代謝控制和育種ppt課件-展示頁
2025-01-21 08:35本頁面
【正文】 都能產(chǎn)酶，生長逐漸占優(yōu)勢 組成型突變株的選育 2. 篩選方法及實例 (3) 鑒別性培養(yǎng)基的利用 甘油作惟一碳源 涂布誘 變孢子 懸液 噴上 O硝基苯酚 β D半乳糖苷 (ONPG) 組成型 誘導(dǎo)型 組成型突變株的選育 2. 篩選方法及實例 (4) 篩選 ? 經(jīng)誘變劑處理后的菌體移接到含有誘導(dǎo)能力低，但能作為良好碳源的誘導(dǎo)物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，突變體能良好生長，野生型不能生長。 ? 調(diào)節(jié)基因突變，致使不能形成活性化的阻抑物； ? 操縱基因突變，喪失和阻抑物結(jié)合的親和力。 第四節(jié) 代謝調(diào)節(jié)控制育種 7 工業(yè)微生物代謝控制育種 第四節(jié) 代謝調(diào)節(jié)控制育種 代謝調(diào)節(jié)控制育種通過特定突變型的選育，達到改變代謝通路、降低支路代謝終產(chǎn)物的產(chǎn)生或切斷支路代謝途徑及提高細胞膜的透性，使代謝流向目的產(chǎn)物積累方向進行。 抗反饋調(diào)節(jié)突變株選育 ? 1. 概念： 指操縱基因或調(diào)節(jié)基因突變引起酶合成誘導(dǎo)機制失靈，菌株不經(jīng)誘導(dǎo)也能合成酶、或不受終產(chǎn)物阻遏的調(diào)節(jié)突變型。 因此，可以利用一些易同化碳源或價廉易得的碳源作為基質(zhì)生產(chǎn)所需的誘導(dǎo)酶類。 ? 例如：利用苯 β 半乳糖 (PG)篩選 β 半乳糖苷酶組成型突變株。 ? 分解代謝阻遏現(xiàn)象： 在初級或次級代謝中都存在，其含義是指代謝過程中酶的合成往往受高濃度的葡萄糖或其他易分解利用的碳源或氮源所抑制。 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 二、抗 分解調(diào)節(jié)突變 株的選育 抗分解阻遏、抗分解抑制 （一）解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 （二） …… 氮源 …… （三） …… 磷酸鹽 …… 篩選此類突變株的目的 ? 由于葡萄糖分解產(chǎn)物的積累，阻遏抗生素合成的關(guān)鍵酶，從而抑制抗生素的合成。 篩選方法與實例 ? (1) 循環(huán)培養(yǎng)法 ? (2) 鑒別性培養(yǎng)基 ? (3) 特殊氮源 ? (4) 葡萄糖結(jié)構(gòu)類似物 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 1. 解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 (1) 循環(huán)培養(yǎng)法 快速利用的 碳源培養(yǎng)基 慢速利用的 碳源培養(yǎng)基 交替培養(yǎng) 突變型解除了阻遏現(xiàn)象，在乳糖的培養(yǎng)基上比野生型生長速度快， 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 1. 解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 (2) 鑒別性培養(yǎng)基 含有葡萄糖的瓊脂平板 涂布誘 變后的 菌體 噴上 O硝基苯酚 β D半乳糖苷 (ONPG) 突變型 野生型 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 1. 解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 (3) 特殊氮源 ? 用葡萄糖為碳源，受阻遏酶的底物作為惟一氮源配制成培養(yǎng)基，連續(xù)移接誘變后的產(chǎn)氣桿菌(Aerobacters aerogenes)，可以篩選出不受葡萄糖阻遏的組氨酸酶突變株。 2dG 3mG 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 1. 解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 （ 1）篩選方法 涂瓊脂平板 出發(fā)菌株 誘變 抗 2dG或 3mG 菌落優(yōu)勢生長 低濃度 2dG或 3mG 一種特殊碳源 經(jīng)誘導(dǎo)酶水解才能利用 野生型菌株淘汰 ? ② 篩選方法 ? 培養(yǎng)基要求含低濃度 2dG或 3mG及一種生長碳源，該碳源必須經(jīng)相應(yīng)的誘導(dǎo)酶水解才能被微生物同化利用。 抗分解調(diào)節(jié)突變株的選育 1. 解除碳源調(diào)節(jié)突變株的選育 (4) 葡萄糖結(jié)構(gòu)類似物 2. 解除氮源分解調(diào)節(jié)突變株的選育 ? 氮源分解調(diào)節(jié)： 指含氮產(chǎn)物的酶受快速利用的氮源阻遏。 次級代謝 的氮降解物的阻遏主要指銨鹽和其他快速利用的
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