【正文】 養(yǎng)傳遞的道體，調節(jié)細胞生長。錳是許多酶的激活劑。可以根據(jù)不同的目的和需要調整鉀的用量?？赏ㄟ^添加MgSO4防止發(fā)酵過程中的缺乏。 磷酸鹽 對發(fā)酵有顯著影響，不足時糖代謝受抑制，要根據(jù)菌種不同的培養(yǎng)及生產(chǎn)階段及時的調整用量。氨水用pH自動控制連續(xù)流加。尿素滅菌時形成磷酸銨鎂鹽，須單獨滅菌。對于營養(yǎng)缺陷型菌株應以添加有機氮源水解液為主。 培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求 碳源 主要以淀粉水解糖作為碳源，生產(chǎn)過程中應注意控制其濃度，當碳源濃度過高時，對菌體生長不利，氨基酸的轉化率降低。罐內(nèi)培養(yǎng)條件為：溫度32℃，氣壓l00KPa，通風比前期1∶，中后期1∶，攪拌300r/min，加泡敵作消泡劑。一般培養(yǎng)18~20h，取菌種，分析其pH、殘?zhí)?、菌體密度及鏡檢正常后可供發(fā)酵罐接種用，利用壓差法接種于發(fā)酵罐。: 搖瓶培養(yǎng)基 在32℃培養(yǎng)18～24h經(jīng)質量檢查合格后，即可利用火焰接種法接種于種子罐。 發(fā)酵培養(yǎng)基葡萄糖12~14， ， （NH4）2 SO4 KH2 PO4 ，MgSO4 ， CaCO3 2，以NaOH調pH至7。大腸桿菌的培養(yǎng)基配方及其培養(yǎng)條件（百分比） LB培養(yǎng)基 胰蛋白胨 10g/L ， 酵母提取物 5g/L ， 氯化鈉 10g/L 搖瓶培養(yǎng)基， ， ， ， ~。由于本課題為工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)，所以選擇培養(yǎng)基配料時要注意到經(jīng)濟成本，選用廉價發(fā)酵原料根據(jù)本地條件，結合實際情況，可選用合適的碳源和氮源。(4)發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基既要有利于生長繁殖，防止菌體過早衰老，又要有利于產(chǎn)物的大量合成。(1)LB培養(yǎng)基 LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養(yǎng)基來預培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求. （2）搖瓶培養(yǎng)基孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基，對這類培養(yǎng)基的要求是能使菌體生長迅速,產(chǎn)生數(shù)量多而且優(yōu)質的孢子,并且不會引起菌體變異。原則上①滿足必須的原料；②生化反應的基本條件（溫度、溶氧和pH）；③來源豐富、價格低廉、取材方便、質量穩(wěn)定；④培養(yǎng)基成分不影響下游產(chǎn)品的提取加工。使用時將菌種表面部分融化，挑取少量于搖瓶培養(yǎng)基中，注意菌種不要全部融化，搖瓶培養(yǎng)所得置于冰箱中供菌種擴大使用。菌種常用的保存的方法有斜面冰箱保藏法、沙土管保藏法、菌絲速凍法、石蠟油封存法、真空冷凍干燥保藏法、液氮超低溫保藏法。要求保存的菌種在復蘇后除保持以前的生活和繁殖能力，不發(fā)生形態(tài)特征、生理狀態(tài)以及遺傳性狀的改變外，還不允許污染任何雜菌。菌種保藏的原理：通過低溫、干燥、隔絕空氣和斷絕營養(yǎng)等手段，以最大限度的降低菌種的代謝強度抑制細菌的生長和繁殖。蘇氨酸發(fā)酵法菌種來源有大腸桿菌、短桿菌、谷氨酸棒桿菌等。長期以來，國際市場對蘇氨酸的需求持續(xù)穩(wěn)定增長，是需求增長最快的氨基酸品種之一，特別是在化學及生化、食品添加劑、飼料添加劑等方面的用量增長快速，大有取代色氨酸而成為除賴氨酸、蛋氨酸以外的發(fā)展最迅速的第三大氨基酸。 主要食物來源：發(fā)酵食品（谷物制品）、雞蛋、茼蒿、奶、花生、米、胡蘿卜、葉菜類、番木瓜、苜蓿 等。特別是飼料添加劑方面用量增長快速，它常添加到未成年仔豬和家禽的飼料中，是豬飼料的第二限制氨基酸和家禽飼料的第三限制氨基酸。同時，蘇氨酸又是制造一類高效低過敏的抗生素——單酰胺菌素的原料。醫(yī)藥上，由于蘇氨酸的結構中含有羥基，對人體皮膚具有持水作用，與寡糖鏈結合，對保護細胞膜起重要作用，在體內(nèi)能促進磷脂合成和脂肪酸氧化。途徑主要有3條：通過醛縮酶代謝為甘氨酸和乙醛；通過TDG代謝為氨基丙酸、甘氨酸、乙酰COA；通過TDH代謝為丙酸和α氨基丁酸。不溶于乙醇、乙醚和氯仿。253℃熔化并分解。 名 稱：L蘇氨酸（LThreonine）(β羥基α氨基丁酸) 簡寫： Thr 法定編號： CAS 72195 結 構 式： CH3CH(OH)CH(NH2)COOH 分 子 式： C4H9NO3 分子量： 白色斜方晶系或結晶性粉末。發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸是利用微生物具有合成自身所需氨基酸的能力，通過誘變篩選，選育出具有各種缺陷型及抗性的菌株，以解除代謝調節(jié)的反饋和阻遏，達到過量合成目的氨基酸的生產(chǎn)方法。發(fā)酵法生產(chǎn)蘇氨酸，其優(yōu)點是可利用廉價的葡萄糖原料直接生產(chǎn)產(chǎn)品，菌種特性專一，發(fā)酵液中幾乎不含其它氨基酸，提純后產(chǎn)品質量好，成本低，易于大規(guī)模生產(chǎn)。在醫(yī)藥方面，蘇氨酸是氨基酸大輸液的主要成分之一。特別是飼料添加劑方面的用量增長快速，它常添加到未成年仔豬和家禽的飼料中，是豬飼料的第二限制氨基酸和家禽飼料的第三限制氨基酸。中北大學2014年發(fā)酵工程課程設計說明書1緒論 L蘇氨酸是一種必需的氨基酸，蘇氨酸有四種異構體，天然存在并且對機體有生理作用的是L蘇氨酸。蘇氨酸主要用于醫(yī)藥、化學試劑、食品強化劑、飼料添加劑等方面。在配合飼料中加入L蘇氨酸，具有如下的特點：①可以調整飼料的氨基酸平衡，促進禽畜生長；②可改善肉質；③可改善氨基酸消化率低的飼料的營養(yǎng)價值；④可降低飼料原料成本；因此在歐盟國家（主要是德國、比利時、丹麥等）和美洲國家，已廣泛地應用于飼料行業(yè)。常用于手術前后、創(chuàng)傷、燒傷、骨折、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等的輔助治療，是臨床用量很大的品種。選擇具有國際先進水平高產(chǎn)酸、高轉化率基因工程菌種，生產(chǎn)蘇氨酸，不但附加值更高，而且能夠發(fā)揮氨基酸發(fā)酵企業(yè)自身的優(yōu)勢，改變氨基酸發(fā)酵企業(yè)產(chǎn)品單一，利潤較薄的狀況。微生物細胞內(nèi)的氨基酸合成都是以一些代謝中間產(chǎn)物為底物，保證各種氨基酸的平衡和不斷供應。無臭，味微甜。高溫下溶于水，25176。蘇氨酸在機體內(nèi)的代謝途徑和其他氨基酸不同，是唯一不經(jīng)過脫氫酶作用和轉氨基作用，而是通過蘇氨酸脫水酶（TDH）和蘇氨酸脫酶（TDG）以及醛縮酶催化而轉變?yōu)槠渌镔|的氨基酸。 蘇氨酸是一種重要的營養(yǎng)強化劑，可以強化谷物、糕點、乳制品，和色氨酸一樣有緩解人體疲勞，促進生長發(fā)育的效果。其制劑具有促進人體發(fā)育抗脂肪肝藥用效能，是復合氨基酸輸液中的一個成分。 蘇氨酸用于醫(yī)藥、化學試劑、食品強化劑、飼料添加劑等方面。隨著人民生活水平的提高和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，蘇氨酸作為飼料用氨基酸，廣泛用于添加仔豬飼料、種豬飼料、肉雞飼料、對蝦飼料和鰻魚飼料等。 蘇氨酸的生產(chǎn)方法主要有發(fā)酵法，蛋白質水解法和化學合成法三種，目前微生物發(fā)酵法已經(jīng)成為生產(chǎn)蘇氨酸的主流方法。目前全世界蘇氨酸的需求量不應低于8 萬t/ 年，缺口較大，且每年將以10%~12% 的速度遞增。2菌種的選擇與制備 關于菌種的選擇，通過查資料工業(yè)一般使用大腸桿菌基因工程，因其產(chǎn)量大，沒有反饋抑制，本設計采用大腸桿菌基因工程菌發(fā)酵工藝來生產(chǎn)蘇氨酸，所以對于菌種來源需要從菌種機構來買。由于菌種的代謝相對靜止，生命活動將處于休眠狀態(tài)，從而可以保藏很長時間。此外，保存前應確保菌種的單純性，先分離單菌落后進