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雙水相萃取詳細資料-文庫吧資料

2025-01-03 21:43本頁面
  

【正文】 2~20之間,多數場合大于 3;很多雜蛋白也能同時除去。n 溫度影響相圖,特別在臨界點附近,因而也影響分配系數,n 溫度越高發(fā)生相分離所需的高聚物濃度越高 工業(yè)方面 小分子分離和純化 技術的新發(fā)展雙水相萃取系統(tǒng)的優(yōu)點? 直接從 cell碎片勻漿中萃取 prot、而無需將細胞碎片分離? 雙水 相 系統(tǒng)平衡時間短,含水量高,界面張力低,成相聚合物對蛋白質有穩(wěn)定作用,為生物活性物質提供了溫和的分離環(huán)境? 操作簡便,經濟省時,易于放大 .由于很容易達到平衡,用商業(yè)上的離心機能使相分離完全,分配系數的值重演性很好,故可直接放大? 改變體系的 pH和電解質濃度可進行反萃取應用范圍 :胞內酶的提?。p水相系統(tǒng)可用于除去細胞破碎后的勻漿液中的碎片以及酶的進一步精制)運用雙水相法萃取需滿足的條件 :;,使在一定的相體積比時,經過一次萃取就能得到較高的收率;。(二) pH值會影響磷酸鹽的解離程度,改變 H2PO4和 HPO42之間的比例,而影響分配系數。結論:加入適當的鹽類,會大大促進帶相反電荷的生物大分子的分離。當加入 NaCl時,其濃度低于 50mmol/L時可見上相電位低于下相電位,使溶菌酶分配在上相,從而分配系數增大。 n 鹽的正負離子在兩相間的分配系數不同,由于各相應保持電中性,因而在兩相中形成電位差,這對 帶電生物大分子 的分配,產生很大的影響。)就會偏離臨界點的值( =1),即大于 1或小于 1。u那么,分子量降低時,蛋白質就易分配于富含 PEG的相了n 當接近臨界點時, 上相和下相的組成相同 蛋白質均勻的分配于兩相中,分配系數接近于 1。n 例如: PEG/DX系統(tǒng)中當 PEG的分子量降低時,會使蛋白質易分配于富含該 PEG的相中,使分配系數增大,而葡聚糖的分子量減小,會使分配系數降低,這是一條普遍規(guī)律u這是因為成相聚合物的疏水性對酶等親水性物質的分配產生較大的影響。n 當物質進入雙水體系后,由于表面性質 /電荷作用和各種力(如憎水鍵 /氫鍵和離子鍵)的存在和環(huán)境的影響,物質在上相和下相間進行選擇性
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