(lián)系 第二頁，共三十五頁。 免疫組化具有操作簡單，特異性強(qiáng)，敏感性高，定位準(zhǔn)確，形態(tài)與功能相結(jié)合等特點(diǎn)。 細(xì) 胞 抗原 一抗 二抗 辣根過氧化物酶〔 HRP〕 3， 3二氨聯(lián)苯胺〔 DAB〕顯色劑 棕褐色絡(luò)合物 IHC反響原理示意圖 第四頁，共三十五頁。 2. 組織芯片應(yīng)用領(lǐng)域 組織芯片的應(yīng)用領(lǐng)域包括與生命科學(xué)相關(guān)的根底研究、臨床研究、應(yīng)用研究和新藥開發(fā)等。 1. 組織芯片 組織芯片〔或組織微陣列〕是將數(shù)十個(gè)甚至上千個(gè)不同個(gè)體的組織標(biāo)本集成在一張固相載體上，組織芯片中含有蛋白， RNA及 DAN分子，是一種高通量的研究分析工具。 3. Abgent 現(xiàn)有組織切片 /芯片產(chǎn)品 全套鼠類器官組織切片； 全套猴類器官組織切片； 人類常見癌癥組織切片； 組織芯片客戶定制效勞。 免疫組化流程示意圖 第七頁，共三十五頁。在一抗〔兔源與鼠源〕與相應(yīng)的靶抗原結(jié)合后，生物素化標(biāo)記的抗多價(jià)二抗與一抗特異結(jié)合；二抗上標(biāo)記的生物素與標(biāo)記了辣根過氧化物酶〔 HRP〕的鏈霉親和素結(jié)合，形成抗原～特異性一抗～生物素化的二抗～ HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物。 1. SABC法 ?原理： SABC法是利用鏈酶親和素 (Streptavidin)與生物素(Biotin)特有的高度親和力這一生物學(xué)性質(zhì)，先將生物素與辣根過氧化物酶 (HRP)結(jié)合，形成生物素化 HRP，然后與鏈酶親和素按一定比例混合，形成 SABC復(fù)合物 。最后用底物顯色劑顯色。 3. Polymer酶標(biāo)二抗法 ?原理： 該法采用一段多聚氨基酸聚合物做為載體鏈，將該多聚物與二抗結(jié)合，然后可再標(biāo)記上多個(gè) HRP/AP酶分子，所以同樣具有很高的信號(hào)放大作用。 IHC二抗
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