膠體金生產(chǎn)工藝配方原則(ppt78頁(yè))-展示頁(yè)
2025-02-21 16:29本頁(yè)面
【正文】 緩沖液的基本成分 各種緩沖系 : TrisHCl, PB, CB等 鹽類： NaCl 糖：蔗糖 ， 海藻糖等 表面活性劑： Tween20， Triton x100等 惰性蛋白： Casein等 防腐劑 ：疊氮鈉 ， 卡松等 Made by： QS HLJ 20 推薦的起始緩沖液 ?10mM Phosphate pH 3% Ethanol Made by： QS HLJ 21 “潛水艇” 效應(yīng) ?表面活性劑處理過(guò)的膜在使用時(shí)的常見(jiàn)問(wèn)題 ?因?yàn)槭褂玫谋砻婊钚詣┦撬苄缘? ?噴膜時(shí)這些表面活性劑被“沖走”了 Made by： QS HLJ 22 反應(yīng)動(dòng)力學(xué) ?流速增加 ,反應(yīng)速率減低 ?流速增加 ,檢測(cè)時(shí)間縮短 ?流速增加 ,靈敏度降低 ?流速增加 ,試劑用量增加 ?流速增加 ,背景降低 ?距離增加 ,流速降低 ?孔徑增加 ,蛋白結(jié)合量減少 Made by： QS HLJ 23 二、 和金子墊相關(guān)的配方和原理 ?和金子墊相關(guān)的工藝和配方有： 1）標(biāo)記工藝； 2）金標(biāo)稀釋液 3）金墊處理液 Made by： QS HLJ 24 標(biāo)記工藝 ?膠體金：一般指金的水溶液，又稱金溶膠。 ?鹽 ? 通常不會(huì)影響 ? 對(duì)某些蛋白，兩性離子的鹽類有助于蛋白結(jié)合 ? 減少信號(hào)強(qiáng)度，消假陽(yáng) Made by： QS HLJ 18 ?糖：對(duì)包被蛋白的穩(wěn)定性有重要作用，減緩老化速度，也可以增加親水力。 ?作用：提供適合的 PH, 改善親水性 , 增溶性 ,提高穩(wěn)定性 ?定律 : “蛋白在緩沖液中越不穩(wěn)定，蛋白結(jié)合力越強(qiáng)” Made by： QS HLJ 17 緩沖液的優(yōu)化 ?離子強(qiáng)度 ? 對(duì)于蛋白從溶液中脫離出來(lái)很重要，少量的離子強(qiáng)度，蛋白難以從溶液中脫離沉淀出來(lái)，過(guò)量的的離子強(qiáng)度，溶液配制中就已會(huì)出現(xiàn)沉淀。 Made by： QS HLJ 11 ?蛋白質(zhì)疏水性狀和親水性狀 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶解在溶劑中時(shí)，蛋白質(zhì)處于非常穩(wěn)定的狀態(tài)，此時(shí)蛋白質(zhì)的親水基團(tuán)展開(kāi)在外，疏水基團(tuán)收縮在內(nèi)，親水基團(tuán)和水分子接觸，保證了溶解性的狀態(tài)；當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)沉淀出來(lái)時(shí)，疏水基團(tuán)展開(kāi)，親水基團(tuán)收縮，此時(shí)為疏水狀態(tài)，也呈現(xiàn)不穩(wěn)定的固體狀態(tài)，疏水基團(tuán)和其他固體物的疏水基團(tuán)通過(guò)疏水作用力結(jié)合，達(dá)到固定的目的。對(duì)維持分子的三、四級(jí)結(jié)構(gòu)起著重要的作用。1 膠體金診斷試劑工藝配方原則 Made by： QS HLJ 2 內(nèi) 容 一、和膜相關(guān)的配方和原理 二、和金子墊相關(guān)的配方和原理 三、和樣品墊相關(guān)的配方和原理 四、相關(guān)問(wèn)題 Made by： QS HLJ 3 一、和膜相關(guān)的配方和原理 電鏡下的 NC膜 Made by： QS HLJ 4 硝酸纖維膜生產(chǎn)工藝圖 Made by： QS HLJ 5 孔徑定義的問(wèn)題 Made by： QS HLJ 6 孔徑對(duì)側(cè)向?qū)游鏊俣鹊挠绊? 標(biāo)稱 孔徑 ( ? m) 層析 4 . 5 c m 的 時(shí)間 ( s e c ) 3 245 5 185 8 140 12 100 Made by： QS HLJ 7 不同種類膜的 IgG結(jié)合能力 Made by： QS HLJ 8 不同種類膜的 BSA結(jié)合能力 Made by： QS HLJ 9 為什么蛋白會(huì)結(jié)合到膜上 ? 結(jié)合力是什么 ? ? 靜電 ? 疏水力 這兩種結(jié)合力的效應(yīng)是什么 ? ? 使蛋白從溶液中分離出來(lái) ? 長(zhǎng)久結(jié)合作用 Made by： QS HLJ 10 ?靜電作用力 靜電作用力是正負(fù)電荷相互吸引產(chǎn)生的作用力 ?疏水作用力 疏水作用力又稱為疏水鍵。它是由側(cè)鏈的疏水基團(tuán)相互接近 . 而形成的一種作用力。每一個(gè)蛋白質(zhì)都具有疏水基團(tuán)和親水基團(tuán)。
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