微生物的誘變育種ppt課件-展示頁
2025-05-12 23:19本頁面
【正文】 應(yīng)的影響 ? (3) 平皿密度效應(yīng) 影響突變率的因素 第三節(jié) 突變株的分離與篩選 ?篩選的發(fā)展趨勢(shì)： 隨機(jī)亂向篩選 定向篩選 ?突變是隨機(jī)不定向的，但是篩選是定向的，培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是決定菌種某些特性保留或淘汰的“篩子”。 誘變劑及誘變劑量 ? (3) 誘變劑對(duì)產(chǎn)量的誘變作用，大致趨向是：處理劑量大，殺菌率高 (90～ 99％ )，在單位存活細(xì)胞中負(fù)變菌株多，正變菌株少；但在不多的正變株中可能篩選到產(chǎn)量提高幅度大的變株。 誘變劑及誘變劑量 2. 最適誘變劑量的選擇 (2) 最大形態(tài)變異率的劑量不一定是誘發(fā)正變的最適劑量。 ? 三種方法： ? 菌絲尖端法 ? 處理單菌落周圍尖端菌絲 ? 混合處理法 成熟而新鮮的孢子 液體培養(yǎng)基 振蕩培養(yǎng)至孢子剛剛萌發(fā) 振蕩打碎孢子團(tuán)塊 離心洗滌 菌體計(jì)數(shù)，調(diào)整濃度 過濾 加入緩沖液 單孢子 (或單細(xì)胞 )懸液的制備 2. 菌懸液制備方法 1. 誘變劑種類的選擇 ? (1) 選擇誘變劑 ? (2) 根據(jù)菌種特性和遺傳穩(wěn)定性來選擇誘變劑 遺傳穩(wěn)定的 :先強(qiáng)后弱 。 單孢子 (或單細(xì)胞 )懸液的制備 ? 2. 菌懸液制備方法 ? (1) 細(xì)菌 ? 采用同步化的預(yù)培養(yǎng)方法： 20～ 24h 培養(yǎng)的新鮮斜面 基本培養(yǎng)基 35～ 37℃ 振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期 6℃ 培養(yǎng) 1h ，使之同步生長 加入適量嘧啶、嘌呤或酵母膏，繼續(xù)振蕩培養(yǎng) 20～ 60 min 低溫 (2℃)10min 離心洗滌 制備菌懸液 含玻璃珠三角瓶振蕩 10min 菌體計(jì)數(shù)，調(diào)整濃度 過濾 單孢子 (或單細(xì)胞 )懸液的制備 ? (2) 產(chǎn)孢子菌類 ? 處理材料是孢子，而不是菌絲。 ? 菌懸液的孢子或細(xì)菌數(shù)可用平板計(jì)數(shù)、血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)和光密度法測(cè)定。 ? 對(duì)于細(xì)菌來說，常常通過前培養(yǎng)達(dá)到要求。 ? 常用的純化方法有劃線分離法和稀釋分離法；若仍達(dá)不到要求，則需采用顯微鏡操縱器分離單孢子，培養(yǎng)形成單菌落，得到純菌株。因此，除了深入開展誘變機(jī)制研究外，在誘變育種過程中應(yīng)注意 : ? 野生菌株 :產(chǎn)量低，但對(duì)誘變因素敏感，變異幅度大，正突變率高； ? 最好是由生產(chǎn)育種中的自發(fā)變異株 ? 采用具有有利性狀的菌株 ? 考慮選擇己發(fā)生過其他變異的菌株 ? 選擇增變菌株的變異株以堤高致變敏度 ? 選取能累積少量所需產(chǎn)物或前體物菌株 出發(fā)菌株 1. 對(duì)一般出發(fā)菌株的要求 ? 1. 選擇具備一定生產(chǎn)能力或某種特性的菌株作為出發(fā)菌株 ? 2. 選擇純種作出發(fā)菌株 ? 3. 選擇出發(fā)菌株應(yīng)考慮其穩(wěn)定性 ? 4. 連續(xù)誘變育種過程中如何選擇出發(fā)菌株 出發(fā)菌株 2. 對(duì)出發(fā)菌株的具體要求 出發(fā)菌株 – 4. 連續(xù)誘變育種過程中如何選擇出發(fā)菌株 2. 對(duì)出發(fā)菌株的具體要求 ?5. 選擇出發(fā)菌株的其它因素 ?6. 采用多出發(fā)菌株 (34個(gè) ) ?7. 菌種代謝特點(diǎn) 出發(fā)菌株 2. 對(duì)出發(fā)菌株的具體要求 ? 一般絲狀菌的野生菌株多數(shù)為異核體，如果菌種背景復(fù)雜，用誘變劑處理后的變株中，負(fù)變率將增加。 土霉素產(chǎn)生菌斜面孢子培養(yǎng) 3~4天好于 9~10天 ? 2. 研究菌種的某些生物學(xué)特性與產(chǎn)量合成的相關(guān)性。 為了研究遺傳因素引起的不同菌落類型，應(yīng)盡量避免非遺傳因素引起的菌落形態(tài)變化，以免魚目混珠、干擾試驗(yàn)結(jié)果。 誘變育種的注意事項(xiàng) ? 誘變育種工作的三個(gè)主要環(huán)節(jié)： ? 1. 誘發(fā)突變 ? 出發(fā)菌株、誘變劑及其劑量的選擇、影響誘變效果的因素等 ? 2. 突變株的篩選 ? 篩選條件 (培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件 )、便捷的篩選方法等 ? 3. 最佳環(huán)境條件的調(diào)整 ? 突變株最佳培養(yǎng)條件的確定 誘變育種的主要環(huán)節(jié) 1. 區(qū)分不同菌落類型 誘變前對(duì)出發(fā)菌株的了解 ? 2. 出現(xiàn)不同菌落類型的原因 ? 主要原因：遺傳因素 ? 由遺傳因素造成的不同類型菌落是一種變異現(xiàn)象，屬不同遺傳特性的個(gè)體，而且可以遺傳給下一代。 誘變育種的復(fù)雜性 ? 1. 在誘變育種前，應(yīng)該對(duì)大生產(chǎn)的設(shè)備和工藝具有相當(dāng)?shù)闹R(shí)和全面的了解。只有那些每次誘變后有 1～ 2個(gè)控制產(chǎn)量的基因突變，使產(chǎn)物合成稍有增加，又能維持其最起碼代謝平衡的菌株才能生存下來。第七章 工業(yè)微生物誘變育種 第一節(jié) 誘變育種的試驗(yàn)設(shè)計(jì)和準(zhǔn)備工作 第二節(jié) 誘變育種的步驟與方法 第三節(jié) 突變株的分離與篩選 第四節(jié) 營養(yǎng)缺陷型菌株的篩選 第五節(jié) 溫敏突變株的篩選 第六節(jié) 抗噬菌體菌株的選育 概念： 選用 理、化致變劑處理均勻而分散的微生物細(xì)胞群，促使其突變率顯著提高；采用
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1