【正文】 治療疾病種類的分類 ? 根據(jù)治療性疫苗主要針對的疾病的種類可將其分為 5種類型。 ? 通常所用的修飾分子有細胞因子如 IL IL1IFNγ、 GMCSF等，有協(xié)同刺激分子如 B7B7 CD CD2 CD3等，有趨化因子如RANTES、 IP10及 MHC分子等。 治療性疫苗的種類 基于組成成分及性質的分類 ? 新型治療性疫苗在形式上呈多樣組合，但在組成成分及性質上，可分為蛋白質、基因和細胞等 3種類型。 ? 為增強免疫效果，治療性疫苗經(jīng)常聯(lián)合應用形式多樣的新型免疫技術和手段，并輔以細胞因子、共刺激分子、趨化因子等分子佐劑，輔助手段因疾病種類、人群、病程、病因不同而不一。 ? 它主要應用于發(fā)生慢性感染、腫瘤、自身免疫病、移植排斥、超敏反應等患者，發(fā)揮治療疾病的功能，有時兼具預防功能。 ? 1999年至 2022年前后，治療性疫苗或其相關研究成果及其文章如雨后春筍般涌現(xiàn) ? 在最近三四年間，治療性疫苗的研制工作在多種重點疾病領域廣泛開展起來，尤其在 AIDS、慢性乙肝、腫瘤、自身免疫病、移植排斥等疾病治療上已獲得可喜的或相當有啟示性的結果，進一步激勵了大量的后續(xù)研究工作。美國 Scripps的 Chisari小組在 1995年所發(fā)表的文章中即提出了 therapeutic vaccine。 ? 另一項小鼠研究中 ,僅在陰道或直腸局部免疫 HIV重組 ? Sindbis病毒后方可觀察到抵抗 HIV重組 Sindbis病毒攻擊的保護作用 ,而肌肉注射或經(jīng)遠端黏膜部位(如鼻腔 )接種相同疫苗載體則不能為小鼠提供抵抗陰道攻擊的保護作用。 2. 檢測雛雞 l— 5日齡期間，局部免疫器官包括眼結膜和哈氏淚腺內，缺乏免疫活性細胞和黏膜抗體，而當 1日齡接受疫苗免疫后，該部位的免疫活性細胞開始增多，說明早期免疫對免疫器官的活化至關重要。 ? 粘膜上皮細胞產生的分泌體 (secertory ponent， SC)很快以二硫鍵共價連接成 sIgA并分泌到粘膜的表面 ,能延緩小腸中蛋白酶對 sIgA的降解作用，卻不影響它與抗原的親和力。 人用黏膜疫苗 ? 脊髓灰質炎疫苗 ? 滅活霍亂全細胞 B亞單位疫苗和減毒滅活苗 ? 減毒傷寒疫苗 ? BCG活疫苗 ? 腺病毒疫苗 ? AIDS疫苗 ? IgA抗體介導的粘膜免疫保護效果 ? 抗原的攝取、加工、處理和呈遞，并激活抗原特異性的淋巴細胞，然后通過局部的淋巴結，進入全身性循環(huán)，再回到粘膜組織產生第二階段的免疫效應。 ? 粘膜免疫也能產生很高的血清抗體效價，甚至能誘導細胞毒 T淋巴細胞的活性。 黏膜免疫的優(yōu)點 ? 口服疫苗可在粘膜局部產生特異的抗體反應，來有效地阻止病原微生物的入侵甚至將其殺滅和清除出體外。s patches， PP)及闌尾等。 香蕉具有其他植物無可比擬的 3大優(yōu)點： ① 香蕉泥已經(jīng)是能被廣泛接受的嬰幼兒食品 ②香蕉是蛋白質含量最高的水果之一 ③香蕉有厚實的外皮，保存和運輸都十分方便。 展望 ? 雖然植物疫苗離臨床應用還為時尚遠，但這一領域充滿了希望，吸引著廣大科學研究者。 轉基因植物疫苗的穩(wěn)定性 ? 植物細胞壁的天然生物膠囊作用雖然能使植物疫苗避免在消化道中過早降解，但如果它久久不能釋放也顯然是致命的缺點。 ? 其中共轉化較容易操作，其基本原理是將一個具有抗生素標記的質粒和另一個僅含目的基因質粒同時導人同一農桿菌。 ? 有關在轉基因植物的子代去除抗生素基因的策略已有不少。 無抗生素抗性的轉基因植物 ? 在轉基因植物的再生過程中抗生素作為篩選標記被廣泛應用。 ③編碼甘氨酸的 GGG在單子葉植物基因組中非常少見，因此將插入基因中的這一編碼改為 GGA是一種更適合在植物中表達的方法。對馬鈴薯來說， patadin啟動子更為適合。 ②選擇特異的啟動子。 ? Carrillo等報道了他們用編碼家畜口蹄疫病毒結構蛋白 VP1的基因轉入到植物擬南芥中，然后用轉基因植物的葉子提取液來免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)產生的特異性抗體能保護小鼠抵抗口蹄疫病毒的侵襲。 ? Mason等人于 1995年根據(jù)這個原理將 LTB的編碼基因轉入煙草及馬鈴薯，研制成功轉基因植物疫苗 結核轉基因植物疫苗 ? 卡介苗 ? 結核 DNA疫苗已在小鼠實驗中獲得了可喜的免疫保護效果 ? 口服能表達結核桿菌蛋白質抗原的植物，有可能在肺部產生特異 IgA抗體等粘膜免疫反應 ? 把結核桿菌分泌性蛋白質 MPT64和 ESTA6基因導人煙草、黃瓜、番茄和胡蘿卜的研究正在進行之中，其中 MPT64蛋白質的基因已經(jīng)在番茄中獲得了成功的表達。 ? 他們還用植物病毒為載體得到狂犬病植物疫苗，并且在被免疫的小鼠血清中測到了中和抗體。 ? 用轉基因馬鈴薯去喂小鼠，在小鼠血清中測到了抗諾瓦克病毒的 IgG和 IgA抗體。對這種植物源性的蛋白質結構進行分析發(fā)現(xiàn)，它不但保留了抗原決定簇，而且能更加耐受蛋白酶的分解。 ? Mason等人用煙草來表達諾瓦克病毒衣殼蛋白取得成功。 ? 雖然煙草源性的乙肝表面抗原產生抗體比較慢，而且滴度略低于現(xiàn)有的疫苗，但煙草提取液只含 3％的蛋白質，而酵母源性的疫苗卻是純化的蛋白質制劑。這些抗體能識別人血清中的乙肝表面抗原。 非直接口服的轉基因植物疫苗 乙型肝炎表面抗原疫苗 ? 目前市場上用的疫苗是用酵母細胞系統(tǒng)生產的 DNA重組乙肝病毒表面抗原疫苗 ? 將乙肝表面抗原基因轉入煙草的基因組 ,結果發(fā)現(xiàn)煙草成功表達了乙肝表面抗原。但是豆類種子中含有凝集素類物質，因而不能生食。 ? 每個香蕉可以表達 1～ 10mg左右的外源基因蛋白質，大約 100～ 500μg的蛋白質抗原就足以刺激人體產生特異的免疫反應，因而一個轉基因的香蕉疫苗就能給 10個嬰幼兒進行口服免疫接種。 ? 致命的缺點 :即馬鈴薯塊莖蛋白質的含量較低，而且人類無生食馬鈴薯的習慣。 ? 組織培養(yǎng)快速繁殖系統(tǒng)業(yè)已成熟，可以供應大量遺傳背景一致的種苗。 ? 雖然煙草含有尼古丁等有害物質，但其蛋白質含量豐富，可通過純化技術獲得蛋白質，所以較適合于如乙型肝炎等轉基因植物疫苗的生產及應用研究。 (6)安全性 植物疫苗在本質上是人類的食品，因此安全可靠，無毒性和副作用，也無潛在的致病和致癌的危險性。 轉基因植物疫苗的優(yōu)越性 (5)接種簡便 植物疫苗的接種途徑主要是口服，無需注射。轉基因植物的種子可用以再生產和技術轉讓。植物種植是最經(jīng)濟的蛋白質生產系統(tǒng)。粘膜免疫的產生對某些傳染病，尤其是通過粘膜傳播的傳染病的預防是非常有效的。 轉基因植物疫苗的優(yōu)越性 (3)誘導粘膜免疫反應 口服植物疫苗能誘導機體產生粘膜分泌性 IgA。 轉基因植物疫苗的優(yōu)越性 (1)植物細胞的全能性 植物的組織或原生質體在適當?shù)臈l件下經(jīng)培養(yǎng)能得到一株完整的可育的植物體。新型疫苗 一、轉基因植物疫苗 疫苗的研究和開發(fā)歷程 ? 以全細胞疫苗為標志的第一次疫苗革命 ? 以乙型肝炎基因工程疫苗為典型代表的第二