甲霜靈膠體金競(jìng)爭(zhēng)法試紙-文庫吧資料
2025-01-22 12:21本頁面
【正文】 條是濃度為300ng/mL甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果。 結(jié)果分析甲霜靈競(jìng)爭(zhēng)法試紙條與濃度均為 100μg/mL的草甘磷、甲基立枯磷、敵百蟲、林丹、綠麥隆、甲基對(duì)硫磷、禾草靈、乙草胺、甲草胺、甲胺磷、甲萘威、毒死蜱、百菌清、莠去津常用農(nóng)藥均無交叉反應(yīng)，特異性好。 ? ③ 特異性鑒定? 取甲霜靈競(jìng)爭(zhēng)法試紙條，依次浸入濃度均為100μg/mL的草甘磷、甲基立枯磷、敵百蟲、林丹、綠麥隆、甲基對(duì)硫磷、禾草靈、乙草胺、甲草胺、甲胺磷、甲萘威、毒死蜱、百菌清、莠去津樣品中， 5分鐘內(nèi)各試紙條在檢測(cè)區(qū)和控制區(qū)均可見一條色帶，為陰性 。圖中試紙條從左到右依次是濃度為 100ng/mL、 300ng/mL、500ng/mL、 800ng/mL、 1μ g/mL甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果分析： 甲霜靈競(jìng)爭(zhēng)法試紙條敏感度可達(dá)到 300ng/mL；檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品有梯度變化，靈敏度高，批間差小，性能穩(wěn)定。生產(chǎn)試紙條進(jìn)行半成品的鑒定甲霜靈競(jìng)爭(zhēng)法試紙條半成品靈敏度調(diào)試 ? ① 敏感性鑒定? 取甲霜靈競(jìng)爭(zhēng)法試紙條，依次浸入蒸餾水、濃度為10ng/mL、 50ng/mL、 100ng/mL、 300ng/mL、500ng/mL、 1μ g/mL、 2μ g/mL甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品中， 5分鐘內(nèi)各試紙條均可見一條紅色的控制線，其中蒸餾水和濃度為 10ng/mL、 50ng/mL、 100ng/mL的甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品在檢測(cè)區(qū)和控制區(qū)均可見一條色帶，為陰性；而濃度為 300ng/mL、 500ng/mL、 1μ g/mL、 2μ g/mL甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品僅在控制區(qū)出現(xiàn)一條色帶，為陽性。生產(chǎn)試紙條進(jìn)行半成品的鑒定.198條陰性 與其它農(nóng)藥均無交叉 結(jié)果符合要求，測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品有梯度。生產(chǎn)試紙條進(jìn)行半成品的鑒定.198條陰性 檢測(cè)陽性參考品達(dá)300ng/mL結(jié)果符合要求，測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品有梯度。 結(jié)果符合要求，測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品有梯度。檢測(cè)不同濃度的小樣 8個(gè).138條無反應(yīng)線檢測(cè)不同濃度的小樣 8個(gè).118條陰性 檢測(cè)限 100μ g/mL，敏感度低。當(dāng)待測(cè)物質(zhì)中沒有被測(cè)的抗原物質(zhì)時(shí)，標(biāo)記膠體金的甲霜靈單克隆抗體就會(huì)與包被在硝酸纖維素膜上的甲霜靈合成免疫原結(jié)合，形成 AgAbAu復(fù)合物，此時(shí)檢測(cè)線處可看到一條明顯色帶（ T線），因此當(dāng)檢測(cè)試紙上可看到兩條線（ C線和 T線）時(shí)，結(jié)果為陰性，說明被檢測(cè)的樣品中農(nóng)藥甲霜靈未超標(biāo)。? 原理? 膠體金檢測(cè)試紙條的制作工藝流程? 半成品調(diào)試? 半成品鑒定? 小結(jié)? 在硝酸纖維素膜上的檢測(cè)區(qū)包被甲霜靈合成免疫原，對(duì)照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。小結(jié)? 經(jīng)過電鏡結(jié)果分析（同甲萘威）， 我們可以得出：膠體金顆粒直徑在 20～ 30nm之間時(shí)，顆粒大小均勻、無聚合與沉淀現(xiàn)象，且靈敏度高，為最佳狀態(tài)。 小結(jié)（ 2）多克隆抗體制備? 基本制備過程? 多克隆抗體活性鑒定? 小結(jié)過程：動(dòng)物免疫多克隆抗體純化多抗活性鑒定500μg1000μggg gggggg1000μg 500μg125μg 250μg 125μg250μg從左圖可以看出，此羊抗屬 IgG抗體稀釋濃度在晰可見沉淀線，判定此抗體活性合格。 ） 10 9 %10 910 9N2B1 4E6C10抗體親和力表 ? 用甲霜靈抗原包被直接篩選，結(jié)果顯示： N2B1 4E6C10能識(shí)別甲霜靈抗原決定簇；經(jīng) Protein A柱直接純化，亞類為 IgG1的這株抗體純度達(dá)到95%以上；抗體親和力常數(shù)（ 177。 ? ④ 抗體親和力的鑒定 單抗測(cè)得三個(gè) Kaff值（ M1）Kaff值 （ M1）均值 177。 ? ② 間接 ELISA法檢測(cè)抗體活性 從左圖可以看出，當(dāng)抗原濃度為，OD450是 ，大于 ，因此活性合格。結(jié)果表明：我們成功獲得了能識(shí)別甲霜靈抗原決定簇的雜交瘤細(xì)胞株： N2B1 4E6C10。 ?
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