【正文】 ，將脫氧核糖核苷酸添加于載體或目的基因的339。：即同聚物加尾連接法。如將載體與目的基因混合在一起，二者即可通過粘性末端進(jìn)行互補(bǔ)粘合，再加入DNA連接酶，即可封閉其缺口，得到重組體。用同聚物接尾法 ,常用cDNA法。平頭末端連接法 ,用T4DNA連接法。目的基因的體外重組即將帶有切口的載體與所獲得的目的基因連接起來，得到重新組合后的DNA分子。表達(dá)型載體應(yīng)具備與宿住基因相應(yīng)的啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、前導(dǎo)序列。有可供選擇的遺傳標(biāo)記 ,如抗藥性基因、酶基因、營(yíng)養(yǎng)缺陷型等。合適的載體有如下要求：必須能 自我復(fù)制。先把DNA片段按大小分成幾個(gè)組，然后，在采用鳥槍法分離目的基因。對(duì)真核細(xì)胞基因，因酶切后形成大小不等的成千上萬(wàn)DNA片段，若采用此法則難于篩選出所需要的基因。 鳥槍法實(shí)質(zhì)上是采用基因工程手段把染色體DNA用限制性內(nèi)切酶切割，將所有的片段都連接到某種載體上，轉(zhuǎn)入大腸桿菌中增值。單鏈DNA和人工引物退火。 PCR擴(kuò)增技術(shù)實(shí)際是體外DNA合成放大技術(shù)。 由于真核生物的基因中含有非編碼間隔區(qū) ,在原核生物中無法正常表達(dá) ,必須除去內(nèi)含子。3霉菌的基因工程改良 用限制性內(nèi)切酶消化含有目的基因的外源，使其獲得目的基因,并使之產(chǎn)生粘性或平頭末端 ,以與載體連接。（5）有時(shí)還要求載體要能啟動(dòng)外源基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，并且盡可能是高效的表達(dá)。（3）要有盡可能多種限制酶的切割位點(diǎn)，但每一種限制酶又要最少的切割位點(diǎn)。載體的具備以下幾個(gè)性能：（1）分子較小，可攜帶比較大的ＤＮＡ片段。到目前為止，常用的工具酶已有3000多種。要取得所需的目的基因DNA并與載體DNA連接在一起形成DNA重組體，首先要提供限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶。2基因工程用酶學(xué)方法，將異源基因與載體DNA在體外進(jìn)行重組，將形成的重組子DNA導(dǎo)入宿體細(xì)胞，使異源基因在宿體細(xì)胞中復(fù)制表達(dá)，從而達(dá)到改造生物品種或性狀，大量生產(chǎn)出人類所需要的生物品種和產(chǎn)物。毛霉菌種的質(zhì)量好壞關(guān)系到腐乳的形狀、色澤滋味及理化質(zhì)量，目前經(jīng)過菌種選育，已獲得一株生長(zhǎng)快速、菌絲旺盛、蛋白酶活性強(qiáng)的毛霉菌株，用它制成的接種劑可用于腐乳和臘八生產(chǎn)，其產(chǎn)品質(zhì)量?jī)?yōu)良、穩(wěn)定[2]。此外，木霉菌還可產(chǎn)生半纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、果膠酶，這些酶的共同作用可提高對(duì)碳水化合物、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)的消化吸收率，促進(jìn)吸收[1]?？梢娝型蔀樾滦偷目鼓[瘤藥物。在霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中還發(fā)現(xiàn)有能抑制缺氧信號(hào)傳遞的小分子物質(zhì)，很多類型的人類腫瘤細(xì)胞都處在嚴(yán)重缺氧的狀態(tài)下，它們?yōu)榱松?，建立了一系列的?jí)聯(lián)反應(yīng)來緩解缺氧。從生物中提取的天然食用色素?zé)o毒性，食用安全性好，但大多數(shù)因原料來源少，價(jià)格高限制了其廣泛應(yīng)用。目前從霉菌著手尋找生物農(nóng)藥的研究也很深入廣泛，例如：木霉菌是一類具有廣譜性、拮抗性生物防治菌。目前包括我國(guó)在內(nèi)的許多國(guó)家還大量應(yīng)用化學(xué)農(nóng)藥，已普遍導(dǎo)致了對(duì)環(huán)境的污染，致使農(nóng)產(chǎn)品安全衛(wèi)生問題嚴(yán)重，品種下降，并頻繁危及人類身體健康。除了青霉素，還有許多抗生素來源于霉菌，例如灰黃霉素、頭孢霉素等。1霉菌的應(yīng)用 抗生素是微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能選擇性地抑制其它種微生物生長(zhǎng)和活動(dòng)，甚至殺滅它種微生物的生物活性物質(zhì)?？傊咕谵r(nóng)業(yè)、紡織、食品、醫(yī)藥、皮革及促進(jìn)自然界的物質(zhì)循環(huán)等方面都起著極為重要的作用。凡是生長(zhǎng)在培養(yǎng)基上呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的菌落，都稱之為霉菌。自從弗萊明發(fā)現(xiàn)青霉素以來，國(guó)內(nèi)外對(duì)霉菌的研究引起眾多學(xué)者的關(guān)注，本文對(duì)目前霉菌的應(yīng)用現(xiàn)狀作一綜述，并介紹了利用基因工程改良霉菌菌種常用的幾種方法?！迸_(tái)灣清華大學(xué)分子醫(yī)院研究所教授李寬容如是說。我敢保證民眾目前看到的、聽到的，只是冰山之一角，說不定只是冰山之十分之一角。至此，享譽(yù)海內(nèi)外的臺(tái)北夜市美食，也未能幸免于難。由于起云劑本身的功能可使食品油水變得黏稠，看起來更原汁原味，所以現(xiàn)階段只要是看起來混濁、呈霧狀食品，比如臺(tái)民眾鐘愛的珍珠奶茶等食品的錠狀劑都被合理懷疑添加了有毒的起云劑。隨著相關(guān)部門的調(diào)查進(jìn)展，有毒塑化劑的波及面之大，令島內(nèi)外震驚。據(jù)孫璐西介紹，DEHP和DINP是普遍用于塑料材料的塑化劑，會(huì)危害男性生殖能力，促使女性性早熟。按照臺(tái)灣法規(guī)，“起云劑”為合法食品添加物，通常是由阿拉伯膠、乳化劑、棕櫚油及多種食品添加物混合制成，可幫助食品乳化。另一家起云劑供應(yīng)商賓漢香料化學(xué)公司也被曝光非法添加另一種塑化劑“鄰苯二甲酸二異壬酯”(DINP)。這才使臺(tái)灣衛(wèi)生部門順藤摸瓜查出這起“有毒食品案”。今年3月中旬，在抽驗(yàn)益生菌是否違法摻雜減肥西藥時(shí)，她意外發(fā)現(xiàn)檢驗(yàn)儀器出現(xiàn)異常訊號(hào)。意外發(fā)現(xiàn)揭露“冰山一角”最早發(fā)現(xiàn)“毒素”的，是一位在食品藥物管理局服務(wù)近26年的楊姓檢驗(yàn)員?！斑@是我30年來看過的最嚴(yán)重食品摻毒事件。有專家建議，大陸相關(guān)部門也應(yīng)對(duì)相關(guān)食品進(jìn)行排查，并對(duì)消費(fèi)者的血液進(jìn)行抽查調(diào)查，以確認(rèn)危害性及危害范圍《國(guó)際先驅(qū)導(dǎo)報(bào)》記者傅雙琪、張勇 特約撰稿鄭雯發(fā)自臺(tái)北短短一周內(nèi)，一種化工業(yè)用劑“塑化劑”突然闖入臺(tái)灣食品業(yè)界，并打翻了全臺(tái)的飲料、保健品市場(chǎng)。植物病原物微生物也可通過脫環(huán)氧化以及脫乙?；瘉斫到舛舅?。除此以外，單端孢霉烯族毒素是谷類農(nóng)作物中比較常見的真菌毒素，它們具有很強(qiáng)的物理化學(xué)穩(wěn)定性，但是它們?cè)谧匀画h(huán)境中并沒有蓄積，這表明自然環(huán)境中可能存在著DON 生物轉(zhuǎn)化降解作用。T2 毒素也僅有脫乙酰作用，而HT2 毒素和T2 三醇普遍的反應(yīng)是脫環(huán)氧作用。但是，單乙酰單端孢霉烯族毒素3ADON，15ADON 和鐮刀菌烯酮X 主要轉(zhuǎn)化成脫乙酰產(chǎn)物。轉(zhuǎn)化的類型與它們的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。后者毒性均明顯小于前者。 牛瘤胃液中分離得到菌株BBSH 797，主要的作用是在體內(nèi)和體外將DON 轉(zhuǎn)化成DOM1。目前，能有效轉(zhuǎn)化單端孢霉烯族毒素的微生物不多，它們主要來源于動(dòng)物腸道、土壤、植物等自然環(huán)境中。單端孢霉烯族毒素的脫毒對(duì)于DON、T2等單端孢霉烯族毒素的脫毒研究，物理處理的效果常常不太理想，并且往往會(huì)改變營(yíng)養(yǎng)成分。潮濕、溫和多雨的氣候有利于DON生長(zhǎng)。此類脫毒法條件溫和，可將毒素徹底分解而不會(huì)有毒性物質(zhì)殘留，只針對(duì)ZEN 起作用而不會(huì)破壞飼料和原料中的其他成分。Swamy 等進(jìn)行的體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，甘露聚糖可使豬避免ZEN 造成的生產(chǎn)性能下降。試驗(yàn)結(jié)果表明，酵母細(xì)胞壁可以吸附ZEN mg/kg，并且這種吸附平衡可以在10 min 內(nèi)達(dá)到。胞壁上的β葡聚糖等多糖是細(xì)胞壁吸附的主體,疏水作用在其中起著重要作用。經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，消膽胺可以作為一種飼料添加劑防止母豬的雌激素過多癥。未經(jīng)修飾的硅鋁酸鹽類對(duì)ZEN的吸附能力不佳，經(jīng)十六烷基吡啶鎓或十六烷基三甲基銨溴化物等對(duì)硅鋁酸鹽類吸附劑進(jìn)行化學(xué)改性，以增強(qiáng)硅鋁酸鹽表面的疏水性，從而增加對(duì)ZEN的吸附能力。研究較多的吸附劑主要有硅鋁酸鹽類和甘露聚糖。玉米赤霉烯酮的脫毒對(duì)于玉米赤霉烯酮等霉菌毒素的解脫毒研究主要集中在吸附法和生物降解法上。研究表明，ZEN 在不同動(dòng)物肝臟轉(zhuǎn)化的主要代謝物不同，豬主要轉(zhuǎn)化為α玉米赤霉烯醇，而奶牛主要代謝為β玉米赤霉烯醇。豬攝入Z E A 后，其劑量的67% 在48h內(nèi)被排出，尿中含45%，糞中含22%。熔點(diǎn)161 ℃～163 ℃,不溶于水,溶于堿性溶液、乙醚、苯及甲醇、乙醇等。除上述方法，還有在飼料中添加營(yíng)養(yǎng)元素，如蛋白質(zhì)、氨基酸以及硒可提高肝臟的解毒能力，以轉(zhuǎn)化毒素；酶制劑高效地催化、降解AFT 為無毒物質(zhì)。而且酯化葡配甘露聚糖與霉菌毒素結(jié)合后，霉菌毒素不易被解離。EGM有很大的表面區(qū)域，1 m