選修3現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題知識(shí)點(diǎn)-展示頁(yè)
2025-01-20 04:56本頁(yè)面
【正文】 第 4 頁(yè) 共 8 頁(yè) （ 2）單克隆抗體的制備過(guò)程： （ 3）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量 繁殖 ，又能產(chǎn)生 專(zhuān)一的抗體 。 （ 4）動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較： 比較項(xiàng)目 細(xì)胞融合的原理 細(xì)胞融合的方法 誘導(dǎo)手段 用法 植物體細(xì)胞雜交 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 離心、電刺激、振動(dòng)，聚乙二醇等試劑誘導(dǎo) 克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，再加滅活的病毒誘導(dǎo) 制備單克隆抗體的技術(shù)之一 （ 1）抗體：一個(gè) B淋巴細(xì)胞只分泌一種 特異性抗體 。 （ 2）動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類(lèi)似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激 等。 （ 1）動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng) 細(xì)胞雜交 ，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 （ 3）體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是：（右圖） 核移植 胚胎移植 （ 4）體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用： ① 加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良畜群繁育； ② 保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量； ③ 生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白； ④ 作為異種移植的 供體； ⑤ 用于組織器官的移植等。 （ 1）哺乳動(dòng)物核移植可以分為 胚胎細(xì)胞 核移植（比較容易）和 體細(xì)胞 核移植（比較難）。 O2是 細(xì)胞代謝 所必需的， CO2的主要作用是 維持培養(yǎng)液的 pH。 ③ 溫度 ：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是 ℃ ＋ ℃ ； pH： ～ 。 ② 營(yíng)養(yǎng) ：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的 抗生素 ，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面 相互抑制 時(shí)，細(xì)胞就會(huì) 停止分裂增殖 ，這種現(xiàn)象稱(chēng)為 細(xì)胞的接觸抑制。 （ 2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織） → 剪碎 → 用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶 處理分散成 單個(gè)細(xì)胞→ 制成 細(xì)胞懸液 → 轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行 原代 培養(yǎng) → 貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù) 傳代 培養(yǎng)。 （ 3）意義： 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 （ 1）過(guò)程： 第 3 頁(yè) 共 8 頁(yè) （ 2）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括 離心、振動(dòng)、電刺激 等。（基因工程在原則上只能生產(chǎn) 自然界已存在 的蛋白質(zhì)） 轉(zhuǎn)錄 翻譯 ★ 蛋白質(zhì)工程與基因工程區(qū)別 蛋白質(zhì)工程 基因工程 實(shí)質(zhì) 通過(guò) 改造基因 ，以定向改造天然蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì) 將 目的基因 從供體 轉(zhuǎn)移 到受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞中表達(dá) 結(jié)果 合成自然界 不存在 的蛋白質(zhì) 只能生產(chǎn)自然界 已存在 的蛋白質(zhì) 聯(lián)系 蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上，延伸出的 第二代 基因工程 專(zhuān)題 2 細(xì)胞工程 （一）植物細(xì)胞工程 （原理）： 細(xì)胞全能性 全能性表達(dá)的難易程度： 受精卵＞生殖細(xì)胞＞干細(xì)胞＞體細(xì)胞 ； 植物細(xì)胞＞動(dòng)物細(xì)胞 （ 1）過(guò)程：離體的 植物器官、組織或細(xì)胞 ―→ 愈傷組織 ―→ 試管苗 ―→ 植物體 （ 2）用途： 微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn) 。 ：又稱(chēng)為 DNA診斷，是采用 基因檢測(cè) 的方法來(lái)判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?；驍y帶病原體。 ： 提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。如生物抗蟲(chóng)或抗病的鑒定等。 翻譯成蛋白質(zhì) ，方法是采用 抗原 —抗體雜交 技術(shù)。 第四步 ：目的基因的檢測(cè)和表達(dá) DNA上是否 插入了目的基因 ，方法是采用 DNA分子雜交 (DNADNA)技術(shù)。 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞： 原核生物作為受體細(xì)胞的原因是 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少 ，最常用的原核細(xì)胞是 大腸桿菌 ，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca2+ 處理細(xì)胞，使其成為 感受態(tài)細(xì)胞 ，再將 重組表達(dá)載體 DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。 將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是 顯微注射技術(shù) 。 第三步 ：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 _ ：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。 （ 3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中 是否含有目的基因 ，從而將 含有目的基因的細(xì)胞 篩選出來(lái)。 ： 目的基因 ＋ 啟動(dòng) 子 ＋ 終止子 ＋ 標(biāo)記基因 第 2 頁(yè) 共 8 頁(yè) （ 1）啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段 ，位于基因的 首端 ，是 RNA聚合酶 識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因 轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得所需的 蛋白質(zhì) 。 （ 2）目的：獲取大量的目的基因 （ 3）原理： DNA雙鏈復(fù)制 （ 4）過(guò)程：第一步：加熱至 90～ 95℃ DNA解鏈為單鏈 ； 第二步：冷卻到 55～ 60℃ ， 引物與兩條單鏈 DNA結(jié)合 ； 第三步：加熱至 70～ 75℃ ， TaqDNA聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成 。 從基因文庫(kù)中獲取、 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 與人工合成 。 （ 2）最常用的載體是 質(zhì)粒 ,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于 細(xì)菌染色體之外 ，并具有 自我復(fù)制能力 的雙鏈 環(huán)狀 DNA分子。 ② 具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源 DNA片段插入。 DNA連接酶是連接 兩個(gè)DNA片段 的末端，形成磷酸二酯鍵。coliDNA連接酶來(lái)源于 大腸桿菌 ，只能將雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的 黏性末端 之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而 T4DNA連接酶能縫
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