【正文】 異構(gòu)體：其中主要的是中性α 葡糖苷酶，僅來源于附睪，另一種含量較少的酸性α 葡糖苷酶主要來源于前列腺。 ●附睪的分泌功能。精液中的果糖 可反應(yīng)精囊的分泌功能。鋅的分光光度法測定見 節(jié)。精液中的鋅，檸檬酸 (M246。 von der Kammer 等 ., 1991)。盡管可 能存在感染，當(dāng)前標(biāo)志物的總量也可能在正常范圍之內(nèi)。 解釋 毛細(xì)管測試結(jié)果可根據(jù)下表進(jìn)行分類 表 毛細(xì)管檢測結(jié)果分類表 遷移距離 穿透密度 從 1cm 到 遷移減少（等級(jí)序號(hào)的下降） 在宮頸 粘液中前向運(yùn)動(dòng)的持續(xù)時(shí)間（小時(shí)） 等級(jí) 1 0 陰性 3 或 10 或 3 或 2 差 和 50 和 3 和 24 好 所有不能分級(jí)的試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)為 一般 附屬性腺功能的生物化學(xué)分析 現(xiàn)有多種反映附屬性腺功能的生化指標(biāo)，如前列腺分泌的檸檬酸、鋅、γ 谷氨?；D(zhuǎn)肽酶和酸性磷酸酶，精囊分泌的果糖和前列腺素，附睪分泌的游離 L 肉毒堿，甘油磷酸膽堿（ GPC）和中性葡糖苷酶。則遷移值減少價(jià)值是零，因?yàn)槠浯┩该芏葲]有減少，實(shí)際上是增加了 (表 )。 例 1：在 1 cm 處的穿透密 度是 51100/LPF，而在 cm 處是 610/LPF。 表 精子穿透密度排行次序 穿透密度的分類 排列順序 ：通過計(jì)算 cm 處穿透密度較 1 cm 處的減少量來獲得。計(jì)數(shù)均值用穿透密度等級(jí)來表示，如表 所示。由每低倍鏡視野 ( 100 LPF)下觀察到的每個(gè)距離點(diǎn)的精子平均數(shù)決定。 ：測量所浸入精液儲(chǔ)液槽的毛細(xì)管末端到管中最前面的精子之間的距離。 C 孵化器，且在 24 個(gè)小時(shí)后為了觀察前向運(yùn)動(dòng)的精子的表現(xiàn)，應(yīng)該重復(fù)檢查毛細(xì)管。 節(jié)所述，觀察毛細(xì)管應(yīng)在放大 100 的顯微鏡下。 37176。封閉時(shí)應(yīng)該用足量的封閉劑，以便使粘液柱稍突出于毛細(xì)管的開口端。 ，且保證沒有吸入空氣氣泡。 圖 . Kremer 精子穿透儀 步驟 1 個(gè)小時(shí)內(nèi)的約 100181。這種構(gòu)造可以防止精液侵入毛細(xì)管和玻璃片之間的縫隙。 上。 設(shè)備 已使用過各種不同類型的毛細(xì)管，但建議使用 5 cm 長， 3mm 寬，橫切面為 厚的扁平毛細(xì)管?，F(xiàn)已提出多種改良的毛細(xì)管試驗(yàn)。 注釋：當(dāng)使用待檢夫婦的樣品其結(jié)果為異常時(shí)，應(yīng)使用供者的精液和宮頸粘液進(jìn)行交叉試驗(yàn)，以辨別其異常結(jié)果是 應(yīng)歸因于丈夫的精液還是妻子的宮頸粘液。指狀突起可以形成或已形成，但是精子在接觸界面的精液側(cè)聚集。這提示存在精液 宮頸粘液互作用方面的問題。 ：精子能夠穿透粘液，離開精液 粘液接觸界面的距離 500 181。即便如此，基于該結(jié)果仍可進(jìn)行一系列有效地觀察。 解釋 因?yàn)樵谄矫娴牟Ｆ鲜沟镁?宮頸粘液接觸界面的大小和形狀完全標(biāo)準(zhǔn)化是不可能的，故該試驗(yàn)的結(jié)果時(shí)常帶有一些主觀性。m (即大約為 10 個(gè)精子長度 )，即離開精液 粘液接觸界面的距離。有些精子返回精漿，但大多數(shù)精子繼續(xù)向?qū)m頸粘液深處游動(dòng)，直至遇到細(xì)胞碎片或白細(xì)胞產(chǎn)生的阻力才停止。在許多情況下，單一精子可引導(dǎo)一縱列精子進(jìn)入粘液。 Moghissi 等， 1964)。 觀察 觀察以下特點(diǎn)是否存在： ，精液是否在接觸面處形成一些指狀突起并伸入粘液。 C 在一個(gè)濕潤的溫箱 (即在一個(gè)有蓋的培養(yǎng)皿的水飽和的濾紙 )防止變干。這樣，就在宮頸粘液與精液之間形成一個(gè)清晰的接觸界面。m玻璃珠的蠟油凝膠混合物或硅滑脂的蓋玻片 (見框 )，從而保證所制備涂片厚度的標(biāo)準(zhǔn)一致 (Drobnis 等 , 1988)。 體外簡化的載玻片試驗(yàn) 步驟 ，用蓋玻片鋪平 (22 mm 22 mm)。因?yàn)槭褂眠@些材質(zhì)無法提供關(guān)于精子在粘液中活動(dòng) 能力方面的信息 (Neuwinger 等 ., 1991。當(dāng) pH 值在 — 范圍時(shí)，精子仍能穿透宮頸粘液，但是其活力在低于 時(shí)經(jīng)常被嚴(yán)重削弱，如宮頸粘液的pH 值低于 時(shí)多無進(jìn)行檢查的必要。強(qiáng)堿性的宮頸粘液 (pH )會(huì)對(duì)精子的存活產(chǎn)生不利影響。 ●精子對(duì)于宮頸粘液的酸堿度的 變化很敏感。如果是在體內(nèi)測量酸堿度，應(yīng)注意采取正確適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行測量，因?yàn)閷m頸外的粘液總是比宮頸內(nèi)的粘液的酸堿度要低。 ●應(yīng)該在收集精液 1 個(gè)小時(shí)內(nèi)做體外測試，防止失水或溫度導(dǎo)致精液質(zhì)量的變化。 注釋 3：使用克羅米芬促排卵的婦女不應(yīng)成為宮頸粘液的供體，因?yàn)檫@一宮頸中的抗雌激素成分可能會(huì)對(duì)宮頸粘液產(chǎn)生影響。收集宮頸粘液應(yīng)在授精之前。 注釋 1：宮頸粘液的采集可以在婦女的月經(jīng)中期，預(yù)約人工受精的婦女處獲得捐獻(xiàn)者的宮頸粘液。 ●當(dāng)評(píng)估幾個(gè)精液標(biāo)本的質(zhì)量時(shí)，應(yīng)該使用同一種在月經(jīng)中期的優(yōu)質(zhì)宮頸粘液。通常，當(dāng)性交后試驗(yàn)結(jié)果為異常時(shí)才進(jìn)行這些體外試驗(yàn)，并且使用受捐獻(xiàn)者 的精液和宮頸粘液進(jìn)行交叉試驗(yàn)以獲得更多的信息。 注釋 3：在所選擇的周期內(nèi)的最佳時(shí)間內(nèi)重復(fù)進(jìn)行檢測，如所得結(jié)果總為陰性，則可斷定宮頸因素可能為不育的一個(gè)原因。如無法合理精確推算排卵時(shí)間，則需在月經(jīng)周期中反復(fù)多次作性交后試驗(yàn)或體外試驗(yàn)。在有生育力的婦女中，于月經(jīng)周 期內(nèi)過早或過遲進(jìn)行試驗(yàn)也可以出現(xiàn)陰性結(jié)果。 注釋 1：如果在宮頸管或在陰道樣品中未發(fā)現(xiàn)精子，應(yīng)該詢問夫婦以證實(shí)陰道內(nèi)射精的發(fā)生。 ●當(dāng)觀察到非快速前向運(yùn)動(dòng)精子表現(xiàn)出一種顫動(dòng)現(xiàn)象時(shí)，則可推斷宮頸粘液或是精子表面存在抗體。 解釋 ●如果未在粘液中發(fā)現(xiàn)精子則為測試陰性。 非快速前向運(yùn)動(dòng)性 ?？焖偾跋蜻\(yùn)動(dòng)性 。對(duì)于 10 個(gè)細(xì)胞的樣本誤差的報(bào)告在表 中（約為 32%）。l。 因此在放大倍數(shù)為 400，涂片厚度為 100181。m 2 ，其體積為 19 637 500181。m， r2=62 500181。如孔徑為 20mm 的 10倍的目鏡和 40的物鏡，其顯微視野的直徑約為 500181。 框 顯微鏡下所能觀察 到的宮頸粘液的體積取決于顯微鏡視野的面積和槽的深度 (π r2，π約取 ， r 是顯微鏡視野的半徑 )。 穿過宮頸粘液的精子數(shù)目的評(píng)估一般采取計(jì)數(shù)高倍鏡視野下所見精子數(shù)目的方法 (參見框)。 宮頸粘液樣品 精子在宮頸管較低位置的數(shù)量取決于時(shí)間長短。 陰道中的精液樣品 精子在陰道內(nèi)兩個(gè)小時(shí)就會(huì)失活。當(dāng)尚有余溫時(shí)，將其吸入 3ml 或5ml 注射器 (無針頭 )。 C)，用玻璃棒在燒杯中混合礦脂。 框 石蠟油混合物的制備 應(yīng)預(yù)先準(zhǔn)備好蠟與石油的混合物于室溫下儲(chǔ)存?zhèn)溆谩? 400 放大觀察。 （規(guī)格 22 mm 22 mm）鋪平，制備物的厚度可用硅化的 100181。 、移液管或聚乙烯管在陰道后穹窿部吸取混合樣本。 。 。對(duì)于一個(gè)試驗(yàn)室來說，重要的是使性交后檢查宮頸粘液的時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化，這一時(shí)間應(yīng) 是 9～ 14 小時(shí)。此信息可用于評(píng)價(jià)男性或女性伴侶陽性抗精子抗體的意義。 體內(nèi)試驗(yàn) 目的 性 交后試驗(yàn)的目的是確定性交后數(shù)小時(shí)內(nèi)宮頸粘液（粘液的儲(chǔ)存作用）中活躍精子的數(shù)目，評(píng)估精子存活數(shù)目（ Sobrero amp。 注：請(qǐng)參閱資料附錄 5 的宮頸粘液的收集，儲(chǔ)存和特性評(píng)價(jià)。即使同一個(gè)體，不同的月經(jīng)周期也不盡相同。 精子 宮頸粘液相互作用 在月經(jīng)周期（中期）中，當(dāng)雌激素使宮頸粘液變得易為精子穿透時(shí)，精子才可在這一有限的時(shí)間內(nèi)穿透宮頸粘液。精子穿透宮頸粘液時(shí)間的長短變化范圍很大，因婦女個(gè)體而異。因此，只有對(duì)不同月經(jīng)周期進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，才能對(duì)精子 宮頸粘液相互作用的異常作出結(jié)論。 注釋：當(dāng)一個(gè)人不能提供一份精液樣本時(shí)，性交后試驗(yàn)（見 節(jié)）可以提供一些有關(guān)他精子的信息。 MacLeod， 1962）和精子的活動(dòng)情況（ Moghissi， 1976）。 時(shí)間選擇 性交后試驗(yàn)應(yīng)盡可能靠近排卵期進(jìn)行，排卵期可以根據(jù)一些臨床指標(biāo)，例如一般情況下的周期長短，基礎(chǔ)體溫、宮頸粘液的變化，陰道細(xì)胞學(xué)檢查，血清或尿中雌激素水平及卵巢超聲排卵檢查。 指導(dǎo)病人 對(duì)于準(zhǔn)備進(jìn)行性交后試驗(yàn)病人應(yīng)告知進(jìn)行檢測的最適時(shí)間，同時(shí)告知下述事項(xiàng)： 2 天男方要避免性生活及手淫。 ，也不能在性交后進(jìn)行陰道沖洗（在性交后可以淋浴，但不可使用盆浴）。 步驟 。 宮頸管內(nèi)的粘液標(biāo)本。m 玻璃珠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化 (Drobnis 等 , 1988)的控制（見框 ）。 注：只有可靠且無血液污染的粘液樣本才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。可在燒杯中熔化蠟 (熔點(diǎn)為 4866176?；旌贤瓿珊笞屍渥匀焕鋮s。一旦混合物固化，使用裝載注射器提取。觀察陰道中精子涂片的目的 (參見 節(jié) )是保證精液確實(shí)曾存在于陰道內(nèi)。在性交以后的二個(gè)到三個(gè)小時(shí)之內(nèi)，有大量精子儲(chǔ)積在子宮頸管的較低位置。推薦以粘液中的精子濃度為標(biāo)準(zhǔn)單位（精子數(shù) /mm3）表示。顯微鏡視野的直徑可以通過載物臺(tái)上的刻度尺或是目鏡的孔徑除以物鏡的放大倍數(shù)進(jìn)行估量。m（ 20mm/40），則其半徑為 r=250181。m 2, π r2 = 196 375181。m 3 即大約 t 20 nl。m，這種情況下計(jì)數(shù)為 10 個(gè)細(xì)胞 /HPF 則大約為 10個(gè) /20nl，即等于約 500 個(gè)細(xì)胞每 181。然而，因?yàn)橛?jì)數(shù)的細(xì)胞的總數(shù)很低，故抽樣誤差高。 精子在子宮頸粘液中的活力分級(jí)如下： ● PR = progressive motility。 ● NP = nonprogressive motility。 ● IM = immotile spermatozoa. 非活動(dòng)精子 正常宮頸功能的最重要指標(biāo)是精子在其中表現(xiàn)為快速前向運(yùn)動(dòng)。 ●排除其它明顯的性交后宮頸因素，如果在性交后 914 小時(shí)內(nèi)沒有在宮頸粘液內(nèi)發(fā)現(xiàn)快速前向運(yùn)動(dòng)的精子，或是男方或女方存在抗精子抗體，均有可能是造成不育的因素（ Oei 等，1995）。 注：如果最初的結(jié)果是異?；蜿幮?，應(yīng)該重復(fù)性交后的試驗(yàn)。 注釋 2：試驗(yàn)陰性或歸結(jié)于不當(dāng)?shù)臅r(shí)間。有些婦女可能在整個(gè)月經(jīng)周期中僅 1 或 2 天有陽性結(jié)果。為了確定宮頸因素作為可能的不孕原因，需要選擇月經(jīng)周期中最佳時(shí)機(jī)重復(fù)進(jìn)行對(duì)異性的性交后試驗(yàn)。 體外實(shí)驗(yàn) 使用體外試驗(yàn)對(duì)精液 子宮頸粘液相互作用予以詳細(xì)的評(píng)估。 ●當(dāng)精液子宮頸粘液相互作用試驗(yàn)的目的是比較不同子宮頸粘液標(biāo)本的質(zhì)量時(shí)，應(yīng)使用單一的正常精液樣本。 注：參見附錄 5 中關(guān)于宮頸粘液的收集、存貯和評(píng)估細(xì)節(jié)。該婦女可為自然周期或使用促性腺激素誘發(fā)的排卵周期。 注釋 2：可給予婦女雌二醇 710 天以產(chǎn)生雌化的宮頸粘液 (見附錄 5， 節(jié) )。 ●應(yīng)該使用人類月經(jīng)中期的宮頸粘液。 ●宮頸管內(nèi)的宮頸粘液的酸堿度應(yīng)該用范圍為 610的 pH 試紙?jiān)隗w內(nèi)或是收集后立即進(jìn)行測量。應(yīng)注意不要使酸堿度較低的陰道分泌物污染了宮頸粘液。酸性粘液可使精子制動(dòng)，而堿性粘液可提高其活力。精子能夠活動(dòng)和存活的最適 pH 值范圍為 — ，這也是月經(jīng)中期宮頸粘液 pH 的正常范圍。 注：替代用凝膠，例如牛的宮頸粘液或合成凝膠，不應(yīng)考慮作為精液 宮頸粘液相互作用體外試驗(yàn)的人的宮頸粘液代用品。 Ivic 等 ., 2020)?？墒褂煤兄睆?100181。 ，借助于毛細(xì)作用使精液移向蓋玻片下。 平地存放載玻片在 30分鐘在 37176。 400 倍鏡下仔細(xì)觀察接觸面。這是一種物理特性，不含有精子的精液也會(huì)發(fā)生 (Perloff 和 steinberger 1963。 。 ，精子呈扇型散開 并隨意游動(dòng)。 500181。 (應(yīng)注意觀察活動(dòng)精子的百分比例以及是否為正向運(yùn)動(dòng) )。因此，精液 宮頸粘液互作用僅為一個(gè)定性評(píng)估。 ：精子能夠穿透粘液且有超過 90%的活動(dòng)精子為直線運(yùn)動(dòng)。m (即大約為 10個(gè)精子長度 )。 ：包括 (1)精子可穿透粘液，但是迅速失活或顯示為“抖動(dòng)”運(yùn)動(dòng)，或 (2)精液未穿透精液 粘液接觸界面。提示存在抗精子抗體。 毛細(xì)管測試 毛細(xì)管測試最初是由 Kremer 設(shè)計(jì)的 (1965)，本法是在一毛細(xì)管內(nèi)測量精子穿透宮頸粘液柱的能力。本手冊(cè)推薦地方法基于 Kremer 的原試驗(yàn)。 Kremer 精子穿透儀 (圖 )的制作過程如下： (直徑大約 mm)的三個(gè)儲(chǔ)液囊 (R)粘在一個(gè)玻片上。第二張玻璃片應(yīng)該比第一個(gè)短 ，并固定在離儲(chǔ)液囊 5 mm 的位置。 。l 液化精液樣本。 ，塑形黏土或類似的材料，密封每支管的一個(gè)末端。 ，使它深入含有精液標(biāo)本的儲(chǔ)液 囊內(nèi) 。 C 的潮濕房間內(nèi) 2 個(gè)小時(shí) (如在一個(gè)加蓋的培養(yǎng)皿中置入飽含水分的濾紙 )防止精液和粘液變干。 37176。 觀察 在 2 個(gè)小時(shí)以后，評(píng)估遷移距離、穿透密度、遷移所導(dǎo)致的精子減少數(shù)目和前向運(yùn)動(dòng)精子的數(shù)目。 ：在距浸入精液儲(chǔ)液槽 內(nèi)的毛細(xì)管末端 1cm 和 的兩個(gè)點(diǎn)處測定。 通過計(jì)數(shù)五個(gè)低倍鏡視野而獲得平均數(shù)。對(duì)于測試的分類，以 1 或 cm 的距離下最高的精子穿入密度等級(jí)作為檢驗(yàn)的結(jié)果。以不同等級(jí)序號(hào)表示。則遷移減少值是 3 (等級(jí)序號(hào) 6 減去 3) (表 ) 例 2：在 1cm 處的滲透密度是 2150/LPF，而在 cm 處是 51100。 4. 2 小時(shí)和 24 小時(shí)分別測定在宮頸粘液中出現(xiàn)的前向運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)目。 感染可能有時(shí)會(huì)導(dǎo)致在這些標(biāo)志性的分泌物的減少。某種感染也可能對(duì)分泌性上皮造成不可逆的損傷，因此在治療以后分泌物仍可能處于低水平 (Cooper 等 ., 1990a。