【正文】 因素引起的風險控制到最低程度。 4 不利因素及對策 紅豆杉原料林具有培育周期長、對自然環(huán)境因素依賴性較強的特點。 公司擬與北京、四川、廣州等地的大專院校、科研院所建立緊密技術(shù)支持關系。 .5 紅豆杉種植技術(shù)成熟，技術(shù)支撐有保障 對包括國內(nèi)外不同紅豆杉樹種的研究，基本經(jīng)歷了生物學特性、適生范圍、適生條件、栽培技術(shù)（遺傳培育和造林經(jīng)營技術(shù)）研究，對不同紅豆杉紫杉醇含量進行了深入分析。 （ 4） 構(gòu)建紅豆杉扶貧工程。 （ 3） 利用產(chǎn)業(yè)聯(lián)動作用。首先公司投資建設紅豆杉種植示范區(qū)，并用先進技術(shù)繁育紅豆杉種苗。 （ 2） 發(fā)揮龍頭帶動作用。 （ 1） 依靠政府推動作用。 2 基地構(gòu)成、面積 種植基地由＿＿個鄉(xiāng)鎮(zhèn)組成，總面積＿＿＿畝。在采用均衡布局原則下 ，根據(jù)社會、經(jīng)濟、自然條件的不同，經(jīng)過綜合比較、選擇，擬定＿＿＿內(nèi)＿＿個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的不同地塊作為本項目種植基地。隨著世界各國野生紅豆杉資源的劇減和各國對紅豆杉資源的保護政策的落實，在近20 年內(nèi)，紫杉醇供需矛盾將會更加突出。 （ 3） 紫杉醇原料競爭日趨激烈 據(jù)國際醫(yī)藥市場分析家估計，各國對紫杉醇原料的需求量在 今后很長時期內(nèi)仍然保持快速增長。 2021 年全球紫杉醇與半合成紫杉醇銷售額合計已達23億美元，約占全世界抗腫癌藥市場（ 1654億美元）的 %。 （ 2）國際市場 由于人口的快速增長和生存環(huán)境的日益惡化使癌癥患者越來越多，全世界每年新增癌癥患者 3000 多萬人，歐、美、日等發(fā)達國家年新增長的癌癥患者達 400萬人左右，全世界癌癥死亡人數(shù)每年達 630萬人。但是目前我國每年只能生產(chǎn)約 50kg 紫杉醇。之后北京、四川省等數(shù)個?。ㄊ校┱蚕嗬^明確了紫杉醇（英文名： Palliate）注射液是準予支付費用的藥品，并且這一范圍仍然在逐步擴大，字典無疑增大了紫杉醇市場需求量。 （ 1） 國內(nèi)市場 由于紫杉醇體格昂貴，使絕大部分癌癥患者不敢問津。因此應提高紅豆杉提取物 — 紫杉醇生產(chǎn)水平，降低生產(chǎn)成本，穩(wěn)定生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量。 （ 3） 紫杉醇分離提純技術(shù)落后，資源利用率低 目前國內(nèi)多數(shù)紫 杉醇提取廠家設備簡陋，且生產(chǎn)規(guī)模小，工藝上除雜純化技術(shù)差和產(chǎn)品質(zhì)量差個，得率也低，造成紅豆杉資源大量浪費。 （ 2） 紅豆杉人工培育資源遠遠不能滿足市場需求 一方面由于市場需求量巨大，另一方面利用現(xiàn)存的天然資源基本上不可能，現(xiàn)有人工繁殖資源又十分有限，遠元寶不能滿足市場需求，因此，進行人工扦插快繁，進行定向培育擴大紅豆杉可利用資源，是目前開發(fā)紫杉醇資源的有效途徑。一 些地方和企業(yè)為了自身利益，只顧短期行為，大量耗費紅豆杉資源，甚至采取殺雞取卵的野蠻方式，致使本來十分有限的資源遭到毀滅性的破壞。所以利用紅豆杉天然野生資源是不可能的了，由此為紅豆杉異地引種栽培和人工造林，定向培育擴大可利用資源白日提供了理論依據(jù)。目前，除中國紅可豆杉外其它幾種已成為中國甚至世界的珍 稀瀕危植物。近年來，我國開發(fā)的紫杉醇制劑產(chǎn)品有：太極集團的紫杉醇注射液；黑龍江省 紅豆杉醫(yī)藥研究所的達克素片和達克素膠囊；重慶賽諾生物藥業(yè)股份有限公司的復方紅豆杉膠囊；上海醫(yī)學院的特素；遼寧省醫(yī)藥實業(yè)公司的復方紅豆杉膠囊；還有紫杉醇的靶向隱形納 米粒制劑，紫杉醇乳劑量，紫杉醇空間穩(wěn)定型微型乳劑，紫杉醇質(zhì)體，紫杉醇空間穩(wěn)定脂質(zhì)體，紫杉醇隱形脂質(zhì)體，紫杉醇前體藥物脂質(zhì)體等制劑下在開發(fā)之中。自 90 年代后期開始，我國逐漸成為美國的紫杉相離原料供應國之一。到目前國產(chǎn)紫杉醇大部分供國內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)注射劑之用，僅有一小部分原料藥供出口海外市場。 我國利用國產(chǎn)紅豆杉研制開發(fā)的紫杉醇新藥 — 紫素（ Pachlitaxel）于 1995年通過 II期臨床試驗審評被批準上市 。迄今為止尚未見有第三種方法形成大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的報道。遺憾的是，這一方法雖然可行，但實際產(chǎn)量微不 足道，若要滿足國際市場對紫杉醇原料藥的巨大需求，實在是杯水車薪。半合成紫杉醇制劑現(xiàn)主要由法國普朗克制藥公司獨家生產(chǎn)，商品名為“泰索帝”。 目前銷售的紫杉醇按原料來源不同可分成二類。由于紫杉醇適應癥的擴大及其副作用相應小于其它抗腫瘤藥物（化療藥），故該產(chǎn)品在國際上已成為臨床上廣泛使用的首選抗癌藥物。紫杉醇在美國最初批準的臨床用途為治療晚期卵巢癌與非小細胞肺癌。紫杉醇的作用機理與已上市的其它化學合成抗腫瘤細胞重要的分裂方式 — 微 管蛋白合成使腫瘤體逐漸縮小而大直接殺死癌細胞。紫杉醇的開發(fā)利用正贏得越來越多的關注。 1992 年，紫杉醇（泰素）獲得了美國 FDA的新藥批準。作為 350000 種篩選之一的太平洋紫杉樹皮出被告送到了 NCI。從此，人類在抗癌領域又取得了新的突破。 20 世紀 80年代開始，美國、英國、俄羅斯、韓國、中國都相繼開展了深入的研究。目前，已分離和克隆了環(huán)化酶 TDCI、 cDNA和羥化酶 Tat等關鍵酶基因，以此直接向產(chǎn)生紫杉醇的真菌中導入，產(chǎn)生具有較高紫杉醇產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因真菌，使紫杉醇實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)成為可能。 5） 基因工程 研究 證實在紫杉醇生物合成過程中，由 GGPP 環(huán)化成紫杉二烯是一個慢的或限速的反應步驟，因此，增強環(huán)化反應對紫杉醇的積累有著積極的作用，所以環(huán)化酶是一個很好的目標基因。 由于真菌生長速度快，繁殖周期短，來源廣，通過發(fā)酵可大規(guī)模生產(chǎn)，提高紫杉醉產(chǎn)量。 2021 年周東坡等從東北紅豆 杉中分離，經(jīng)純化發(fā)酵培養(yǎng)得到的 3 株真菌 HQ3 HQ4 HQ54，其紫杉醇產(chǎn)量達 g/L，后經(jīng)幾年的生物工程手段選育，使其產(chǎn)紫杉醇的水平提高了幾倍。 4） 微生物生產(chǎn) 1993 年 Sterile 從 短 葉 紅 豆 杉 分 離 得 到 一 種 寄 生 真 菌（ Faxomycesandrecas），可以在特定的培養(yǎng)基中產(chǎn)生紫杉醇及相關的化合物，但含量極低 (2425u g/L)，未得到應用。同 年， Salyut等發(fā)明的專利也介紹了根癌農(nóng)桿菌感染紅豆杉形成冠癭瘤的情況，證明冠癭瘤具有產(chǎn)生紫杉醇的能力。 3） 遺傳轉(zhuǎn)化 利用根癌農(nóng)桿菌（ Agrobacteriumtumefaciens）和發(fā)根農(nóng)桿菌()的野生型株系均可成功轉(zhuǎn)移外源 DNA 進入紅豆杉基因組。半合成主要是依賴自然資源提取獲得 的紫杉醇前體如 backdating LII 等。 2） 化學合成 以美國 Nikolaou博士為首研究小組 1994年報道了通過化學方法全合成紫杉醇。研究表明：無論是細胞懸浮培養(yǎng)，還誘導愈傷組織，細胞的生長及紫杉醇的含量在黑暗條件下是光照條件下的 3倍。培養(yǎng)第 15d加入 100g/L黃豆芽提取液、 100mg/L苯二酸鈉和 、 。在紅豆杉細胞懸浮培養(yǎng)的基礎上，添加真菌誘導物 、苯甲 酸鈉 mg/L、 a蒎烯 ，有利于固體化培養(yǎng)及紫杉醇的提高。 1998 年余龍江等通過對紅豆杉莖尖和根尖離體培養(yǎng)細胞進行染色體數(shù)目觀察分析，認為染色體數(shù)目變異可能是影響紅豆杉離體培養(yǎng)紫杉醇產(chǎn)量的主要因子。韓國山野廳林木育種研究所的孫圣鎬博士從東北紅 豆杉截取芽眼，放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)增殖后提取紫杉醇，從每公斤芽眼只能提取 提高到 ，產(chǎn)量提高了 19 倍。 1933 年 Zamia 等首次報道了有關紫杉醇生物合成的研究情況。目前國內(nèi)外已有 10向家實驗室對 10多種紅豆杉屬植物進行細胞培養(yǎng)研究，申請被批準的專利達 20 余個。 （ 2）紫杉醇研究概況 紫杉醇（ C47H51NO14）為白色結(jié)晶粉末，熔點 213216℃（分解），微溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有機溶劑。結(jié)果表明：紅豆杉是一類喜溫涼植物，喜陰濕環(huán)境。 通過控制紅豆杉林的密謀以及采取施肥等手段，對提高 紅豆杉的生物量均有積極的作用。謝志遠等通過采用 RT 技術(shù)，即對曼地亞紅豆杉植物枝葉噴灑含有特殊誘導劑的混合液，提高細胞內(nèi) CO2濃度，抑制植物光呼吸，提高植物體內(nèi) C 固定率，從而促進植物生長，提高次生代謝物含量。2021 年王金盾報道通過先種生長較慢的紅豆杉，后種杉木營造混交林。在我國南方一些省區(qū)，其它紅豆杉品種的栽培試驗也于上世紀 90年代有零星進行，取得了一不定進展。因些扦插苗是苗木快繁的有效途徑。插穗應選 20 齡以下母樹的 12a生的充分木質(zhì)化硬枝。紅豆杉扦插時間則以秋季為宜，在全光噴霧條件下，用 100mg/LABT1 號浸泡插穗 1h，成活率可達 98%。苗床基質(zhì)以善土 +蛭石（ 1:1）、壤土 +河沙（ 1:2）、壤土 +河沙 +蛭石（ 1:1:1）為好。一般扦插前用吲哚丁酸、 a萘乙酸、 ABT 生根劑處理較好。 ③扦插育苗 在查清野生紅豆杉資源及篩選出可利用居群的基礎上， 20 世紀 90年代初林業(yè)部門組織力量開展了紅豆杉扦插繁殖技術(shù)研究，取得了較理想的效果。播種時間以 1月下旬 3月上旬為宜。 1995 年 Lee和 Son 以東北紅豆杉未成熟胚為外植體先在 NAA 的改良 B5 培養(yǎng)基或在含 2， 4D 與 KT 的MS或 WPM培養(yǎng)基上培養(yǎng)，后轉(zhuǎn)至無激素的培養(yǎng)基中誘導，均出現(xiàn)了體胚。 1981 年以來 ,Amos、 McCown、 Blames 等報道了用紅豆杉屬植物莖尖的嫩芽繁殖試驗，將培養(yǎng)物接種于含不同濃度 BA的 WPM培養(yǎng)基上，試驗證明：低濃度的 BA 有利于嫩芽產(chǎn)生。 1998年以來，相繼有陳永勤、李志良等分別采用 B5與 MS 培養(yǎng)基相結(jié)合的 BM培養(yǎng)基及加入適量的 2， 4D、 6BA、 GA3等激素以解除紅豆杉離體胚休眠及用 McCown 培養(yǎng)基等進行組織培養(yǎng)研究，篩選出 6BAlmg/l+2,+AC4g/L,萌發(fā)率達81%的最佳組合，并證明 1/4的 McCone 更有利于幼苗的生根、發(fā)芽、成苗。結(jié)果表明： B5 培養(yǎng)基上培養(yǎng) 14d，歐洲紅豆、東北紅豆杉未成熟胚生長良好，短葉紅豆杉與東北紅豆杉在 MS培養(yǎng)基上生長較快，而短葉紅豆杉和東北紅豆杉成熟種子離體胚出現(xiàn)輕度休眠，雜種紫杉則出現(xiàn)深度休眠。 19701973年的進一步研究證實河以通過的培養(yǎng)基中添加赤霉素以解除內(nèi)源 ABA 對紅豆杉離體胚萌發(fā)的抑制作用。 3 紅豆杉及紫及醇研究進展 （ 1）紅豆杉栽培技術(shù)現(xiàn)狀 1）人工栽培 ①組織培養(yǎng)育苗 1953 年首先對紅豆杉配子體及花粉進行了體外培養(yǎng)。此外尚含維生素 C、 B B2 及糖類，具有很高的 營養(yǎng)價值，可開發(fā)作保健藥品和飲品。 （ 5） 食用 紅豆杉假種皮，味甜軟糯、食用可口，為鳥類和山區(qū)放牧、砍柴、旅游者常食用。油主要含蛋白質(zhì)、脂肪、總糖。紅豆杉木質(zhì)堅韌、紋理細直、色澤淡紅，有獨特的盆景觀賞價值， 應用矮化技術(shù)處理的東北紅豆杉盆景造型古樸典雅，枝葉緊湊而不密集，舒展而不松散，紅莖、紅枝、綠葉、紅豆使其具有觀莖、觀枝、觀葉、觀果的多重觀賞價值。木材抗腐性強，硬度適中，耐水濕，是水利工程、建筑、輪船、車輛、高級家具、器材、雕刻、文具等的優(yōu)良用材。因此有關紫杉醇的臨床研究和該屬植物的合理開發(fā)利用研究也成為國內(nèi)、外的研究熱點。紅豆杉枝葉用于治療白血病、腎炎、糖尿病以及多囊性腎病。紫杉醇能在癌癥晚期抑制紡錘體和紡錘絲的形成，從而抑制有絲分裂，阻止癌細胞增殖。由美國 Wane 等首先從短葉紅豆杉（ ）樹皮中分離到紫杉醇，并于 1993 年 1 月在美國正式投放市場。葉，枝入藥都有通經(jīng)、利尿、抑制糖尿病及治療心臟病之效用。 （ 1） 紅豆杉的藥用價值 紅豆杉在我國醫(yī)學中早有記載：《本草綱目》就記有紅豆杉治療霍亂、傷寒、排毒等療效；在現(xiàn)代中藥大辭典》、《東北藥植志》、《吉林中草藥》、《本草推陳》等醫(yī)藥書中還有進一步的記載。這些階段性成果的取得為目前解決紫杉醇原料科短缺找到期一條經(jīng)濟的方法，但由于紅豆杉生長緩慢，且市場需求愈來愈大的形勢，人口栽培將不是積 極有效的解決途徑。江蘇南京 1954年引種，經(jīng) 40余年的管護，以形成一處成年栽培種群，并能正常開花結(jié)實。 為 了有效保護紅豆杉資源，在資源就地保護、遷地保護和優(yōu)質(zhì)種源基因庫建設等方面作了大量的工作，取得了一不定期的成效。總體來看，我國的野生紅豆杉盡管面積并不小，但由于分布比較零星，少有成片分布，野生資源的蘊藏量并不是很大。經(jīng)數(shù)年試驗，引種取得成功， 并且已經(jīng)于 2021年通過成果驗收。其母本為東北紅豆杉，父本為歐洲紅豆杉，在美國和加拿大生長已民用工業(yè) 80年的歷史，多為灌木型。分布面積很小，缺乏開發(fā)利用的價值，目前保存比較完整。但前些年人為破壞十分嚴重，僅云南奔山一地就損失 ，初步估計被盜剝的紅豆杉樹皮高達 1321 噸，使該地區(qū)的資源瀕 臨滅絕。一般分布于海拔 17003500 米的陰坡、半陰坡地洼處，散生于亞高山針葉林、針闊混交林或濕性常綠闊葉林中。在秦巴山區(qū)約有 1015 萬株野生中國紅豆極，通過合理利用，年可采摘的小枝及針 葉鮮重 100200噸。 ③ 中國紅豆杉：中國紅豆杉分布較廣，在華中、華南、西南各省區(qū)海拔 1000m 以上的山地上部有零星分布。與其它闊葉或針葉樹混生，極少成純林，分布海拔在 600800 米，個別地區(qū)可低至 400米左右。多散生于海拔 600～ 1200 米的紅松、魚鱗云杉、白樺和山楊等針闊混交林內(nèi)，自然分布區(qū)狹窄，資源蘊藏量十分有限，估計我國鮮重的總蘊藏量不足 300 噸，且年凈生長量低，幾乎沒有可采收利用的潛力。 中國野生紅豆杉菜有 4種 1變種，引種栽培成功的紅豆杉 1種，其分