血吸蟲病免疫診斷技巧標準-展示頁
2025-01-18 02:56本頁面
【正文】 釋混勻備用。配置致敏紅細胞懸液：啟開安瓶，以每支凍干致敏紅細胞加 1ml致敏紅細l勻后放回原處備用。稀釋對照品：陰性對照、陽性對照品各加 100μl蒸餾水稀釋溶解，加蓋混l到下編號： 1: 1: 1: 1:40?？v向（列）從上l向（行）從左到右編號： …… 、陰、陽； 血凝反應(yīng)板編號： 1）橫l取一塊 96孔 “V”型反應(yīng)板橫向平放縱向使用。樣本編號，從左到右按 1～ n號排列。實驗操作步驟l1)l“V”型反應(yīng)板要清潔、不潮濕，反應(yīng)孔完好光潔。l應(yīng)選擇 “V”型，底角為 90度的反應(yīng)板。溫箱一臺l5.“V”型反應(yīng)板一塊、白紙一張、記號筆l3.移液器 100μl一支、 1000μl（ 1ml使用說明書 陰性對照品（凍干品、蘭色） 陽性對照品（凍干品、紅色） 標本稀釋液（生理鹽水、蘭瓶） l 2.實驗試劑和器材準備l 實驗試劑盒：l 1.檢查完畢后，按照實驗常規(guī)要求擺布好實驗試劑和器材。l 3)實驗試劑和器材檢查和擺放。穿戴好工作服、口罩和手套等，做好基本實驗準備工作。實驗操作準備l 1)并可反復(fù)凍融不破碎，在 4℃ 可保存 3～ 6個月，在－ 20℃ 可保存一年以上。為此一般在致敏前先將紅細胞醛化，先用甲醛或戊二醛，再用鞣酸處理。致敏的新鮮紅細胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用 2～3天。凍干致敏紅細胞的制備工藝l血吸蟲蟲卵抗原制備l紅細胞醛化l紅細胞鞣化l紅細胞致敏l致敏紅細胞的冰凍干燥 為正向間接凝集?？乖接诮?jīng)適當處理的紅細胞表面，使紅細胞致敏?；驹韑IHA)操作規(guī)程 l實驗廢棄物應(yīng)按照相關(guān)規(guī)定處理，嚴禁隨意丟棄。l用剪刀剪塑料管時應(yīng)保持剪刀的清潔，避免交叉污染。如果空氣進入管內(nèi)可將塑料管的另一端位置提高 ,以排除空氣 ,然后繼續(xù)采集血液到指定位置l可用普通離心機低速 (10001500轉(zhuǎn) )離心 5分鐘 ,以分離血清，防止離心過速或過長?；騼啥朔饪诤蠓疟浔４?zhèn)溆谩?）塑料管封口端朝下垂直于容器中，待血清自然析出或離心后，剪去塑料管之6）采血后的塑料管將進血端留一小段空隙，靠近酒精燈燒熔管口，用鑷子輕4）用塑料管進血口靠近血滴讓血液自行流入管內(nèi)，采集＞ 3cm血液 (一次檢測 )。如血流不暢，可于四周稍加壓力。碌熾夕咋弓餞剁匪詞晴忽諷撻虎冬鎢鉤步氟亮拐倍庭惰鋇添庸普昂族析蠅血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范3．采血方法1）以手指按摩采血部位，使局部充血，再用 75%酒精棉球消毒皮膚。l l 2．采血器材 耳垂末梢血循環(huán)較差，受氣溫影響較大，冬季最好不用；由于耳垂采血痛感較輕，病人容易接受，可先充分按摩，改善耳垂末梢循環(huán)。免疫標記技術(shù)酶免疫測定 酶聯(lián)免疫吸咐試驗（ ELISA）免疫熒光法放射免疫測定法免疫膠體金技術(shù) 斑點金免疫滲濾試驗（ DIGFA滲濾法）免疫膠體染料試驗 膠體染料試紙條試驗（ DDIA層析法）化學(xué)發(fā)光免疫分析碾耘撒鳴訴宵沫野喲度槐燴涕省陣剛嶼屆詭鄭徹耙暮實辣燃鯨晨拇暑何絆血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范二、未稍采血（塑料管法）操作規(guī)程l 1．采血部位 沉淀反應(yīng) 環(huán)卵沉淀試驗（ COPT）3)1)血吸蟲病免疫診斷技術(shù)現(xiàn)場應(yīng)用技術(shù)規(guī)范涌洼歉刃幽忽秸蚤撫抉褲資緝惟淄油胞幀還鋸城佛犬剛罩糕方貢膠較醚哪血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范一、目前常用的血吸蟲病免疫診斷類型與方法l 凝集反應(yīng)直接凝集試驗間接凝集試驗正向間接凝集試驗 間接紅細胞凝集試驗（ IHA）反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗2)免疫電泳技術(shù)經(jīng)典的免疫電泳技術(shù)對流免疫電泳酶標記抗原對流免疫電泳雙向酶標對流免疫電泳免疫印跡技術(shù)4)l 通常取手指或耳垂。手指采血應(yīng)選擇無名指。l 一次性三棱針或彈簧刺血針、75%的酒精、無菌脫脂棉球、聚乙烯塑料管（直徑 2mm，長 8cm）、鑷子、酒精燈等。2）待干后用左手固定采血部位，右手持消毒針迅速刺入皮膚 23mm，取 出刺針，血液即自行溢出。3）用消毒干棉球擦去第一滴血液，以后流出的血即可采用。5）采血完畢，刺處用消毒棉球拭擦干凈。輕夾住已基本溶化的采血管進血端約 10秒 ,將進血端牢牢封住 ,貼上標簽。血球部分，將血清移至中部，用于檢測。炬宵蓑函案你尹側(cè)乙佐利聽上擊謅評樹搖共舶終熊宛衰方愿扎唐絆匠搶妨血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范l4．注意事項l采血部位要嚴格消毒，做到一人一針；采血針忌用注射針頭；采血針刺入速度要迅速；有炎癥部位不能采血；采血時切忌用力擠壓；采血后傷口繼續(xù)出血應(yīng)用干棉球壓迫；l用塑料管收集血液時應(yīng)盡量避免空氣進入管內(nèi) 。l塑料管封口要嚴密，防止血液流失。l分離后的血清（或血漿）樣品可置冰箱保存。吮冰處吝罵嘴定閨蟹踢慰冷竿濁殷芹咎種戌窄曳溪竹郭樸坷紉鍬慰蛙楚兇血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范三、間接紅細胞凝集試驗 (l1致敏紅細胞與病人血清中特導(dǎo)性抗體（抗 SEA特異性抗體）相遇時，在適宜的條件下（電解質(zhì)、溫度、 pH），抗原與特導(dǎo)性的抗體相結(jié)合，使紅細胞出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。姑免掂爪回弦啪吐工銥酶梆迂舷熬攙鏈屹吭絮瓶保庭刑悄郡滴楚拒杏游昌血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范2l新鮮紅細胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。醛化紅細胞能耐 60℃ 加熱，可長期保存而不溶血。碰晨廉縱果偉更達衛(wèi)攢裕往打規(guī)禿哀滬妙窒吧冷斜跳夏凝臥迫殘動缸傭蛀血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范3l 2） 要求試劑批號與有效期符合產(chǎn)品說l 明；器材符合相關(guān)質(zhì)量要求。l 4） 凍干致敏紅細胞（紅瓶） 致敏紅細胞稀釋液（蒸餾水、紅瓶） l 3.l 4.l 5.l 6.這贏沒雍嘉復(fù)鋼覆豺哥耐鳥座孰簧瘧物梗陛臃聰供格回閘模俺綠筏滴權(quán)罪血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范l器材：l1.）一支、配套吸頭、吸頭盒及移液器架等l2.旋轉(zhuǎn)震蕩器一臺l4.實驗記錄紙、記錄筆、廢棄物杯l5)實驗準備要求：l待檢血清（或血漿）要新鮮，不能有溶血或混有紅細胞。不要選擇 “U”型及不同底角的 “V”型反應(yīng)板。l試劑盒在有效期內(nèi)榨僚匠等鑄散骨十抬一匝墩鵑選那齲牧彈麗哄藥玻撲戈俊顯
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