【正文】 遷移，對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬功能的影響；在動(dòng)物水平，我們構(gòu)建轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物，并與ApoE/鼠雜交，同時(shí)給予高脂飲食，最后觀察對(duì)于斑塊的形成及面積大小有無影響。對(duì)于能量限制，由于小鼠體內(nèi)致AS必需要高脂飲食，無法直接觀察能量限制對(duì)于AS的影響，因此我們?cè)隗w內(nèi)和細(xì)胞水平進(jìn)行能量限制，通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)現(xiàn)能量限制影響到的基因，對(duì)該基因進(jìn)行深入研究。觀察對(duì)于斑塊形成和面積大小是否有影響。第二部分 內(nèi)外環(huán)境因素影響動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制學(xué)術(shù)思路與技術(shù)途徑：，引進(jìn)ApoE/鼠或LDLR /鼠并給與高脂飲食飼養(yǎng)誘導(dǎo)AS模型。應(yīng)用CART和MARS模型開展了相關(guān)代謝通路中11個(gè)候選基因的33個(gè)SNPs的多基因統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)SNPs位點(diǎn)間的交互作用在高血壓發(fā)生中具有重要作用（Hypertension 2006，47：114754）。完成了30余個(gè)基因與冠心病和腦卒中的關(guān)聯(lián)和功能研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)個(gè)在國(guó)人冠心病和腦卒中發(fā)病中具有重要作用的SNPs及單體型。亞臨床指標(biāo)：頸動(dòng)脈IMT、PWV等SNPs、CNVs及單體型血脂代謝、炎癥反應(yīng)、血壓相關(guān)通路基因AS斑塊鈣化及穩(wěn)定性評(píng)價(jià)確定遺傳變異位點(diǎn)中國(guó)人群GWAS研究數(shù)據(jù)的深入挖掘人體測(cè)量、血脂、生物標(biāo)記物檢測(cè)2000例社區(qū)高危人群10000病例對(duì)照人群驗(yàn)證歐美人群GWAS報(bào)道的AS相關(guān)位點(diǎn)高危人群隨訪，構(gòu)建預(yù)測(cè)模型功能研究揭示遺傳分子機(jī)制研究特色與創(chuàng)新：結(jié)合中國(guó)人群GWAS研究中200萬個(gè)遺傳變異信息以及多個(gè)代謝通路基因網(wǎng)絡(luò)，基于通路和遺傳網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)分析SNPs、CNVs和單體型變異信息，采用CART、MARS、MDR、貝葉斯網(wǎng)絡(luò)、隨機(jī)森林等數(shù)學(xué)模型，構(gòu)建遺傳因素及環(huán)境危險(xiǎn)因素的預(yù)測(cè)模型，找到檢查、定量臨床疾病亞型的干預(yù)靶點(diǎn)，監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展，確定高?；颊撸罱K實(shí)現(xiàn)定量風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和個(gè)性化早期預(yù)警。，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)AS相關(guān)生理指標(biāo)的變化和AS的進(jìn)展情況。，尋找與多態(tài)可能結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)而研究多態(tài)對(duì)易感基因所在信號(hào)通路的調(diào)控作用及細(xì)胞生理活性改變。動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制及其診治與干預(yù)的基礎(chǔ)研究 第一部分 中國(guó)人動(dòng)脈粥樣硬化遺傳分子基礎(chǔ)學(xué)術(shù)思路與技術(shù)途徑：，同時(shí)選擇炎癥、脂代謝以及血壓調(diào)控通路相關(guān)基因，在10000例急性冠脈綜合征病例對(duì)照樣本中篩查AS新的基因和遺傳變異。第四部分闡述含硫氨基酸家族特別是Hcy與 H2S在AS發(fā)生和發(fā)展中炎癥和免疫作用及其分子機(jī)制；第五部分針對(duì)血管重塑是AS管腔狹窄的關(guān)鍵因素，研究影響血管重塑的因素和作用的分子機(jī)制；第六部分針對(duì)AS斑塊不穩(wěn)定及早期防治，研究斑塊從不穩(wěn)定向穩(wěn)定的方向轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制和干預(yù)策略。第二部分緊密聯(lián)系內(nèi)外環(huán)境因素中限制能量飲食和特殊飲食，研究有利和不利因素和機(jī)體相互作用在AS發(fā)病中的機(jī)制。本項(xiàng)目實(shí)施中取得的基礎(chǔ)性研究成果將在國(guó)際刊物上發(fā)表影響因子（IF），其中IF10的論文15篇，頂級(jí)雜志論文25篇。培養(yǎng)優(yōu)秀中青年人才，產(chǎn)生杰出青年與長(zhǎng)江學(xué)者,建設(shè)一支優(yōu)秀的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究人才梯隊(duì)。尋找出12個(gè)可用于AS新的早期預(yù)警分子，并建立其檢測(cè)方法和預(yù)警指標(biāo)確定3－5種新的抗AS靶點(diǎn)分子，明確其功能及臨床意義。項(xiàng)目名稱：動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制及其診治與干預(yù)的基礎(chǔ)研究首席科學(xué)家：劉德培 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所起止年限：依托部門：衛(wèi)生部二、預(yù)期目標(biāo)總體目標(biāo)：本項(xiàng)目旨在從我國(guó)AS人群特有的遺傳背景及分析致病的內(nèi)外環(huán)境危險(xiǎn)因素為切入點(diǎn)，結(jié)合系統(tǒng)生物醫(yī)學(xué)觀念和手段,針對(duì)在AS發(fā)生中起重要作用的內(nèi)外環(huán)境中有利和不利因素，闡述AS發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的規(guī)律,揭示血管重塑和AS斑塊不穩(wěn)定的機(jī)理,結(jié)合臨床研究為制定適合我國(guó)國(guó)情的針對(duì)AS及其并發(fā)癥的早期預(yù)警和早期干預(yù)策略及防治方案提供新的思路和科學(xué)依據(jù)，積極推進(jìn)臨床轉(zhuǎn)化。五年預(yù)期目標(biāo)：闡明能量限制和特殊飲食，脂質(zhì)代謝紊亂和含硫氨基酸家族等因素影響AS發(fā)病的細(xì)胞分子機(jī)制；初步闡明血管重塑和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的影響因素及分子機(jī)制。培養(yǎng)博士生80名，碩士生60名。申請(qǐng)一批發(fā)明專利，促進(jìn)開發(fā)有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的成果轉(zhuǎn)化。三、研究方案本課題項(xiàng)目分為六個(gè)部分，第一部分開展中國(guó)人群AS疾病分子遺傳基礎(chǔ)。第三部分闡明脂代謝紊亂，尤其是TG和HDL代謝紊亂導(dǎo)致AS的分子機(jī)制。這六個(gè)部分結(jié)合系統(tǒng)生物醫(yī)學(xué)觀念和手段，從臨床提出科學(xué)問題，圍繞著AS的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的分子調(diào)控機(jī)制和早期干預(yù)這個(gè)科學(xué)核心進(jìn)行研究，尋找AS早期預(yù)警分子，并建立其檢測(cè)方法和預(yù)警指標(biāo),確定抗AS新靶點(diǎn)分子,探討防治AS的有效方法和降低心腦血管疾病發(fā)病率和死亡率的途徑。、脈搏波速度等AS亞臨床表型和多種生物標(biāo)記物，綜合評(píng)價(jià)遺傳因素與AS發(fā)生/發(fā)展、以及斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系。應(yīng)用microRNA技術(shù)，確定斑塊發(fā)生發(fā)展過程中炎癥反應(yīng)系統(tǒng)表達(dá)譜，研究炎癥在冠狀A(yù)S斑塊發(fā)生發(fā)展過程中的作用及機(jī)制；并利用動(dòng)物模型尋找冠狀A(yù)S疾病新的遺傳易感基因。評(píng)價(jià)遺傳位點(diǎn)及其聯(lián)合作用與AS指標(biāo)間的關(guān)系，計(jì)算人群歸因危險(xiǎn)度，構(gòu)建遺傳因素及環(huán)境危險(xiǎn)因素的預(yù)測(cè)模型?？尚行苑治觯耗壳笆占烁哔|(zhì)量的20000例冠狀動(dòng)脈綜合征、冠心病和心肌梗死的病例對(duì)照資料，為開展大規(guī)模重復(fù)驗(yàn)證奠定了基礎(chǔ)。已經(jīng)應(yīng)用Affymetrix 500K芯片完成了1500例心梗病例對(duì)照的全基因組關(guān)聯(lián)研究，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了imputation，獲得200萬個(gè)遺傳變異信息，并發(fā)現(xiàn)一系列顯著關(guān)聯(lián)位點(diǎn)和區(qū)域。在易感基因功能研究方面，具備分子生物學(xué)、真核基因表達(dá)調(diào)控的研究梯隊(duì)，并已開始進(jìn)行心血管疾病易感基因/多態(tài)的功能研究。給與辣椒素及黃酮類物質(zhì)喂食，分離動(dòng)脈，油紅O染色觀察斑塊面積大小。轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)現(xiàn)辣椒素和黃酮類物質(zhì)影響AS發(fā)生發(fā)展過程相關(guān)的信號(hào)途徑和分子。，進(jìn)行體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)闡明其功能。，我們利用蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)方法找到這些分子的相互作用蛋白，闡明信號(hào)通路；并通過基因表達(dá)調(diào)控的方法和技術(shù)，闡明對(duì)于下游基因表達(dá)和調(diào)控的影響。4．對(duì)于研究中發(fā)現(xiàn)起作用的關(guān)鍵分子，探討其作為診防治靶點(diǎn)的可能性。明確該分子是否可作為AS診防治的靶點(diǎn)。可行性分析：課題組長(zhǎng)期從事AS的研究，對(duì)于內(nèi)外環(huán)境因素影響AS的發(fā)病及其機(jī)制的研究具有較好的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。有轉(zhuǎn)基因動(dòng)物構(gòu)建技術(shù)和平臺(tái)，并有辣椒素靶點(diǎn)TRPV1敲除鼠及能量限制相關(guān)分子Sirtuins基因家族的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、組織特異性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和基因敲除動(dòng)物。體內(nèi)研究：，喂飼高脂食物以及損傷其動(dòng)脈壁加速AS形成，檢測(cè)動(dòng)脈、心臟和肝臟的基因組、蛋白組和代謝組學(xué)的改變，并分析這些組織的氧化應(yīng)激、炎癥以及脂代謝通路中相應(yīng)的改變，并用其他動(dòng)物模型進(jìn)一步驗(yàn)證。以驗(yàn)證在體內(nèi)是否能夠減緩AS的形成。血管壁、心臟和肝臟的基因組、蛋白組及代謝組學(xué)分析氧化應(yīng)激和炎癥通路矩陣PCR和蛋白組學(xué)確認(rèn)靶分子；結(jié)合分子對(duì)