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生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能-展示頁(yè)

2025-04-13 23:39本頁(yè)面
  

【正文】 酸的 糖是βD2脫氧核糖,RNA中為βD核糖?!      『颂呛怂幔≧NA),存在于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)?!              〉诙隆 『怂岬慕Y(jié)構(gòu)與功能  一、核酸的分子組成:基本組成單位是核苷酸,而核苷酸則由堿基、戊糖和磷酸三種成分連接而成。不同蛋白質(zhì)其密度與形態(tài)各不相同而分開(kāi)。小分子蛋白質(zhì)進(jìn)入孔內(nèi),滯留時(shí)間長(zhǎng),大分子蛋白質(zhì)不能時(shí)入孔內(nèi)而徑直流出。如陰離子交換層析,含負(fù)電量小的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來(lái)。 ?。?、透析:利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開(kāi)的方法?!  ∑?、蛋白質(zhì)的分離和純化 ?。?、沉淀,見(jiàn)六、2 ?。?、電泳:蛋白質(zhì)在高于或低于其等電點(diǎn)的溶液中是帶電的,在電場(chǎng)中能向電場(chǎng)的正極或負(fù)極移動(dòng)。氨基酸不出現(xiàn)此反應(yīng)?! 。?、蛋白質(zhì)的紫外吸收:由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm處有特征性吸收峰,可用蛋白質(zhì)定量測(cè)定。變性后,其溶解度降低,粘度增加,結(jié)晶能力消失,生物活性喪失,易被蛋白酶水解?! 。?、蛋白質(zhì)變性:在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間構(gòu)象被破壞,從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失。也可用乙醇。 ?。?、蛋白質(zhì)的沉淀:在適當(dāng)條件下,蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。結(jié)合氧后由緊張態(tài)變?yōu)樗沙趹B(tài)。在氧分壓較低時(shí),與氧氣結(jié)合較難,氧解離曲線呈S狀曲線?! ⊙t蛋白:具有4個(gè)亞基組成的四級(jí)結(jié)構(gòu),可結(jié)合4分子氧?! ∧蛩鼗螓}酸胍可破壞次級(jí)鍵  β巰基乙醇可破壞二硫鍵  2、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)特有性質(zhì)和功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。  主要化學(xué)鍵:疏水鍵、氫鍵、離子鍵    五、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系 ?。薄⒌鞍踪|(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象和特定生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。這種蛋白質(zhì)分子中各個(gè)亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用,為四級(jí)結(jié)構(gòu)?! 。常┑鞍踪|(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu):對(duì)蛋白質(zhì)分子的二、三級(jí)結(jié)構(gòu)而言,只涉及一條多肽鏈卷曲而成的蛋白質(zhì)。 ?。玻┑鞍踪|(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu):指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置,顯示為長(zhǎng)距離效應(yīng)?! o(wú)規(guī)卷曲:無(wú)確定規(guī)律性的那段肽鏈。α螺旋的每個(gè)肽鍵的NH和第四個(gè)肽鍵的羧基氧形成氫鍵,氫鍵的方向與螺旋長(zhǎng)軸基本平形。二級(jí)結(jié)構(gòu)以一級(jí)結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ),多為短距離效應(yīng)?! 。病⒌鞍踪|(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu):包括二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)?! ∷摹⒌鞍踪|(zhì)的分子結(jié)構(gòu) ?。?、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu):即蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序。半胱氨酸的巰基是該化合物的主要功能基團(tuán)?! 《嚯倪B中的自由氨基末端稱(chēng)為N端,自由羧基末端稱(chēng)為C端,命名從N端指向C端。二肽中游離的氨基和羧基繼續(xù)借脫水作用縮合連成多肽。由于此吸收峰值的大小與氨基酸釋放出的氨量成正比,因此可作為氨基酸定量分析方法?! 。?、氨基酸的紫外吸收性質(zhì)  芳香族氨基酸在280nm波長(zhǎng)附近有最大的紫外吸收峰,由于大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這些氨基酸殘基,氨基酸殘基數(shù)與蛋白質(zhì)含量成正比,故通過(guò)對(duì)280nm波長(zhǎng)的紫外吸光度的測(cè)量可對(duì)蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行定量分析。 第一篇 生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能          第一章 氨基酸和蛋白質(zhì)  一、組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的分類(lèi)  1、非極性氨基酸  包括:甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸 ?。?、極性氨基酸  極性中性氨基酸:色氨酸、酪氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇氨酸  酸性氨基酸:天冬氨酸、谷氨酸  堿性氨基酸:賴(lài)氨酸、精氨酸、組氨酸   其中:屬于芳香族氨基酸的是:色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸      屬于亞氨基酸的是:脯氨酸     含硫氨基酸包括:半胱氨酸、蛋氨酸  注意:在識(shí)記時(shí)可以只記第一個(gè)字,如堿性氨基酸包括:賴(lài)精組  二、氨基酸的理化性質(zhì) ?。?、兩性解離及等電點(diǎn)  氨基酸分子中有游離的氨基和游離的羧基,能與酸或堿類(lèi)物質(zhì)結(jié)合成鹽,故它是一種兩性電解質(zhì)。在某一PH的溶液中,氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等,成為兼性離子,呈電中性,此時(shí)溶液的PH稱(chēng)為該氨基酸的等電點(diǎn)。 ?。?、茚三酮反應(yīng)   氨基酸的氨基與茚三酮水合物反應(yīng)可生成藍(lán)紫色化合物,此化合物最大吸收峰在570nm波長(zhǎng)處。  三、肽  兩分子氨基酸可借一分子所含的氨基與另一分子所帶的羧基脫去1分子水縮合成最簡(jiǎn)單的二肽。10個(gè)以?xún)?nèi)氨基酸連接而成多肽稱(chēng)為寡肽;39個(gè)氨基酸殘基組成的促腎上腺皮質(zhì)激素稱(chēng)為多肽;51個(gè)氨基酸殘基組成的胰島素歸為蛋白質(zhì)。  人體內(nèi)存在許多具有生物活性的肽,重要的有:  谷胱甘肽(GSH):是由谷、半胱和甘氨酸組成的三肽。GSH的巰基具有還原性,可作為體內(nèi)重要的還原劑保護(hù)體內(nèi)蛋白質(zhì)或酶分子中巰基免被氧化,使蛋白質(zhì)或酶處于活性狀態(tài)?! ≈饕瘜W(xué)鍵:肽鍵,有些蛋白質(zhì)還包含二硫鍵?!   。保┑鞍踪|(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu):指蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu),也就是該段肽鏈骨架原子的相對(duì)空間位置,并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象??煞譃椋骸 ˇ谅菪憾嚯逆溨麈渿@中心軸呈有規(guī)律地螺旋式上升,順時(shí)鐘走向,即右手螺旋?! ˇ抡郫B:多肽鏈充分伸展,各肽鍵平面折疊成鋸齒狀結(jié)構(gòu),側(cè)鏈R基團(tuán)交錯(cuò)位于鋸齒狀結(jié)構(gòu)上下方;它們之間靠鏈間肽鍵羧基上的氧和亞氨基上的氫形成氫鍵維系構(gòu)象穩(wěn)定.  β轉(zhuǎn)角:常發(fā)生于肽鏈進(jìn)行180度回折時(shí)的轉(zhuǎn)角上,常有4個(gè)氨基酸殘基組成,第二個(gè)殘基常為脯氨酸?! ≈饕瘜W(xué)鍵:氫鍵?! ≈饕瘜W(xué)鍵:疏水鍵(最主要)、鹽鍵、二硫鍵、氫鍵、范德華力。在體內(nèi)有許多蛋白質(zhì)分子含有二條或多條肽鏈,每一條多肽鏈都有其完整的三級(jí)結(jié)構(gòu),稱(chēng)為蛋白質(zhì)的亞基,亞基與亞基之間呈特定的三維空間排布,并以非共價(jià)鍵相連接。由一條肽鏈形成的蛋白質(zhì)沒(méi)有四級(jí)結(jié)構(gòu)。一級(jí)結(jié)構(gòu)相似的多肽或蛋白質(zhì),其空間構(gòu)象以及功能也相似?! 〖〖t蛋白:只有三級(jí)結(jié)構(gòu)的單鏈蛋白質(zhì),易與氧氣結(jié)合,氧解離曲線呈直角雙曲線。成人由兩條α肽鏈(141個(gè)氨基酸殘基)和兩條β肽鏈(146個(gè)氨基酸殘基)組成。因?yàn)椋旱谝粋€(gè)亞基與氧氣結(jié)合以后,促進(jìn)第二及第三個(gè)亞基與氧氣的結(jié)合,當(dāng)前三個(gè)亞基與氧氣結(jié)合后,又大大促進(jìn)第四個(gè)亞基與氧氣結(jié)合,稱(chēng)正協(xié)同效應(yīng)?! ×⒌鞍踪|(zhì)的理化性質(zhì) ?。?、蛋白質(zhì)的兩性電離:蛋白質(zhì)兩端的氨基和羧基及側(cè)鏈中的某些基團(tuán),在一定的溶液PH條件下可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。包括:  ,破壞水化層?! ?,將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液,破壞在水溶液中的穩(wěn)定因素電荷而沉淀。主要為二硫鍵和非共價(jià)鍵的破壞,不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變。常見(jiàn)的導(dǎo)致變性的因素有:加熱、乙醇等有機(jī)溶劑、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子及生物堿試劑、超聲波、紫外線、震蕩等?! 。?、蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng) ?。航?jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸可發(fā)生此反應(yīng),詳見(jiàn)二、3  b. 雙縮脲反應(yīng):蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸酮共熱,呈現(xiàn)紫色或紅色。蛋白質(zhì)水解加強(qiáng),氨基酸濃度升高,雙縮脲呈色深度下降,可檢測(cè)蛋白質(zhì)水解程度。根據(jù)支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等?! 。?、層析:,利用蛋白質(zhì)的兩性游離性質(zhì),在某一特定PH時(shí),各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同,故可以通過(guò)離子交換層析得以分離?! 。址Q(chēng)凝膠過(guò)濾?! 。?、超速離心:既可以用來(lái)分離純化蛋白質(zhì)也可以用作測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量?! “恕⒍嚯逆溨邪被嵝蛄蟹治觥   。ǖ鞍踪|(zhì)水解為個(gè)別氨基酸,測(cè)各氨基酸的量及在蛋白質(zhì)中的百分組成)          ↓   測(cè)定肽鏈頭、尾的氨基酸殘基      二硝基氟苯法(DNP法)   頭端                尾端 羧肽酶A、B、C法等      丹酰氯法    ↓    水解肽鏈,分別分析    胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)法:水解芳香族氨基酸的羧基側(cè)肽鍵    胰蛋白酶法:水解賴(lài)氨酸、精氨酸的羧基側(cè)肽鍵    溴化脯法:水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鍵        ↓   Edman降解法測(cè)定各肽段的氨基酸順序   ?。ò被┒税被岬挠坞xα氨基與異硫氰酸苯酯反應(yīng)形成衍生物,用層析法鑒定氨基酸種類(lèi))   ?!   深?lèi)核酸:脫氧核糖核酸(DNA),存在于細(xì)胞核和線粒體內(nèi)。 ?。?、堿基:                                NH2     NH2    O  CH3 O        O                              O      O     O       NH2     胞嘧啶  胸腺嘧啶  尿嘧啶      鳥(niǎo)嘌呤      腺嘌呤 嘌呤和嘧啶環(huán)中均含有共軛雙鍵,因此對(duì)波長(zhǎng)260nm左右的紫外光有較強(qiáng)吸收,這一重要的理化性質(zhì)被用于對(duì)核酸、核苷酸、核苷及堿基進(jìn)行定性定量分析?! 。?、磷酸:生物體內(nèi)多數(shù)核苷酸的磷酸基團(tuán)位于核糖的第五位碳原子上?! ∪?、DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能  ?。?、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)  DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)是核酸的二級(jí)結(jié)構(gòu)?!  ÷菪睆綖?nm?!  M向靠互補(bǔ)堿基的氫鍵維系,縱向則靠堿基平面間的疏水性堆積力維持,尤以后者為重要。在真核生物細(xì)胞核內(nèi),DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)與一組組蛋白共同組成核小體?! 。?、功能   DNA的基本功能就是作為生物遺傳信息復(fù)制的模板和基因轉(zhuǎn)錄的模板,它是生命遺傳繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ),也是個(gè)體生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。  四、RNA的空間結(jié)構(gòu)與功能DNA是遺傳信息的載體,而遺傳作用是由蛋白質(zhì)功能來(lái)體現(xiàn)的,在兩者之間RNA起著中介作用。如:名  稱(chēng)功  能核蛋白體RNA (rRNA)核蛋白體組成成分信使RNA (mRNA)蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運(yùn)RNA (tRNA)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸不均一核RNA (HnRNA)成熟mRNA的前體小核RNA (SnRNA)參與HnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)小核仁RNA (SnoRNA)rRNA的加工和修飾  1、信使RNA(半衰期最短) ?。保﹉nRNA為mRNA的初級(jí)產(chǎn)物,經(jīng)過(guò)剪接切除內(nèi)含子,拼接外顯子,成為成熟的mRNA并移位到細(xì)胞質(zhì) ?。玻┐蠖鄶?shù)的真核mRNA在轉(zhuǎn)錄后5′末端加上一個(gè)7甲基鳥(niǎo)嘌呤及三磷酸鳥(niǎo)苷帽子,帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻譯成蛋白質(zhì)的過(guò)程中具有促進(jìn)核蛋白體與mRNA的結(jié)合,加速翻譯起始速度的作用,同時(shí)可以增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。 ?。常┕δ苁前押藘?nèi)DNA的堿基順序,按照堿基互補(bǔ)的原則,抄錄并轉(zhuǎn)送至胞質(zhì),以決定蛋白質(zhì)合成的氨基酸排列順序?! 。?、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(分子量最?。 。保﹖RNA分子中含有10%~20%稀有堿基,包括雙氫尿嘧啶,假尿嘧啶和甲基化的嘌呤等。反密碼環(huán)中間的3個(gè)堿基為反密碼子,與mRNA上相應(yīng)的三聯(lián)體密碼子形成堿基互補(bǔ)?! 。常┤?jí)結(jié)構(gòu)為倒L型。 ?。场⒑说鞍左wRNA(含量最多) ?。保┰松锏膔RNA的小亞基為16S,大亞基為5S、23S;真核生物的rRNA的小亞基為18S,大亞基為5S、28S?! 。玻﹔RNA與核糖體蛋白共同構(gòu)成核糖體,它是蛋白質(zhì)合成機(jī)器--核蛋白體的組成成分,參與蛋白質(zhì)的合成。這種具有催化作用的RNA稱(chēng)為核酶。監(jiān)測(cè)是否發(fā)生變性的一個(gè)最常用的指標(biāo)是DNA在紫外區(qū)
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