論小麥高分子量谷蛋白14亞基hmw-gs14基因的原核表達(dá)-展示頁
2025-01-30 16:02本頁面
【正文】 e購自 Promega公司，其他酶與試劑均為本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儲(chǔ)備 。 本研究擬在以前的工作基礎(chǔ)上 ， 構(gòu)建高分子量谷蛋白 14亞基 （ HMWGS14） 基因的原核表達(dá)載體 ， 并實(shí)現(xiàn)其在大腸桿菌表達(dá)宿主菌株 Rosetta(DE3)pLysS中的特異表達(dá) ， 為進(jìn)一步純化 HMWGS14及研究其功能 、 性質(zhì)奠定基礎(chǔ) 。分析結(jié)果表明，導(dǎo)致其優(yōu)質(zhì)的原因在于其所具有的 14+15亞基，14+15亞基具有 5+10亞基的功能 。在不同高分子量麥谷蛋白亞基對(duì)加工品質(zhì)的貢獻(xiàn)的研究中 ,發(fā)現(xiàn) 5+10亞基為優(yōu)質(zhì)亞基，而 2+12亞基為劣質(zhì)亞基。然而，隨著社會(huì)飲食業(yè)、旅游業(yè)的發(fā)展和人民生活水平的提高，以小麥面粉為原料的各種精致面食和方便食品、保健食品及營養(yǎng)食品的生產(chǎn)增長很快，使得全國各地對(duì)小麥特別是優(yōu)質(zhì)小麥的需求，呈現(xiàn)不斷增長的勢頭，并對(duì)小麥的品質(zhì)提出了更高的要求。 Abstract After slicing the pMDHMW with two restriction endonucleases EcoRⅠ and SalⅠ ,recollect the high molecular weight glutenin subunit 14(HMWGS14) gene which is about in length, then subclone it into the relative site of the expression vector pET30a(+),and eventually the prokaryotic expression vector pETHMW is constructed . The analysis result of SDSPAGE shows that after induction of IPTG, the high molecular weight glutenin subunit 14 (HMWGS14) gene is expressed in the Rosetta(DE3)pLysS 關(guān)鍵詞 ? 高分子量谷蛋白 14亞基基因 ? 原核表達(dá) ? 亞克隆 Keywords ? HMWGS14 gene ? prokaryotic expression ? subclone 前言 小麥?zhǔn)亲钪匾?、種植面積最廣的糧食作物之一。 科技大學(xué) 屆畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 題目：論 小麥高分子量谷蛋白 14亞基 （ HMWGS14） 基因的原核表達(dá) 姓 名： 專 業(yè)： 生物技術(shù) 指 導(dǎo) 老 師 ： 院 （ 系 ） ： 生命科學(xué)學(xué)院 完 成 日 期： 小麥高分子量谷蛋白 14亞基（ HMWGS14） 基因的原核表達(dá) 摘要 關(guān)鍵詞 前言 材料與方法 結(jié)果與分析 討論 結(jié)論 參考文獻(xiàn) 致謝 摘要 用限制性內(nèi)切酶 EcoRⅠ 和 SalⅠ 雙酶切pMD－ HMW,回收長約 14亞基（ HMWGS14）基因，將其亞克隆到表達(dá)載體 pET30a(+)的相應(yīng)位點(diǎn)上，構(gòu)建了該基因的原核表達(dá)載體 pETHMW 。 SDSPAGE分析結(jié)果顯示，經(jīng) IPTG誘導(dǎo)，高分子量谷蛋白 14亞基(HMWGS14)基因在大腸桿 Rosetta(DE3)pLysS中得到了表達(dá)。由于高產(chǎn)量新品種的選育推廣、耕作栽培技術(shù)的提高及農(nóng)業(yè)投入的增加，我國小麥產(chǎn)量不斷提高，數(shù)量上暫時(shí)告別短缺。 小麥的加工品質(zhì)與小麥種子中麥谷蛋白及醇溶蛋白的含量和組成關(guān)系極為密切，高分子量麥谷蛋
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