【正文】 個體，即引起生命個體數(shù)量增加的生物學過程。 個體生長 —— 微生物細胞個體吸收營養(yǎng)物質，進行新陳代謝，原生質與細胞組分的增加為個體生長?？梢杂弥亓?、體積、密度或濃度來衡量。 分區(qū)劃線（適用于 濃度較大 的樣品） 連續(xù)劃線（適用于 濃度較小 的樣品） An inoculating loop is used to thin out anisms on the surface of the agar. 7 連續(xù)劃線 劃線分離后平板上顯示的菌落照片 8 ③ 傾注平板法（ Pour Plate） Organisms are serially diluted, then a small amount is added to an empty sterile petri dish, to which melted agar at 50 186。 ＊利用選擇培養(yǎng)基進行直接分離 ＊富集培養(yǎng) 11 ⑥單細胞（單孢子）分離法 采用顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)的方法。 毛細管法： 用毛細管提取微生物個體，適合于較大微生物。 小液滴法： 將經(jīng)過適當稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含一個細胞的液滴來進行純培養(yǎng)物的分離。 （一）微生物細胞數(shù)目的檢測法 直接法 （血球計數(shù)板、比例計數(shù)法） 間接法 （活菌計數(shù)法、 液體稀釋法、膜過濾法 ） （二）微生物生長量和生理指標測定法 直接法 (干重法，堆體積法 ) 間接法 （比濁法，碳、氮含量法，其它生理指標） 14 15 原理：將 1cm2 400小格，從中均勻分布地選取 80或 100小格，計數(shù)其中的細胞數(shù)目，換算成單位體積中的細胞數(shù)。不適用于細菌等個體較小的細胞，因為（ 1）細菌細胞太小，不易沉降；（ 2）在油鏡下看不清網(wǎng)格線，超出油鏡工作距離。 16 應用：可同時計數(shù)不同微生物的菌數(shù)，適 于土壤、牛奶中細菌計數(shù)。將適當稀釋的菌液傾注平板或涂布在平板表面，經(jīng)保溫培養(yǎng)后，以平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)乘以稀釋度就可以計算出原菌液的含菌量。按照國家標準規(guī)定的樣品菌落總數(shù)測定的計數(shù)原則，以平板菌落數(shù)在 30 ~300 之間為報告依據(jù)。 plate counts are reported as number of colonyforming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample. 19 When we observe colonies, we cannot assume each arose from just one cell originally planted on the medium, however. A pair, chain or cluster of cells which 39。 on the medium in close proximity to each other can multiply and produce a single colony. Thus, we use the term colonyforming unit when we consider the mon origin for the cells of any colony. This term is usually abbreviated CFU. ColonyForming Unit 20 液體稀釋法對 樣品做 10 倍連續(xù)稀釋，從適宜的 3 個連續(xù)稀釋度中各取 5 ml 試樣，接種 3 組共 9 支裝有培養(yǎng)液的試管中（每管接入 1 ml ）。9 m l 9 m l 9 m l 9 m l1 m l 1 m l 1m l 3 3 31 ml 1 ml 1 ml 1 ml10n 10n2 10n1 21 常用該法測定含菌量較少的空氣和水中的微生物數(shù)目。 22 將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離出來 ,然后烘干 (干燥溫度可采用 105℃ 、 100℃或 80℃) 、稱重。 該法適合菌濃較高的樣品。 23 原理是在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。 特點：快速、簡便；但易受干擾。 一般細菌含氮量為干重的 %，酵母菌為 %，霉菌為%，根據(jù)一定體積培養(yǎng)液中的含氮量再乘以 ，就可測得粗蛋白的含量。 25 Table 1. Some Methods used to measure bacterial growth Method Application Comments Direct microscopic count Enumeration of bacteria in milk or cellular vaccines Cannot distinguish living from nonliving cells Viable cell count (colony counts) Enumeration of bacteria in milk, foods, soil, water, laboratory cultures, etc. Very sensitive if plating conditions are optimal Turbidity measurement Estimations of large numbers of bacteria in clear liquid media and broths Fast and nondestructive, but cannot detect cell densities less than 107 cells per ml Measurement of total N or protein Measurement of total cell yield from very dense cultures only practical application is in the research laboratory Measurement of Biochemical activity . O2 uptake CO2 production, ATP production, etc. Microbiological assays Requires a fixed standard to relate chemical activity to cell mass and/or cell numbers Measurement of dry weight or wet weight of cells or volume of cells after centrifugation Measurement of total cell yield in cultures probably more sensitive than