薄層色譜法ppt課件-展示頁(yè)
2025-05-13 12:08本頁(yè)面
【正文】 展開槽中被展開劑蒸氣飽和后再進(jìn)行展開就可以消除。 適宜的相對(duì)濕度范圍也決定于溶質(zhì)和溶劑的極性。 常用的點(diǎn)樣方式 a 一般點(diǎn)樣 b 徑向點(diǎn)樣 c 條狀點(diǎn)樣 d 線形小孔點(diǎn)樣 e 樣品填入溝槽 徑向展開與普通展開的區(qū)別 4. 點(diǎn)樣容器 ? 定容毛細(xì)管 ? 微量注射器 ? 點(diǎn)樣器 (五 ) 展 開 1. 水蒸氣的影響 2. 溶劑蒸氣的影響 3. 展開槽 4. 展開方式 5. 幾種新型的展開技術(shù) 6. 展開操作 21 在吸附薄層色譜的展開過程中，空氣的相對(duì)濕度以及展開槽中的水蒸氣必須嚴(yán)格控制，微量的水也能對(duì)色譜分離結(jié)果產(chǎn)生較大的影響。總之點(diǎn)樣量隨分離目的而定。一般來說，樣品量最小為幾 ng，常用量為幾至幾十 181。 微量圓環(huán)技術(shù) 1 用環(huán)己烷展開 2用苯展開 3用氯仿展開 微量圓環(huán)技術(shù) (四 ) 點(diǎn) 樣 一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等揮發(fā)性有機(jī)溶劑，最好用與展開劑極性相似的溶劑溶解試樣，配成 %~1%的試液。用微型薄層，節(jié)省材料和時(shí)間。 ? 例如環(huán)己烷 丙酮 二乙胺 水（ 10:5:2:5）這個(gè)系統(tǒng)中， 水是極性大的溶劑，環(huán)己烷是極性小的溶劑，后者的加入可以降低分離物質(zhì)的 Rf值，丙酮起著混勻整個(gè)系統(tǒng)及降低展開劑粘度的作用，少量二乙胺的加入控制了展開劑的 pH值以使分離后的斑點(diǎn)不致拖尾，分離清晰。 ? 在展開劑中加入少量酸、堿可以使某些極性物質(zhì)斑點(diǎn)集中，提高分離度。 ? 極性較小的溶劑降低極性大的溶劑的洗脫能力，使 Rf值降低。若將這三個(gè)因素各自固定在圓周的三分之一，轉(zhuǎn)動(dòng)圓盤正中的三角形，如果角 A指向極性物質(zhì)，則角 B指向活度小的吸附劑，角 C就指向選用極性展開劑；如轉(zhuǎn)到A’， B’， C’處則又要作另外的選擇組合。 (二 ) 薄層板的制作 11 (三 )薄層層析中展開劑的選擇 主要根據(jù)極性的不同來選擇流動(dòng)相展開劑。 ? 吸附劑的選擇：首先決定于 樣品成分 的性質(zhì)，即它們的 溶解性、酸堿性、極性 以及是否與吸附劑起 化學(xué)反應(yīng) 等； ? 其次要考慮吸附劑、載體是否容易得到及其價(jià)格等。 一 .前言 定義 : 常用的薄層色譜法以吸附劑為固定相 ,屬于吸附色譜的范疇 繼柱色譜和紙色譜之后發(fā)展起來的方法 4 薄層色譜與液相色譜法比較 HPLC TLC 每次只能分析一個(gè)樣品 在一塊板上點(diǎn)上多個(gè)樣品同時(shí)進(jìn)行分離 對(duì)樣品制備要求高，必須不含可吸留在柱上的雜質(zhì)，否則柱性能受損 用畢一次棄去，可直接用樣品的粗提物點(diǎn)樣 可用檢測(cè)器種類較少 展開后可用多種手段檢測(cè) 特點(diǎn) 5 薄層色譜與柱層析和紙層析比較 (1)快速 (數(shù)十秒 ~數(shù)十分鐘 ) (2)分離效率高 (多柱路 ) (3)靈敏度高 (斑點(diǎn)擴(kuò)散小 ,比紙色譜高 10100倍 ) (4)顯色方法多樣 (腐蝕性顯色劑 ) (5)圖象易保存 6 ? 比移值（ Rf） Rf =原點(diǎn)至組分點(diǎn)中心的距離 /原點(diǎn)至流動(dòng)前沿的距離 組分 A的 Rf =a/c 組分 B的 Rf =b/c ? 相對(duì)比移值，即相對(duì)于某一物質(zhì) x的 Rf值，用 Rx表示。薄 層 色 譜 法 （ Thinlayer Chromatography， TLC） 目 錄 一 前言 二 基本參數(shù) 三 薄層層析的操作 四 特殊的薄層 五 應(yīng)用舉例 3 薄層色譜法通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法 。即將固定相在玻璃、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層，試樣點(diǎn)在薄層的一端，流動(dòng)相借毛細(xì)作用流經(jīng)固定相 ,使被分離的物質(zhì)展開。 其定義為： Rx＝組分的 Rf值／物質(zhì) x的 Rf值 組分 A相對(duì)于物質(zhì) B的 “ 相對(duì)比移值 ” RB =a/b
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