【正文】 Ca2+能降低原生質(zhì)水合度，使原生質(zhì)粘性增大，不易脫離細(xì)胞壁，使細(xì)胞發(fā)生 凹形質(zhì)壁分離 。生活細(xì)胞可以在高水勢(shì)溶液中發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。 掌握顯微鏡使用技術(shù)。 （圖） 第二節(jié) 植物生理基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)一 K+、 Ca2+對(duì)細(xì)胞質(zhì)壁分離的影響 目的： 通過(guò)質(zhì)壁分離現(xiàn)象，可以判斷細(xì)胞死活；獲取原生質(zhì)體；測(cè)定細(xì)胞滲透勢(shì)；了解原生質(zhì)性質(zhì)等。在植物脫毒快繁、種子資源保存與利用、植物改良、生物技術(shù)等方面有重要應(yīng)用。 、蒸騰儀、電導(dǎo)儀等特殊儀器分析技術(shù) ： 擬南芥在基因功能和表達(dá)研究中的應(yīng)用。 其它測(cè)定技術(shù) ： 應(yīng)用于研究植物礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)、光合作用、有機(jī)物合成與運(yùn)輸分配、植物激素等。 ： 測(cè)定光合放氧量或呼吸吸氧的量。應(yīng)用如下： ①利用電泳技術(shù)分離純化生物大分子物質(zhì) ； ②同工酶電泳酶譜分析，鑒定植物親緣關(guān)系，鑒定種子純度； ③測(cè)定未知物的分子量； ④將電泳技術(shù)與薄層掃描技術(shù)結(jié)合，可測(cè)知未知生物分子的含量； ⑤把核酸酶解和電泳相結(jié)合可以測(cè)定簡(jiǎn)單的核苷酸序列； ⑥電泳技術(shù)與限制性內(nèi)切酶結(jié)合應(yīng)用，通過(guò) DNA序列擴(kuò)增、分子探針的運(yùn)用和分子雜交，測(cè)定植物遺傳的多樣性和構(gòu)建基因的物理圖譜； ⑦ 與免疫技術(shù)相結(jié)合，鑒定植物及侵染植物的病原物的抗原與抗體，從而達(dá)到檢測(cè)植物是否感病的目的。 顯微攝影技術(shù) 顯微攝影技術(shù) 它主要包括拍攝和洗印放大兩項(xiàng)技術(shù)。如暗場(chǎng)、熒光、紫外、相差、偏光、干涉等顯微鏡，在組織化學(xué)中會(huì)經(jīng)常用到。 顯微鏡技術(shù) （圖） （ 1）普通型； 指一般的光學(xué)顯微鏡，如生物顯微鏡、便攜式顯微鏡、倒置式顯微鏡、解剖鏡等，用于對(duì)植物非切片材料或解剖結(jié)構(gòu)的一般觀察。 pH試紙測(cè)定結(jié)果不如 pH計(jì)（酸度計(jì)）準(zhǔn)確，若要準(zhǔn)確測(cè)定 pH值大小時(shí)，應(yīng)選擇 pH計(jì)。配制濃度梯度液，用超速離心機(jī)，可測(cè)定生物大分子相對(duì)分子量。 漏斗、分液漏斗和 離心機(jī) 等。 水浴鍋、干燥箱、溫箱和生長(zhǎng)箱等，它們可以把溫度恒定在所設(shè)置的水平。移液管中又分為 A級(jí)和 B級(jí)， A級(jí)比 B級(jí)精度高。 測(cè)量液體體積的器具可分為量入式和量出式兩類。 另外玻璃磨口瓶應(yīng)忌盛強(qiáng)堿試劑，而橡膠塞的試劑瓶不能用于盛裝強(qiáng)酸性試劑。 、烘干后，磨成粉末過(guò) 80~100目篩，保存在干燥其中。 三、樣品的前處理 ，忌用水沖洗。 注意取樣的生理狀態(tài)和在植株上的相對(duì)位置保持一致。 :新鮮材料 和 干材料 二、實(shí)驗(yàn)材料的選擇 ： 原始樣品的采取 （隨機(jī)取樣法和 “ 五點(diǎn) ” 取樣法），到 平均樣品的采取 （混合取樣法和比例取樣法）。 ? 2次以上（含 2次）缺席不得參加筆試考核，實(shí)驗(yàn)不通過(guò)。 ? 綜合與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)論文 30分，包括課堂情況、內(nèi)容真實(shí)、結(jié)果結(jié)論正確、格式符合要求、獨(dú)立完成報(bào)告等。 科代表負(fù)責(zé)與老師接洽、維持課堂秩序、按時(shí)依學(xué)號(hào)次序提交報(bào)告、安排清潔實(shí)驗(yàn)室。 實(shí)驗(yàn)組內(nèi)人員既分工合作，又密切配合，認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)環(huán)節(jié)。 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 2人一組，每次實(shí)驗(yàn)要求寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告 綜合與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn) 8人一組，每 2人做一種處理，確定 1名組長(zhǎng)組織實(shí)施。 七、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)要及時(shí)關(guān)掉電源、水源，做好儀器設(shè)備和用具的整理復(fù)原工作，經(jīng)指導(dǎo)教師同意方能離開。 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室守則 五、使用易燃、易爆、化學(xué)危險(xiǎn)物的要確保安全，用后余量及時(shí)交回，不得亂丟亂放，更不準(zhǔn)私自帶出實(shí)驗(yàn)室。 三、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須遵守實(shí)驗(yàn)室的一切規(guī)章制度，注意保持室內(nèi)安靜，不得嬉鬧、喧嘩和影響他人實(shí)驗(yàn)。植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn) 植物生理學(xué)系實(shí)驗(yàn)課組 目 錄 ①實(shí)驗(yàn)室守則 ②實(shí)驗(yàn)課程安排 ③實(shí)驗(yàn)課程考核 ① K+、 Ca2+對(duì)細(xì)胞質(zhì)壁分離的影響 ②小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì) ③植物上流強(qiáng)度及其成分分析 ④植物組織可溶性糖含量測(cè)定 ⑤小籃子法測(cè)定萌發(fā)種子呼吸強(qiáng)度 ⑥種子生活率的快速測(cè)定 目錄 ①實(shí)驗(yàn)課題的選擇與設(shè)計(jì) 課題的來(lái)源 課題選擇的原則 課題的設(shè)計(jì) ②備選綜合與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)題目 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑（ NAA或 pp333或烯效唑）對(duì)小麥幼苗生長(zhǎng)的影響 鹽脅迫對(duì)小麥幼苗生長(zhǎng)的影響 礦質(zhì)元素（氮或鉀或鐵）對(duì)玉米幼苗生長(zhǎng)的影響 目 錄 ③ 分析測(cè)試項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)材料的培育與處理 形態(tài)指標(biāo)的觀察記載與測(cè)量 生理指標(biāo)的測(cè)定 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室守則 一、實(shí)驗(yàn)前要認(rèn)真預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅私鈱?shí)驗(yàn)步驟和實(shí)驗(yàn)方法。 二、學(xué)生必須按教學(xué)計(jì)劃規(guī)定的時(shí)間到實(shí)驗(yàn)室上實(shí)驗(yàn)課，不得無(wú)故遲到、早退。 四、愛護(hù)儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)材料，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中儀器設(shè)備發(fā)生故障，要立即停止實(shí)驗(yàn)，并報(bào)告指導(dǎo)教師，進(jìn)行妥善處理。 六、實(shí)驗(yàn)時(shí)要認(rèn)真觀察，實(shí)事求是記錄數(shù)據(jù)和結(jié)果，嚴(yán)禁隨意拼湊，弄虛作假，并按指導(dǎo)教師規(guī)定的時(shí)間和要求，完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 實(shí)驗(yàn)課程安排 實(shí)驗(yàn)總學(xué)時(shí) 36學(xué)時(shí)，其中實(shí)驗(yàn)概述 2學(xué)時(shí)，基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)17學(xué)時(shí)，綜合與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn) 16學(xué)時(shí)，論文撰寫輔導(dǎo) 1學(xué)時(shí)。每人必須用完整的一套數(shù)據(jù)寫出研究論文。 每次實(shí)驗(yàn)完后，經(jīng)老師檢查，認(rèn)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果后，經(jīng)簽字方能離開實(shí)驗(yàn)室。 實(shí)驗(yàn)課程考核 ? 實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī) 30分，包括課堂紀(jì)律、考勤、操作技能、報(bào)告質(zhì)量。 ? 筆試成績(jī) 40分，一般為閉卷考試，內(nèi)容涉及本課程所有內(nèi)容，重點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)操作中的細(xì)節(jié)和基本原理。 植物生理學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)概述 第一節(jié) 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)材料的選擇 一、實(shí)驗(yàn)材料選擇的重要性和種類 。 不在靠邊位置取樣。 多汁瓜果、蔬菜、幼嫩器官容易失水，現(xiàn)取現(xiàn)稱或即刻冷藏。 。 第二節(jié) 常用儀器及生化分析技術(shù)在植物生理學(xué)中的應(yīng)用 一、植物生理學(xué)中的常用儀器及化學(xué)分析技術(shù) :主要有試管、點(diǎn)滴反應(yīng)板、燒瓶、燒杯等， :按其顏色分為無(wú)色透明玻璃瓶和棕色瓶，通常棕色瓶用于保存見光易分解的試劑。 （圖一） ： 天平 、卷尺、直尺、游標(biāo)卡尺、顯微測(cè)微尺、 計(jì)數(shù)器等。量入 一、植物生理學(xué)中的常用儀器及化學(xué)分析技術(shù) 式量具有容量瓶；量出式量具移液管、量筒、酸堿滴定管等。其尖端殘留的液體不能吹出，除非標(biāo)有“吹”字樣。植物材料的干燥過(guò)程通常是在105℃ 左右殺青 ，然后 70— 80℃ 烘干至恒重。離心機(jī)可用于分離固體和液體混合物，還常用于分離葉綠體、原生質(zhì)體和離析的細(xì)胞，是植物生理實(shí)驗(yàn)室必備的儀器之一。 pH試紙 在植物生理測(cè)試中和植物組織培養(yǎng)以及無(wú)土栽培等應(yīng)用領(lǐng)域中，常需用酸度計(jì)或 pH試紙測(cè)試反應(yīng)系統(tǒng)的 pH，或監(jiān)測(cè)植物（組織）生長(zhǎng)環(huán)境中的 pH值變化。 二、植物顯微技術(shù) 制片技術(shù) 觀察法、切片法、非切片法 植物組織化學(xué)技術(shù) 常應(yīng)用被檢物質(zhì)的特征反應(yīng)或特殊性質(zhì)來(lái)進(jìn)行制片觀察。 （ 2）特種型； 是利用不同的光學(xué)原理設(shè)計(jì)而成的顯微鏡，主要用于某種特殊的觀察和研究。 （ 3）高級(jí)型： 指大型的多用途、附件齊全的高級(jí)顯微鏡，如萬(wàn)用研究用生物顯微鏡、電子顯微鏡等。 三、生化分析技術(shù) :儀器主要有：可見光分光光度計(jì)、紫外 — 可見光分光光度計(jì)、紅外光譜儀和熒光分光光度計(jì)等 . ： 電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)中向與自身所帶電荷相反的電極移動(dòng)