基因工程及其應(yīng)用-文庫吧資料
2025-01-11 17:38本頁面
【正文】 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 DNA連接酶的作用原理 返回 38 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 質(zhì) 粒 返回 39 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 目的基因與質(zhì)粒的連接 返回 40 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 ? 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲，如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達。 無表達產(chǎn)物 無表達產(chǎn)物 有表達產(chǎn)物 無表達產(chǎn)物 33 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 目的基因的檢測和表達（二） ?多細胞生物的檢測，將每個受體細胞單獨培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個體，檢測這些個體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。 細菌的檢測，將每個受體細胞單獨培養(yǎng)形成菌落，檢測菌落中是否有目的基因的表達產(chǎn)物。 將目的基因?qū)胧荏w細胞 將受體細胞進行擴增 32 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 目的基因的檢測和表達（一） 前三步的處理十分繁鎖，為保證目的基因得到有效利用，通常用大量的受體細胞來接受不多的目的基因。通常還要對一些受體細胞進行增大通透性的處理。 提取質(zhì)粒并用限制酶切割 用連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接 31 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 將目的基因?qū)胧荏w細胞并擴增 ?基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌和動植物細胞等。用游離脫氧核苷酸直接合成相應(yīng)的基因。 用限制酶切成許多片斷 29 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 提取目的基因的方法（二） ? 人工基因合成法 1. 逆轉(zhuǎn)錄法：以信使 RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下將脫氧核苷酸合成合成 DNA(基因 )。 該法最大的缺點是帶有很大的盲目性，工作量大，成功率低。 28 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 提取目的基因的方法（一） ? 直接分離基因 —— 鳥槍法 將供體生物的 DNA用限制酶切割為許多片段，再用運載體將這些片段都運載到受體生物的不同細胞中去。 問題 要想將某個特定基因與質(zhì)粒相連，需要幾種限制性內(nèi)切酶和幾種 DNA連接酶處理？ 26 基因工程的基本內(nèi)容 中央電教館資源中心 基因操作的基本步驟 1. 提取目的基因 2. 目的基因與運載體結(jié)合 3. 將目的基因?qū)胧荏w細胞 4. 目的基因的檢測和表達
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