【正文】 等措施，將自然因素引起的風(fēng)險(xiǎn)控制到最低程度。 4 不利因素及對(duì)策 紅豆杉原料林具有培育周期長(zhǎng)、對(duì)自然環(huán)境因素依賴性較強(qiáng)的特點(diǎn)。 公司擬與北京、四川、廣州等地的大專院校、科研院所建立緊密技術(shù)支持關(guān)系。 .5 紅豆杉種植技術(shù)成熟，技術(shù)支撐有保障 對(duì)包括國(guó)內(nèi)外不同紅豆杉樹(shù)種的研究，基本經(jīng)歷了生物學(xué)特性、適生范圍、適生條件、栽培技術(shù)（遺傳培育和造林經(jīng)營(yíng)技術(shù)）研究，對(duì)不同紅豆杉紫杉醇含量進(jìn)行了深入分析。 （ 4） 構(gòu)建紅豆杉扶貧工程。 （ 3） 利用產(chǎn)業(yè)聯(lián)動(dòng)作用。首先公司投資建設(shè)紅豆杉種植示范區(qū)，并用先進(jìn)技術(shù)繁育紅豆杉種苗。 （ 2） 發(fā)揮龍頭帶動(dòng)作用。 （ 1） 依靠政府推動(dòng)作用。 2 基地構(gòu)成、面積 種植基地由＿＿個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)組成，總面積＿＿＿畝。在采用均衡布局原則下， 根據(jù)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、自然條件的不同，經(jīng)過(guò)綜合比較、選擇，擬定＿＿＿內(nèi)＿＿個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的不同地塊作為本項(xiàng)目種植基地。隨著世界各國(guó)野生紅豆杉資源的劇減和各國(guó)對(duì)紅豆杉資源的保護(hù)政策的落實(shí)，在近20 年內(nèi)，紫杉醇供需矛盾將會(huì)更加突出。 （ 3） 紫杉醇原料競(jìng)爭(zhēng)日趨激烈 據(jù)國(guó)際醫(yī)藥市場(chǎng)分析家估計(jì)，各國(guó)對(duì)紫杉醇原料的需求量在今 后很長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)仍然保持快速增長(zhǎng)。 2021 年全球紫杉醇與半合成紫杉醇銷售額合計(jì)已達(dá)23億美元，約占全世界抗腫癌藥市場(chǎng)（ 1654億美元）的 %。 （ 2）國(guó)際市場(chǎng) 由于人口的快速增長(zhǎng)和生存環(huán)境的日益惡化使癌癥患者越來(lái)越多，全世 界每年新增癌癥患者 3000 多萬(wàn)人，歐、美、日等發(fā)達(dá)國(guó)家年新增長(zhǎng)的癌癥患者達(dá) 400萬(wàn)人左右，全世界癌癥死亡人數(shù)每年達(dá) 630萬(wàn)人。但是目前我國(guó)每年只能生產(chǎn)約 50kg 紫杉醇。之后北京、四川省等數(shù)個(gè)省（市）政府也相繼明確了紫杉醇（英文名： Palliate）注射液是準(zhǔn)予支付費(fèi)用的藥品，并且這一范圍仍然在逐步擴(kuò)大，字典無(wú)疑增大了紫杉醇市場(chǎng)需求量。 （ 1） 國(guó)內(nèi)市場(chǎng) 由于紫杉醇體格昂貴，使絕大部分癌癥患者不敢問(wèn)津。因此應(yīng)提高紅豆杉提取物 — 紫杉醇生產(chǎn)水平，降低生產(chǎn)成本，穩(wěn)定生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量。 （ 3） 紫杉醇分離提純技術(shù)落后，資源利用率低 目前國(guó)內(nèi)多數(shù)紫杉 醇提取廠家設(shè)備簡(jiǎn)陋，且生產(chǎn)規(guī)模小，工藝上除雜純化技術(shù)差和產(chǎn)品質(zhì)量差個(gè)，得率也低，造成紅豆杉資源大量浪費(fèi)。 （ 2） 紅豆杉人工培育資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求 一方面由于市場(chǎng)需求量巨大，另一方面利用現(xiàn)存的天然資源基本上不可能，現(xiàn)有人工繁殖資源又十分有限，遠(yuǎn)元寶不能滿足市場(chǎng)需求，因此，進(jìn)行人工扦插快繁，進(jìn)行定向培育擴(kuò)大紅豆杉可利用資源，是目前開(kāi)發(fā)紫杉醇資源的有效途徑。一些地方和企業(yè)為了自身利益，只顧短期行為，大量耗費(fèi)紅豆杉資源，甚至采取殺雞取卵的野蠻方式，致使本來(lái)十分有限的資源遭到毀滅性的破壞。所以利用紅豆杉天然野生資源是不可能的了，由此為紅豆杉異地引種栽培和人工造林，定向培育擴(kuò)大可利用資源白日提供了理論依據(jù)。目前，除中國(guó)紅可豆杉外其它幾種已成為中國(guó)甚至世界的珍稀 瀕危植物。近年來(lái)，我國(guó)開(kāi)發(fā)的紫杉醇制劑產(chǎn)品有：太極集團(tuán)的紫杉醇注射液；黑龍江省紅 豆杉醫(yī)藥研究所的達(dá)克素片和達(dá)克素膠囊；重慶賽諾生物藥業(yè)股份有限公司的復(fù)方紅豆杉膠囊；上海醫(yī)學(xué)院的特素；遼寧省醫(yī)藥實(shí)業(yè)公司的復(fù)方紅豆杉膠囊；還有紫杉醇的靶向隱形納 米粒制劑，紫杉醇乳劑量，紫杉醇空間穩(wěn)定型微型乳劑，紫杉醇質(zhì)體，紫杉醇空間穩(wěn)定脂質(zhì)體，紫杉醇隱形脂質(zhì)體，紫杉醇前體藥物脂質(zhì)體等制劑下在開(kāi)發(fā)之中。自 90 年代后期開(kāi)始，我國(guó)逐漸成為美國(guó)的紫杉相離原料供應(yīng)國(guó)之一。到目前國(guó)產(chǎn)紫杉醇大部分供國(guó)內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)注射劑之用，僅有一小部分原料藥供出口海外市場(chǎng)。 我國(guó)利用國(guó)產(chǎn)紅豆杉研制開(kāi)發(fā)的紫杉醇新藥 — 紫素（ Pachlitaxel）于 1995年通過(guò) II期臨床試驗(yàn)審評(píng)被批準(zhǔn)上市。迄今為止尚未見(jiàn)有第三種方法形成大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的報(bào)道。遺憾的是，這一方法雖然可行，但實(shí)際產(chǎn)量微不足 道，若要滿足國(guó)際市場(chǎng)對(duì)紫杉醇原料藥的巨大需求，實(shí)在是杯水車薪。半合成紫杉醇制劑現(xiàn)主要由法國(guó)普朗克制藥公司獨(dú)家生產(chǎn)，商品名為“泰索帝”。 目前銷售的紫杉醇按原料來(lái)源不同可分成二類。由于紫杉醇適應(yīng)癥的擴(kuò)大及其副作用相應(yīng)小于其它抗腫瘤藥物（化療藥），故該產(chǎn)品在國(guó)際上已成為臨床上廣泛使用的首選抗癌藥物。紫杉醇在美國(guó)最初批準(zhǔn)的臨床用途為治療晚期卵巢癌與非小細(xì)胞肺癌。紫杉醇的作用機(jī)理與已上市的其它化學(xué)合成抗腫瘤細(xì)胞重要的分裂方式 — 微管 蛋白合成使腫瘤體逐漸縮小而大直接殺死癌細(xì)胞。紫杉醇的開(kāi)發(fā)利用正贏得越來(lái)越多的關(guān)注。 1992 年，紫杉醇（泰素）獲得了美國(guó) FDA的新藥批準(zhǔn)。作為 350000 種 篩選之一的太平洋紫杉樹(shù)皮出被告送到了 NCI。從此，人類在抗癌領(lǐng)域又取得了新的突破。 20 世紀(jì) 80年代開(kāi)始，美國(guó)、英國(guó)、俄羅斯、韓國(guó)、中國(guó)都相繼開(kāi)展了深入的研究。目前，已分離和克隆了環(huán)化酶 TDCI、 cDNA和羥化酶 Tat等關(guān)鍵酶基因，以此直接向產(chǎn)生紫杉醇的真菌中導(dǎo)入，產(chǎn)生具有較高紫杉醇產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因真菌，使紫杉醇實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)成為可能。 5） 基因工程 研究證 實(shí)在紫杉醇生物合成過(guò)程中，由 GGPP 環(huán)化成紫杉二烯是一個(gè)慢的或限速的反應(yīng)步驟，因此，增強(qiáng)環(huán)化反應(yīng)對(duì)紫杉醇的積累有著積極的作用，所以環(huán)化酶是一個(gè)很好的目標(biāo)基因。 由于真菌生長(zhǎng)速度快，繁殖周期短，來(lái)源廣，通過(guò)發(fā)酵可大規(guī)模生產(chǎn)，提高紫杉醉產(chǎn)量。 2021 年周東坡等從東北紅豆杉中分離，經(jīng)純化發(fā)酵培養(yǎng)得到的 3 株真菌 HQ3 HQ4 HQ54，其紫杉醇產(chǎn)量達(dá) g/L，后經(jīng)幾年的生物工程手段選育，使其產(chǎn)紫杉醇的水平提高了幾倍。 4） 微生物生產(chǎn) 1993 年 Sterile 從 短 葉 紅 豆 杉 分 離 得 到 一 種 寄 生 真 菌（ Faxomycesandrecas），可以在特定的培養(yǎng)基中產(chǎn)生紫杉醇及相關(guān)的化合物，但含量極低 (2425u g/L)，未得到應(yīng)用。同年 ， Salyut等發(fā)明的專利也介紹了根癌農(nóng)桿菌感染紅豆杉形成冠癭瘤的情況，證明冠癭瘤具有產(chǎn)生紫杉醇的能力。 3） 遺傳轉(zhuǎn)化 利用根癌農(nóng)桿菌（ Agrobacteriumtumefaciens）和發(fā)根農(nóng)桿菌()的野生型株系均可成功轉(zhuǎn)移外源 DNA 進(jìn)入紅豆杉基因組。半合成主要是依賴自然資源提取獲得的 紫杉醇前體如 backdating LII 等。 2） 化學(xué)合成 以美國(guó) Nikolaou博士為首研究小組 1994年報(bào)道了通過(guò)化學(xué)方法全合成紫杉醇。研究表明：無(wú)論是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，還誘導(dǎo)愈傷組織，細(xì)胞的生長(zhǎng)及紫杉醇的含量在黑暗條件下是光照條件下的 3倍。培養(yǎng)第 15d加入 100g/L黃豆芽提取液、 100mg/L苯二酸鈉和 、 。在紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，添加真菌誘導(dǎo)物 、苯甲酸 鈉 mg/L、 a蒎烯 ，有利于固體化培養(yǎng)及紫杉醇的提高。 1998 年余龍江等通過(guò)對(duì)紅豆杉莖尖和根尖離體培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行染色體數(shù)目觀察分析，認(rèn)為染色體數(shù)目變異可能是影響紅豆杉離體培養(yǎng)紫杉醇產(chǎn)量的主要因子。韓國(guó)山野廳林木育種研究所的孫圣鎬博士從東北紅豆 杉截取芽眼，放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)增殖后提取紫杉醇，從每公斤芽眼只能提取 提高到 ，產(chǎn)量提高了 19 倍。 1933 年 Zamia 等首次報(bào)道了有關(guān)紫杉醇生物合成的研究情況。目前國(guó)內(nèi)外已有 10向家實(shí)驗(yàn)室對(duì) 10多種紅豆杉屬植物進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)研究，申請(qǐng)被批準(zhǔn)的專利達(dá) 20 余個(gè)。 （ 2）紫杉醇研究概況 紫杉醇（ C47H51NO14）為白色結(jié)晶粉末，熔點(diǎn) 213216℃（分解），微溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有機(jī)溶劑。結(jié)果表明：紅豆杉是一類喜溫涼植物，喜陰濕環(huán)境。通 過(guò)控制紅豆杉林的密謀以及采取施肥等手段，對(duì)提高紅豆杉的生物量均有積極的作用。謝志遠(yuǎn)等通過(guò)采用 RT 技術(shù)，即對(duì)曼地亞紅豆杉植物枝葉噴灑含有特殊誘導(dǎo)劑的混合液，提高細(xì)胞內(nèi) CO2濃度，抑制植物光呼吸，提高植物體內(nèi) C 固定率，從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高次生代謝物含量。2021 年王金盾報(bào)道通過(guò)先種生長(zhǎng)較慢的紅豆杉，后種杉木營(yíng)造混交林。在我國(guó)南方一些省區(qū)，其它紅豆杉品種的栽培試驗(yàn)也于上世紀(jì) 90年代有零星進(jìn)行，取得了一不定進(jìn)展。因些扦插苗是苗木快繁的有效途徑。插穗應(yīng)選 20 齡以下母樹(shù)的 12a生的充分木質(zhì)化硬枝。紅豆杉扦插時(shí)間則以秋季為宜，在全光噴霧條件下，用 100mg/LABT1 號(hào)浸泡插穗 1h，成活率可達(dá) 98%。苗床基質(zhì)以善土 +蛭石（ 1:1）、壤土 +河沙（ 1:2）、壤土 +河沙 +蛭石（ 1:1:1）為好。一般扦插前用吲哚丁酸、 a萘乙酸、 ABT 生根劑處理較好。 ③扦插育苗 在查清野生紅豆杉資源及篩選出可利用居群的基礎(chǔ)上， 20 世紀(jì) 90年代初林業(yè)部門組織力量開(kāi)展了紅豆杉扦插繁殖技術(shù)研究，取得了較理想的效果。播種時(shí)間以 1月下旬 3月上旬為宜。 1995 年 Lee和 Son 以東北紅豆杉未成熟胚為外植體先在 NAA 的改良 B5 培養(yǎng)基或在含 2， 4D 與 KT 的MS或 WPM培養(yǎng)基上培養(yǎng)，后轉(zhuǎn)至無(wú)激素的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)，均出現(xiàn)了體胚。 1981 年以來(lái) ,Amos、 McCown、 Blames 等報(bào)道了用紅豆杉屬植物莖尖的嫩芽繁殖試驗(yàn)，將培養(yǎng)物接種于含不同濃度 BA的 WPM培養(yǎng)基上，試驗(yàn)證明：低濃度的 BA 有利于嫩芽產(chǎn)生。 1998年以來(lái)，相繼有陳永勤、李志良等分別采用 B5與 MS 培養(yǎng)基相結(jié)合的 BM培養(yǎng)基及加入適量的 2， 4D、 6BA、 GA3等激素以解除紅豆杉離體胚休眠及用 McCown 培養(yǎng)基等進(jìn)行組織培養(yǎng)研究，篩選出 6BAlmg/l+2,+AC4g/L,萌發(fā)率達(dá)81%的最佳組合，并證明 1/4的 McCone 更有利于幼苗的生根、發(fā)芽、成苗。結(jié)果表明： B5 培養(yǎng)基上培養(yǎng) 14d，歐洲紅豆、東北紅豆杉未成熟胚生長(zhǎng)良好，短葉紅豆杉與東北紅豆杉在 MS培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快，而短葉紅豆杉和東北紅豆杉成熟種子離體胚出現(xiàn)輕度休眠，雜種紫杉則出現(xiàn)深度休眠。 19701973年的進(jìn)一步研究證實(shí)河以通過(guò)的培養(yǎng)基中添加赤霉素以解除內(nèi)源 ABA 對(duì)紅豆杉離體胚萌發(fā)的抑制作用。 3 紅豆杉及紫及醇研究進(jìn)展 （ 1）紅豆杉栽培技術(shù)現(xiàn)狀 1）人工栽培 ①組織培養(yǎng)育苗 1953 年首先對(duì)紅豆杉配子體及花粉進(jìn)行了體外培養(yǎng)。此外尚含維生素 C、 B B2 及糖類，具有很高的營(yíng) 養(yǎng)價(jià)值，可開(kāi)發(fā)作保健藥品和飲品。 （ 5） 食用 紅豆杉假種皮，味甜軟糯、食用可口，為鳥(niǎo)類和山區(qū)放牧、砍柴、旅游者常食用。油主要含蛋白質(zhì)、脂肪、總糖。紅豆杉木質(zhì)堅(jiān)韌、紋理細(xì)直、色澤淡紅，有獨(dú)特的盆景觀賞價(jià)值，應(yīng) 用矮化技術(shù)處理的東北紅豆杉盆景造型古樸典雅，枝葉緊湊而不密集，舒展而不松散，紅莖、紅枝、綠葉、紅豆使其具有觀莖、觀枝、觀葉、觀果的多重觀賞價(jià)值。木材抗腐性強(qiáng)，硬度適中，耐水濕，是水利工程、建筑、輪船、車輛、高級(jí)家具、器材、雕刻、文具等的優(yōu)良用材。因此有關(guān)紫杉醇的臨床研究和該屬植物的合理開(kāi)發(fā)利用研究也成為國(guó)內(nèi)、外的研究熱點(diǎn)。紅豆杉枝葉用于治療白血病、腎炎、糖尿病以及多囊性腎病。 紫杉醇能在癌癥晚期抑制紡錘體和紡錘絲的形成，從而抑制有絲分裂，阻止癌細(xì)胞增殖。由美國(guó) Wane 等首先從短葉紅豆杉（ ）樹(shù)皮中分離到紫杉醇，并于 1993 年 1 月在美國(guó)正式投放市場(chǎng)。葉，枝入藥都有通經(jīng)、利尿、抑制糖尿病及治療心臟病之效用。 （ 1） 紅豆杉的藥用價(jià)值 紅豆杉在我國(guó)醫(yī)學(xué)中早有記載：《本草綱目》就記有紅豆杉治療霍亂、傷寒、排毒等療效；在現(xiàn)代中藥大辭典》、《東北藥植志》、《吉林中草藥》、《本草推陳》等醫(yī)藥書(shū)中還有進(jìn)一步的記載。這些階段性成果的取得為目前解決紫杉醇原料科短缺找到期一條經(jīng)濟(jì)的方法，但由于紅豆杉生長(zhǎng)緩慢，且市場(chǎng)需求愈來(lái)愈大的形勢(shì)，人口栽培將不是積極 有效的解決途徑。江蘇南京 1954年引種，經(jīng) 40余年的管護(hù)，以形成一處成年栽培種群，并能正常開(kāi)花結(jié)實(shí)。 為了 有效保護(hù)紅豆杉資源，在資源就地保護(hù)、遷地保護(hù)和優(yōu)質(zhì)種源基因庫(kù)建設(shè)等方面作了大量的工作，取得了一不定期的成效?？傮w來(lái)看，我國(guó)的野生紅豆杉盡管面積并不小，但由于分布比較零星，少有成片分布，野生資源的蘊(yùn)藏量并不是很大。經(jīng)數(shù)年試驗(yàn)，引種取得成功，并 且已經(jīng)于 2021年通過(guò)成果驗(yàn)收。其母本為東北紅豆杉，父本為歐洲紅豆杉，在美國(guó)和加拿大生長(zhǎng)已民用工業(yè) 80年的歷史，多為灌木型。分布面積很小，缺乏開(kāi)發(fā)利用的價(jià)值，目前保存比較完整。但前些年人為破壞十分嚴(yán)重，僅云南奔山一地就損失 ，初步估計(jì)被盜剝的紅豆杉樹(shù)皮高達(dá) 1321 噸，使該地區(qū)的資源瀕臨 滅絕。一般分布于海拔 17003500 米的陰坡、半陰坡地洼處，散生于亞高山針葉林、針闊混交林或濕性常綠闊葉林中。在秦巴山區(qū)約有 1015 萬(wàn)株野生中國(guó)紅豆極，通過(guò)合理利用，年可采摘的小枝及針葉 鮮重 100200噸。 ③ 中國(guó)紅豆杉：中國(guó)紅豆杉分布較廣，在華中、華南、西南各省區(qū)海拔 1000m 以上的山地上部有零星分布。與其它闊葉或針葉樹(shù)混生，極少成純林，分布海拔在 600800 米，個(gè)別地區(qū)可低至 400米左右。多散生于海拔 600～ 1200 米的紅松、魚(yú)鱗云杉、白樺和山楊等針闊混交林內(nèi)，自然分布區(qū)狹窄，資源蘊(yùn)藏量十分有限，估計(jì)我國(guó)鮮重的總蘊(yùn)藏量不足 300 噸，且年凈生長(zhǎng)量低，幾乎沒(méi)有可采收利用的潛力。 中國(guó)野生紅豆杉菜有 4種 1變種，引種栽培成功的紅豆杉 1種，其分布和資源狀況如下：