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2025-05-10 18:15本頁面
  

【正文】 ? 相對細胞大小 (前向角散射光 FSC) ? 相對細胞顆粒密度和內(nèi)部復雜度 (側(cè)向角散射光 SSC) ? 染色過細胞的相對熒光強度 (熒光 Fluoresent light) 前向角散射光( FSC) Forward (Angle Light) Scatter ? FSC信號收集方向與激光束相平行 ? FSC與被測細胞或顆粒相對大小及表面積相關(guān) FALS Sensor Laser 前向角散射光( FSC) FSC is proportional to relative size amp。 cellsurface area 側(cè)向角散射光( SSC) Sidescattered light (90 Degree Light Scatter) ? SSC信號收集方向與激光束相垂直( 90176。 SSC) 散射光能被用來區(qū)分不同細胞群體的基本形態(tài)上的差異 ? 通常使用 “ 散點圖 ” 來看散射光信號 ? 散點圖上的一個點就代表一個細胞顆粒的數(shù)據(jù) eg. Major leucocyte subpopulations can be differentiated using FSC and SSC. Figure: Cell subpopulations based on FSC vs SSC Dual Parameter dotplot 流式細胞儀檢測信號 Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam Sheath fluid Laser beam 1. 散射光信號 自發(fā)熒光信號 特異性熒光信號 熒光信號 ( Fluoresent light ) 雙色熒光散點圖 熒光強度 ( Fluoresence intensity) ? 熒光信號的強度代表被測細胞膜表面抗原強度或細胞內(nèi)物質(zhì)濃度 。 ) FreqFluorescence FALS Sensor Fluorescence detector ( FL1,FL2,FL3,FL4) 接收光學系統(tǒng) 接收光學系統(tǒng): 接收光信號 ,并將光信號引導到對應的接收器中 光學濾片 460 500 540 460 500 540 460 500 540 SP 500 LP 500 BP500/50 Longpass Shortpass Bandpass ( 500+/ 25 ) FACSCalibur光路圖 每個探測器前往往為 BP,所以每個探測器只能接收特定波長范圍的光信號 FL1: 515nm 545nm 光學探測器 光電二極管 FSC Pho
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