【正文】 異構(gòu)體：其中主要的是中性α 葡糖苷酶，僅來源于附睪，另一種含量較少的酸性α 葡糖苷酶主要來源于前列腺。 ●附睪的分泌功能。精液中的果糖 可反應(yīng)精囊的分泌功能。鋅的分光光度法測定見 節(jié)。精液中的鋅，檸檬酸 (M246。 von der Kammer 等 ., 1991)。盡管可 能存在感染，當(dāng)前標(biāo)志物的總量也可能在正常范圍之內(nèi)。 解釋 毛細(xì)管測試結(jié)果可根據(jù)下表進行分類 表 毛細(xì)管檢測結(jié)果分類表 遷移距離 穿透密度 從 1cm 到 遷移減少（等級序號的下降） 在宮頸 粘液中前向運動的持續(xù)時間（小時） 等級 1 0 陰性 3 或 10 或 3 或 2 差 和 50 和 3 和 24 好 所有不能分級的試驗結(jié)果總結(jié)為 一般 附屬性腺功能的生物化學(xué)分析 現(xiàn)有多種反映附屬性腺功能的生化指標(biāo)，如前列腺分泌的檸檬酸、鋅、γ 谷氨酰基轉(zhuǎn)肽酶和酸性磷酸酶，精囊分泌的果糖和前列腺素，附睪分泌的游離 L 肉毒堿，甘油磷酸膽堿（ GPC）和中性葡糖苷酶。則遷移值減少價值是零，因為其穿透密度沒有減少，實際上是增加了 (表 )。 例 1：在 1 cm 處的穿透密 度是 51100/LPF，而在 cm 處是 610/LPF。 表 精子穿透密度排行次序 穿透密度的分類 排列順序 ：通過計算 cm 處穿透密度較 1 cm 處的減少量來獲得。計數(shù)均值用穿透密度等級來表示，如表 所示。由每低倍鏡視野 ( 100 LPF)下觀察到的每個距離點的精子平均數(shù)決定。 ：測量所浸入精液儲液槽的毛細(xì)管末端到管中最前面的精子之間的距離。 C 孵化器，且在 24 個小時后為了觀察前向運動的精子的表現(xiàn)，應(yīng)該重復(fù)檢查毛細(xì)管。 節(jié)所述，觀察毛細(xì)管應(yīng)在放大 100 的顯微鏡下。 37176。封閉時應(yīng)該用足量的封閉劑，以便使粘液柱稍突出于毛細(xì)管的開口端。 ，且保證沒有吸入空氣氣泡。 圖 . Kremer 精子穿透儀 步驟 1 個小時內(nèi)的約 100181。這種構(gòu)造可以防止精液侵入毛細(xì)管和玻璃片之間的縫隙。 上。 設(shè)備 已使用過各種不同類型的毛細(xì)管，但建議使用 5 cm 長， 3mm 寬，橫切面為 厚的扁平毛細(xì)管?，F(xiàn)已提出多種改良的毛細(xì)管試驗。 注釋：當(dāng)使用待檢夫婦的樣品其結(jié)果為異常時，應(yīng)使用供者的精液和宮頸粘液進行交叉試驗，以辨別其異常結(jié)果是 應(yīng)歸因于丈夫的精液還是妻子的宮頸粘液。指狀突起可以形成或已形成，但是精子在接觸界面的精液側(cè)聚集。這提示存在精液 宮頸粘液互作用方面的問題。 ：精子能夠穿透粘液，離開精液 粘液接觸界面的距離 500 181。即便如此，基于該結(jié)果仍可進行一系列有效地觀察。 解釋 因為在平面的玻片上使得精液 宮頸粘液接觸界面的大小和形狀完全標(biāo)準(zhǔn)化是不可能的，故該試驗的結(jié)果時常帶有一些主觀性。m (即大約為 10 個精子長度 )，即離開精液 粘液接觸界面的距離。有些精子返回精漿，但大多數(shù)精子繼續(xù)向?qū)m頸粘液深處游動，直至遇到細(xì)胞碎片或白細(xì)胞產(chǎn)生的阻力才停止。在許多情況下，單一精子可引導(dǎo)一縱列精子進入粘液。 Moghissi 等， 1964)。 觀察 觀察以下特點是否存在： ，精液是否在接觸面處形成一些指狀突起并伸入粘液。 C 在一個濕潤的溫箱 (即在一個有蓋的培養(yǎng)皿的水飽和的濾紙 )防止變干。這樣，就在宮頸粘液與精液之間形成一個清晰的接觸界面。m玻璃珠的蠟油凝膠混合物或硅滑脂的蓋玻片 (見框 )，從而保證所制備涂片厚度的標(biāo)準(zhǔn)一致 (Drobnis 等 , 1988)。 體外簡化的載玻片試驗 步驟 ，用蓋玻片鋪平 (22 mm 22 mm)。因為使用這些材質(zhì)無法提供關(guān)于精子在粘液中活動 能力方面的信息 (Neuwinger 等 ., 1991。當(dāng) pH 值在 — 范圍時，精子仍能穿透宮頸粘液，但是其活力在低于 時經(jīng)常被嚴(yán)重削弱，如宮頸粘液的pH 值低于 時多無進行檢查的必要。強堿性的宮頸粘液 (pH )會對精子的存活產(chǎn)生不利影響。 ●精子對于宮頸粘液的酸堿度的 變化很敏感。如果是在體內(nèi)測量酸堿度，應(yīng)注意采取正確適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM行測量，因為宮頸外的粘液總是比宮頸內(nèi)的粘液的酸堿度要低。 ●應(yīng)該在收集精液 1 個小時內(nèi)做體外測試，防止失水或溫度導(dǎo)致精液質(zhì)量的變化。 注釋 3：使用克羅米芬促排卵的婦女不應(yīng)成為宮頸粘液的供體，因為這一宮頸中的抗雌激素成分可能會對宮頸粘液產(chǎn)生影響。收集宮頸粘液應(yīng)在授精之前。 注釋 1：宮頸粘液的采集可以在婦女的月經(jīng)中期，預(yù)約人工受精的婦女處獲得捐獻(xiàn)者的宮頸粘液。 ●當(dāng)評估幾個精液標(biāo)本的質(zhì)量時，應(yīng)該使用同一種在月經(jīng)中期的優(yōu)質(zhì)宮頸粘液。通常，當(dāng)性交后試驗結(jié)果為異常時才進行這些體外試驗，并且使用受捐獻(xiàn)者 的精液和宮頸粘液進行交叉試驗以獲得更多的信息。 注釋 3：在所選擇的周期內(nèi)的最佳時間內(nèi)重復(fù)進行檢測，如所得結(jié)果總為陰性，則可斷定宮頸因素可能為不育的一個原因。如無法合理精確推算排卵時間，則需在月經(jīng)周期中反復(fù)多次作性交后試驗或體外試驗。在有生育力的婦女中，于月經(jīng)周 期內(nèi)過早或過遲進行試驗也可以出現(xiàn)陰性結(jié)果。 注釋 1：如果在宮頸管或在陰道樣品中未發(fā)現(xiàn)精子，應(yīng)該詢問夫婦以證實陰道內(nèi)射精的發(fā)生。 ●當(dāng)觀察到非快速前向運動精子表現(xiàn)出一種顫動現(xiàn)象時，則可推斷宮頸粘液或是精子表面存在抗體。 解釋 ●如果未在粘液中發(fā)現(xiàn)精子則為測試陰性。 非快速前向運動性 ?？焖偾跋蜻\動性 。對于 10 個細(xì)胞的樣本誤差的報告在表 中（約為 32%）。l。 因此在放大倍數(shù)為 400，涂片厚度為 100181。m 2 ，其體積為 19 637 500181。m， r2=62 500181。如孔徑為 20mm 的 10倍的目鏡和 40的物鏡，其顯微視野的直徑約為 500181。 框 顯微鏡下所能觀察 到的宮頸粘液的體積取決于顯微鏡視野的面積和槽的深度 (π r2，π約取 ， r 是顯微鏡視野的半徑 )。 穿過宮頸粘液的精子數(shù)目的評估一般采取計數(shù)高倍鏡視野下所見精子數(shù)目的方法 (參見框)。 宮頸粘液樣品 精子在宮頸管較低位置的數(shù)量取決于時間長短。 陰道中的精液樣品 精子在陰道內(nèi)兩個小時就會失活。當(dāng)尚有余溫時，將其吸入 3ml 或5ml 注射器 (無針頭 )。 C)，用玻璃棒在燒杯中混合礦脂。 框 石蠟油混合物的制備 應(yīng)預(yù)先準(zhǔn)備好蠟與石油的混合物于室溫下儲存?zhèn)溆谩? 400 放大觀察。 （規(guī)格 22 mm 22 mm）鋪平，制備物的厚度可用硅化的 100181。 、移液管或聚乙烯管在陰道后穹窿部吸取混合樣本。 。 。對于一個試驗室來說，重要的是使性交后檢查宮頸粘液的時間標(biāo)準(zhǔn)化，這一時間應(yīng) 是 9～ 14 小時。此信息可用于評價男性或女性伴侶陽性抗精子抗體的意義。 體內(nèi)試驗 目的 性 交后試驗的目的是確定性交后數(shù)小時內(nèi)宮頸粘液（粘液的儲存作用）中活躍精子的數(shù)目，評估精子存活數(shù)目（ Sobrero amp。 注：請參閱資料附錄 5 的宮頸粘液的收集，儲存和特性評價。即使同一個體，不同的月經(jīng)周期也不盡相同。 精子 宮頸粘液相互作用 在月經(jīng)周期（中期）中，當(dāng)雌激素使宮頸粘液變得易為精子穿透時，精子才可在這一有限的時間內(nèi)穿透宮頸粘液。精子穿透宮頸粘液時間的長短變化范圍很大，因婦女個體而異。因此，只有對不同月經(jīng)周期進行重復(fù)試驗，才能對精子 宮頸粘液相互作用的異常作出結(jié)論。 注釋：當(dāng)一個人不能提供一份精液樣本時，性交后試驗（見 節(jié)）可以提供一些有關(guān)他精子的信息。 MacLeod， 1962）和精子的活動情況（ Moghissi， 1976）。 時間選擇 性交后試驗應(yīng)盡可能靠近排卵期進行，排卵期可以根據(jù)一些臨床指標(biāo)，例如一般情況下的周期長短，基礎(chǔ)體溫、宮頸粘液的變化，陰道細(xì)胞學(xué)檢查，血清或尿中雌激素水平及卵巢超聲排卵檢查。 指導(dǎo)病人 對于準(zhǔn)備進行性交后試驗病人應(yīng)告知進行檢測的最適時間，同時告知下述事項： 2 天男方要避免性生活及手淫。 ，也不能在性交后進行陰道沖洗（在性交后可以淋浴，但不可使用盆?。?。 步驟 。 宮頸管內(nèi)的粘液標(biāo)本。m 玻璃珠進行標(biāo)準(zhǔn)化 (Drobnis 等 , 1988)的控制（見框 ）。 注：只有可靠且無血液污染的粘液樣本才能保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性?？稍跓腥刍?(熔點為 4866176?；旌贤瓿珊笞屍渥匀焕鋮s。一旦混合物固化，使用裝載注射器提取。觀察陰道中精子涂片的目的 (參見 節(jié) )是保證精液確實曾存在于陰道內(nèi)。在性交以后的二個到三個小時之內(nèi)，有大量精子儲積在子宮頸管的較低位置。推薦以粘液中的精子濃度為標(biāo)準(zhǔn)單位（精子數(shù) /mm3）表示。顯微鏡視野的直徑可以通過載物臺上的刻度尺或是目鏡的孔徑除以物鏡的放大倍數(shù)進行估量。m（ 20mm/40），則其半徑為 r=250181。m 2, π r2 = 196 375181。m 3 即大約 t 20 nl。m，這種情況下計數(shù)為 10 個細(xì)胞 /HPF 則大約為 10個 /20nl，即等于約 500 個細(xì)胞每 181。然而，因為計數(shù)的細(xì)胞的總數(shù)很低，故抽樣誤差高。 精子在子宮頸粘液中的活力分級如下： ● PR = progressive motility。 ● NP = nonprogressive motility。 ● IM = immotile spermatozoa. 非活動精子 正常宮頸功能的最重要指標(biāo)是精子在其中表現(xiàn)為快速前向運動。 ●排除其它明顯的性交后宮頸因素，如果在性交后 914 小時內(nèi)沒有在宮頸粘液內(nèi)發(fā)現(xiàn)快速前向運動的精子，或是男方或女方存在抗精子抗體，均有可能是造成不育的因素（ Oei 等，1995）。 注：如果最初的結(jié)果是異?；蜿幮裕瑧?yīng)該重復(fù)性交后的試驗。 注釋 2：試驗陰性或歸結(jié)于不當(dāng)?shù)臅r間。有些婦女可能在整個月經(jīng)周期中僅 1 或 2 天有陽性結(jié)果。為了確定宮頸因素作為可能的不孕原因，需要選擇月經(jīng)周期中最佳時機重復(fù)進行對異性的性交后試驗。 體外實驗 使用體外試驗對精液 子宮頸粘液相互作用予以詳細(xì)的評估。 ●當(dāng)精液子宮頸粘液相互作用試驗的目的是比較不同子宮頸粘液標(biāo)本的質(zhì)量時，應(yīng)使用單一的正常精液樣本。 注：參見附錄 5 中關(guān)于宮頸粘液的收集、存貯和評估細(xì)節(jié)。該婦女可為自然周期或使用促性腺激素誘發(fā)的排卵周期。 注釋 2：可給予婦女雌二醇 710 天以產(chǎn)生雌化的宮頸粘液 (見附錄 5， 節(jié) )。 ●應(yīng)該使用人類月經(jīng)中期的宮頸粘液。 ●宮頸管內(nèi)的宮頸粘液的酸堿度應(yīng)該用范圍為 610的 pH 試紙在體內(nèi)或是收集后立即進行測量。應(yīng)注意不要使酸堿度較低的陰道分泌物污染了宮頸粘液。酸性粘液可使精子制動，而堿性粘液可提高其活力。精子能夠活動和存活的最適 pH 值范圍為 — ，這也是月經(jīng)中期宮頸粘液 pH 的正常范圍。 注：替代用凝膠，例如牛的宮頸粘液或合成凝膠，不應(yīng)考慮作為精液 宮頸粘液相互作用體外試驗的人的宮頸粘液代用品。 Ivic 等 ., 2020)?？墒褂煤兄睆?100181。 ，借助于毛細(xì)作用使精液移向蓋玻片下。 平地存放載玻片在 30分鐘在 37176。 400 倍鏡下仔細(xì)觀察接觸面。這是一種物理特性，不含有精子的精液也會發(fā)生 (Perloff 和 steinberger 1963。 。 ，精子呈扇型散開 并隨意游動。 500181。 (應(yīng)注意觀察活動精子的百分比例以及是否為正向運動 )。因此，精液 宮頸粘液互作用僅為一個定性評估。 ：精子能夠穿透粘液且有超過 90%的活動精子為直線運動。m (即大約為 10個精子長度 )。 ：包括 (1)精子可穿透粘液，但是迅速失活或顯示為“抖動”運動，或 (2)精液未穿透精液 粘液接觸界面。提示存在抗精子抗體。 毛細(xì)管測試 毛細(xì)管測試最初是由 Kremer 設(shè)計的 (1965)，本法是在一毛細(xì)管內(nèi)測量精子穿透宮頸粘液柱的能力。本手冊推薦地方法基于 Kremer 的原試驗。 Kremer 精子穿透儀 (圖 )的制作過程如下： (直徑大約 mm)的三個儲液囊 (R)粘在一個玻片上。第二張玻璃片應(yīng)該比第一個短 ，并固定在離儲液囊 5 mm 的位置。 。l 液化精液樣本。 ，塑形黏土或類似的材料，密封每支管的一個末端。 ，使它深入含有精液標(biāo)本的儲液 囊內(nèi) 。 C 的潮濕房間內(nèi) 2 個小時 (如在一個加蓋的培養(yǎng)皿中置入飽含水分的濾紙 )防止精液和粘液變干。 37176。 觀察 在 2 個小時以后，評估遷移距離、穿透密度、遷移所導(dǎo)致的精子減少數(shù)目和前向運動精子的數(shù)目。 ：在距浸入精液儲液槽 內(nèi)的毛細(xì)管末端 1cm 和 的兩個點處測定。 通過計數(shù)五個低倍鏡視野而獲得平均數(shù)。對于測試的分類，以 1 或 cm 的距離下最高的精子穿入密度等級作為檢驗的結(jié)果。以不同等級序號表示。則遷移減少值是 3 (等級序號 6 減去 3) (表 ) 例 2：在 1cm 處的滲透密度是 2150/LPF，而在 cm 處是 51100。 4. 2 小時和 24 小時分別測定在宮頸粘液中出現(xiàn)的前向運動的精子數(shù)目。 感染可能有時會導(dǎo)致在這些標(biāo)志性的分泌物的減少。某種感染也可能對分泌性上皮造成不可逆的損傷，因此在治療以后分泌物仍可能處于低水平 (Cooper 等 ., 1990a。