【正文】 作程序l11支l 9）臨界對照品（凍干品） 1支l 6）樣本稀釋液（ 5號液） 48T/96Tl 2）酶結(jié)合物（ 1號液） 實驗試劑盒 (康百得 )：l 1）預(yù)包被板 l 3)l 2)劑遜柬倚覓寞象幾翅殿陵顧蜘醛袁者幢種羔揩恢櫻交悲棱涌炎找磁歡戈饒血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范2洗滌后加底物和顯色劑（ H2O2的鄰苯二胺（ OPD）或四甲基聯(lián)苯胺（ TMB）），酶結(jié)合物中的酶再催化底物和顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生顯色反應(yīng)。加待檢標(biāo)本（有相應(yīng)的特異性抗體）（一抗），即與固相上抗原結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物。五、酶聯(lián)免疫吸咐試驗（ ELISA）操作規(guī)程繁院芭蹦猶腑榷羅矩暖事檔跡喀孜厄慌暫像殆尚坪鴛這轅材娠溜便鑄包瑯血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范18℃ ，防止冷凍。l無效：檢測帶和對照帶都不出現(xiàn)顯色帶。結(jié)果判斷l(xiāng)陽性反應(yīng)： 1）檢測帶和對照帶都出現(xiàn)紫藍(lán)色帶。l4）試紙條一定要入杯底。檔）等放回原處；實驗廢物放入規(guī)定的收集器內(nèi)。10）實驗臺面清理：未使用試劑、未使用吸頭、移液器（刻度復(fù)原至最高取試紙條插入小杯中，待小杯內(nèi)反應(yīng)液吸干后觀察結(jié)果（ 15分鐘）。雙倍孔，并及時糾正。整板樣本加完后，檢查每孔是否有漏加孔或加l 否有漏加孔或加雙倍孔，并及時糾正。加液完畢，檢查每孔是l 輕輕顛倒混勻染料標(biāo)記液，確保沉淀完全被混懸。……l 2） 要求： 1器材：l1.使用說明書 PVC小杯 試紙條 l4） 說明；器材符合相關(guān)質(zhì)量要求。要求試劑批號與有效期符合產(chǎn)品l放室濕平衡一定時間。自檢定合格之日起有效期為 2年。（混勻吸打都在第一檔進(jìn)行）而影響吸量準(zhǔn)確性。使用加樣器加樣，每測 1個樣本要更換滴頭，在倍比稀釋待檢血清中，混勻時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡l 結(jié)果判斷的時間與溫度有關(guān)，應(yīng)根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書在相同溫度相同時間條件下判斷。天。用毛刷、移液吸頭不能觸碰反應(yīng)孔 ,以避免損壞反應(yīng)孔 ,造成假陽性。結(jié)果觀察時下墊白紙。注意事項l 1） l－：紅細(xì)胞全部下沉在孔底，形成肉眼可見緊密、邊緣光滑的小圓點。l3） 如出現(xiàn)異常則說明實驗操作有誤或血球ll1） 高檔）等放回原處；實驗廢物放入規(guī)定的收集器內(nèi)。l 14） (水l 觸碰反應(yīng)板，自動卸去吸頭。充分混勻致敏紅細(xì)胞懸液（每加若干次要混勻一次），然后在每孔加致敏紅細(xì)胞l 檢查每孔液面是否在同一高度，否則應(yīng)及時糾正。列第一孔）吸取 75ml棄去，一個樣本一個吸頭。吳豎漏狀噴皋姐母鴕熟剩告橋捶軒濕操截壟魂挫祥負(fù)宅飯硯莫駱螟卡租蕾血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范l 10） 孔縱向），同上混勻使血清成 1:40稀釋 ,后吸出 25μl棄去，自動卸去吸頭。在第 1孔吸出 25μl于第 2孔（縱向），同上混勻使血清成 1:10稀釋。（加血清時要核對一下樣本編號防止加錯于第一排第 1孔加 1號待測血清 25μl，加完血清（蓋上蓋子）放回原處，血凝反應(yīng)板的縱向（列）第 2～ 4孔各加標(biāo)本稀釋液100μl。血凝反應(yīng)板的第1行（橫向）第 1孔各加標(biāo)本稀釋液l勻后放回原處備用。稀釋對照品：陰性對照、陽性對照品各加 100μl蒸餾水稀釋溶解，加蓋混l向（行）從左到右編號： …… 、陰、陽； 血凝反應(yīng)板編號： 1）橫l樣本編號，從左到右按 1～ n號排列。l“V”型反應(yīng)板要清潔、不潮濕，反應(yīng)孔完好光潔?！癡”型反應(yīng)板一塊、白紙一張、記號筆l3.使用說明書 標(biāo)本稀釋液（生理鹽水、蘭瓶） l 2.實驗試劑和器材準(zhǔn)備l 實驗試劑盒：l 1.l 3)穿戴好工作服、口罩和手套等，做好基本實驗準(zhǔn)備工作。并可反復(fù)凍融不破碎，在 4℃ 可保存 3～ 6個月，在－ 20℃ 可保存一年以上。致敏的新鮮紅細(xì)胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用 2～3天。凍干致敏紅細(xì)胞的制備工藝l血吸蟲蟲卵抗原制備l紅細(xì)胞醛化l紅細(xì)胞鞣化l紅細(xì)胞致敏l致敏紅細(xì)胞的冰凍干燥 抗原吸附于經(jīng)適當(dāng)處理的紅細(xì)胞表面，使紅細(xì)胞致敏。基本原理ll實驗廢棄物應(yīng)按照相關(guān)規(guī)定處理，嚴(yán)禁隨意丟棄。如果空氣進(jìn)入管內(nèi)可將塑料管的另一端位置提高 ,以排除空氣 ,然后繼續(xù)采集血液到指定位置l可用普通離心機(jī)低速 (10001500轉(zhuǎn) )離心 5分鐘 ,以分離血清，防止離心過速或過長。4）用塑料管進(jìn)血口靠近血滴讓血液自行流入管內(nèi)，采集＞ 3cm血液 (一次檢測 )。碌熾夕咋弓餞剁匪詞晴忽諷撻虎冬鎢鉤步氟亮拐倍庭惰鋇添庸普昂族析蠅血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范3．采血方法1）以手指按摩采血部位，使局部充血，再用 75%酒精棉球消毒皮膚。l l 2．采血器材 沉淀反應(yīng) 環(huán)卵沉淀試驗（ COPT）3)血吸蟲病免疫診斷技術(shù)現(xiàn)場應(yīng)用技術(shù)規(guī)范涌洼歉刃幽忽秸蚤撫抉褲資緝惟淄油胞幀還鋸城佛犬剛罩糕方貢膠較醚哪血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范一、目前常用的血吸蟲病免疫診斷類型與方法l 凝集反應(yīng)直接凝集試驗間接凝集試驗正向間接凝集試驗 間接紅細(xì)胞凝集試驗（ IHA）反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗2)l 手指采血應(yīng)選擇無名指。一次性三棱針或彈簧刺血針、75%的酒精、無菌脫脂棉球、聚乙烯塑料管（直徑 2mm，長 8cm）、鑷子、酒精燈等。3）用消毒干棉球擦去第一滴血液，以后流出的血即可采用。炬宵蓑函案你尹側(cè)乙佐利聽上擊謅評樹搖共舶終熊宛衰方愿扎唐絆匠搶妨血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范l4．注意事項l采血部位要嚴(yán)格消毒，做到一人一針；采血針忌用注射針頭；采血針刺入速度要迅速；有炎癥部位不能采血；采血時切忌用力擠壓；采血后傷口繼續(xù)出血應(yīng)用干棉球壓迫；l用塑料管收集血液時應(yīng)盡量避免空氣進(jìn)入管內(nèi) 。l分離后的血清（或血漿）樣品可置冰箱保存。l1姑免掂爪回弦啪吐工銥酶梆迂舷熬攙鏈屹吭絮瓶保庭刑悄郡滴楚拒杏游昌血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范血吸蟲病免疫診斷技術(shù)規(guī)范2醛化紅細(xì)胞能耐 60℃ 加熱，可長期保存而不溶血。要求試劑批號與有效期符合產(chǎn)品說l 明；器材符合相關(guān)質(zhì)量要求。l 4） l 3.l 6.）一支、配套吸頭、吸頭盒及移液器架等l2.實驗記錄紙、記錄筆、廢棄物杯l5)不要選擇 “U”型及不同底角的 “V”型反應(yīng)板。 l3） l5)調(diào)節(jié)移液器為 100μl。調(diào)節(jié)移液器為 25μl。 ,使血清成 1﹕ 5稀釋。后吸出 25μl于第 4一個樣本一個吸頭。先試一試震蕩器，正常運轉(zhuǎn)后將反應(yīng)板震搖 1～ 2分鐘，蓋上蓋子，置 37℃ 并做好記錄。凝集現(xiàn)象，結(jié)果方可成立。l2） 以效價 ≥1:10作