發(fā)育生物學——發(fā)育生物學研究技術-展示頁
2024-08-30 21:29本頁面
【正文】 escence tag or an enzyme Dectection: autoradiography, fluorescence microscope, enzymesubstrate reaction 原位探測基因表達 原位探測基因表達 Distribution of mRNA for the growth factor Vg1 in the amphibian egg. In situ hybridization with a radioactive probe. (yellow signals) 原位探測基因表達 利用原位雜交技術研究基因表達的時空譜 mRNA的檢測 FISH 探測基因表達 報道基因 (reporter gene) 技術 目的： 用于啟動子 /增強子的分析研究。 ? 細胞標記技術 。 ? 顯微注射 。 ? 生化分子生物學 。發(fā)育生物學研究技術 常用發(fā)育生物學研究技術簡介 ? 顯微鏡技術 (成像 imaging)。 ? 組織切片技術 (經(jīng)典解剖形態(tài)學 morphology)。 ? 原位雜交技術 (in situ hybridization)。 ? 報告基因技術 。 顯微鏡技術 目的：觀察胚胎個體 分類： ? 光學 (optical)顯微鏡 : ? 體視顯微鏡 : 組織分離用 ? 熒光顯微鏡 ： 顯微鏡技術 激光共聚焦顯微鏡 (laser confocal)： 熒光標記，對胚胎或細胞中的特定蛋白質或 mRNA的分布進行定性或定量研究； 圖像采集的效果很好 ；細胞或組織的三維重塑 (reconstructing) 組織切片技術 目的：觀察胚胎的內部組織學結構 分類： ? 石蠟組織切片： 石蠟包埋，切片機切片 ? 冷凍切片： 低溫包埋劑包埋，低溫切片機切片，對樣品中 核酸的保存較好，但切片的質量差。采用一些產(chǎn)物易于檢測的基因 (報道基因 )與待研究的表達調控序列串聯(lián)，通過轉基因技術導入胚胎體內，分析報道基因產(chǎn)物的表達來研究目的片斷的轉錄調節(jié)活性。 利用 DNA與蛋白質間的相互作用 分離時空特異性表達基因的方法 利用蛋白質之間的相互作用 酵母雙雜交法 顯微注射及細胞標記技術 目的： 將外源 DNA、 RNA或標記物等導入早期胚胎細胞中，如運用細胞標記技術對胚胎早期卵裂球分化命運圖譜的研究。 細胞標記物分類： 早期： 活體染料如尼羅藍或中性紅，不能標記胚胎內部組織 現(xiàn)在：細胞外
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