細(xì)胞工程第4章(3)動物細(xì)胞培養(yǎng)工程4-展示頁
2025-02-13 04:06本頁面
【正文】 全長 36594bp， 14個外顯子 ， 13個內(nèi)含子 ， tPA由 527個氨基酸 ， 單鏈糖蛋白 ， 開始 酵母表達(dá) ， 不能分離純化 tPA突變體，由雙鏈糖蛋白， 現(xiàn)用 CHO細(xì)胞高效表達(dá)成功（參見下圖） B、 β干擾素（ IFNβ） 最早 ， 為一種在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病 毒活性的蛋白質(zhì) ， 普遍存在于個體脾 、 肝 、 腎 、 淋巴細(xì)胞 、 骨髓 ， 被多因素誘發(fā) ， 現(xiàn)為 一組多功能細(xì)胞因子 ， 具有抗病毒 、 腫瘤活 性 ， 調(diào)節(jié)免疫反應(yīng) ， 控制細(xì)胞生長與分化 ， 天然 IFNβ—— 刺激體外培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞 ， 大腸桿菌表達(dá) ， 活性低 ， 不穩(wěn)定 ， Cys17形成二硫鍵 ， 缺少 NMet， 無糖基化 重組 IFNβ 點突變改造 ， 使 Cys17變?yōu)橹行园被?， 如：絲 、 酪氨酸 ， 商品名為： IFNβ1b CHO細(xì)胞表達(dá)，與天然一樣，天然糖基化， 分離簡單。然后，活細(xì)胞這種自身固有的代謝網(wǎng) 絡(luò)相對實際應(yīng)用而言，其遺傳特性并非最佳 ，需要對細(xì)胞代謝途徑進(jìn)行修飾； B、代謝控制發(fā)酵 （ metabolic control fermentetion） —— 是指利用遺傳學(xué)或生物化學(xué)方法，人 為地在 DNA分子水平上改變和控制微生物 的代謝，使目的產(chǎn)物大量的生成、積累的 發(fā)酵； C、在代謝控制發(fā)酵的理論 基礎(chǔ)上，提出 和形成了“代謝工程”概念； D、代謝工程 （也稱途徑工程， pathway engineering） —— 是指應(yīng)用重組 DNA技術(shù)和分析生物學(xué)相關(guān)的 遺傳學(xué)手段進(jìn)行有精確目標(biāo)的遺傳操作，改變酶 的功能和輸送體系的功能，甚至改變產(chǎn)能系統(tǒng)的 功能，以改變細(xì)胞某些方面代謝活性的整套工作 （包括代謝分析、代謝設(shè)計、遺傳操作和目的代 謝活性的實現(xiàn)）；即是指生物化學(xué)反應(yīng)代謝網(wǎng)絡(luò) 有目的地被修飾。 C、初步研究： 首先必須較快建立一個基本（不要求是最優(yōu)）的細(xì) 胞培養(yǎng)工藝。細(xì)胞工程 Cell Engineering Chapter 動物細(xì)胞培養(yǎng)工程 4．
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