【正文】 ②應(yīng)用： 確定平面的 結(jié)構(gòu)骨架 ，立體結(jié)構(gòu)的構(gòu)型、 構(gòu)象。 測(cè) IR (考察是否重疊） 2. 無標(biāo)準(zhǔn)品 : 與文獻(xiàn)值對(duì)照 (相同的溶劑條件下： mp, IR, UV, 1HNMR, 13CNMR等 )。 常用溶劑有 甲醇、氯仿 甲醇 等。 C O O H C l R N + ( C H3 ) 3 C l + R 39。 離解程度不同 進(jìn)行分離 — 離子交換法 : 陽離子交換樹脂： 第四節(jié) 提取分離方法 R S O 3 H + + B H + R S O 3 B H + O H R S O 3 H + + BR N + ( C H 3 ) 3 C l + R 39。 第四節(jié) 提取分離方法 大孔吸附樹脂 ④洗脫劑 : H2O 及不同比例的含水醇。 中極性 ：含脂基的吸附樹脂 。除鞣質(zhì) . OH OO H OO HO HO H第四節(jié) 提取分離方法 練習(xí) : 某植物中分得 3個(gè)黃酮化合物，結(jié)構(gòu)如下 , 比較它們的極性大小及在硅膠 TLC和聚酰胺薄膜上 Rf值大小順序 . A: R1 =R2= H B: R1 = H, R2= Rha C: R1 = Glc, R2= Rha 極性大小 : SiO2TLC Rf: Polyamide TLC, Rf: OR 2 OO H OO HO R 1第四節(jié) 提取分離方法 極性大小 : C B A SiO2TLC Rf: A B C Polyamide TLC, Rf: C B A 答案： 大孔吸附樹脂 (macroreticular resin) ① 組成 : 苯乙烯，二乙烯苯和致孔劑 ②分離原理 :吸附 (范德華力和氫鍵 )和 分子篩 作用 (多孔性結(jié)構(gòu) ) ③樹脂類型 :非極性、中極性和極性三種。 第四節(jié) 提取分離方法 苷 , 單糖苷 雙糖苷 叁糖苷 ,吸附力越強(qiáng) 。 第四節(jié) 提取分離方法 聚酰胺 ①吸附力與結(jié)構(gòu)的關(guān)系 , 吸附力越強(qiáng) 。 分離原理 ：主要通過 酰胺鍵與酚羥基、酸、醌等形成氫鍵 ，產(chǎn)生 吸附 作用。O C H3O R OO答案 ： 1. 極性大 ?。狐S夾苷 A＞黃夾苷 B ＞次苷 D＞次苷 C＞次苷 A＞次苷 B 2. 硅膠柱上的出柱順序：后 先 小極性化合物 大極性化合物 活性炭 —— 非極性吸附劑 ①吸附力與結(jié)構(gòu)的關(guān)系 ? 分子量大者 分子量小者 ? 芳香族 脂肪族 ? 含 OH, COOH, NH2多者 少者 ②洗脫力與溶劑的關(guān)系 吡啶 15%酚 /醇 7%酚 /H2O 醇 含水醇 H2O ③ 應(yīng)用 : 黃酮、生物堿的富集，糖的分離、脫色等。 ROR 39。R RCHO RCOR 39。, RNR 39。 第四節(jié) 提取分離方法 硅膠、氧化鋁： ①被分離物質(zhì)吸附力與結(jié)構(gòu)的關(guān)系 被分離物質(zhì)極性大，吸附力強(qiáng)， Rf值小，洗脫難， 后被洗脫下來。 第四節(jié) 提取分離方法 ? 吸附原理：相似相吸 ? 影響吸附過程的三要素： – 吸附劑（固定相）， – 溶質(zhì)（被分離物質(zhì)）， – 溶劑（洗脫劑，展開劑，流動(dòng)相） 第四節(jié) 提取分離方法 硅膠、氧化鋁： 極性吸附劑：載樣量大，吸 附力強(qiáng) 硅膠：應(yīng)用最廣，適用于各 類成分分離 氧化鋁：有中性、酸性、堿 性氧化鋁。如堿性氧化鋁對(duì)酚酸性成分的 吸附，硅膠對(duì)生物堿的吸附等。 實(shí)驗(yàn)室用高效液相色譜儀 第四節(jié) 提取分離方法 3 根據(jù)物質(zhì)的 吸附性 差別進(jìn)行分離 ——吸附色譜法 吸附分類： 物理吸附：無選擇性的吸附，吸附－解析發(fā)生迅速。親脂性： RP18 RP8 RP2。如 HPLC反相柱，反相板。 ? 洗脫順序：極性小的物質(zhì)先被洗脫出來。 ? 載體：硅膠（含水可達(dá) 17%），硅藻土，纖維素等。 用于各種物質(zhì)的分離，包括蛋白、酶、三萜、生物堿、皂苷等。 缺點(diǎn)：樣品處理量小。 第四節(jié) 提取分離方法 ② 液滴逆流色譜 (DCCC): 一種液 液分配色譜，流動(dòng)相呈液滴形式垂直上升或下降，通過固定相的液柱，實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的逆流色譜分離。 逆流分溶法、液滴逆流色譜、高速逆流色譜 ①逆流分溶法 (CCD)： 多次連續(xù)液 液萃取分離過程。 ? 紙色譜（ PC）也叫紙分配色譜（ PPC， Paper Partition Chromatography）。 β≤2， 100次以上萃取 ， DCCC法 。 工業(yè)生產(chǎn)用微波提取罐 第四節(jié) 提取分離方法 二 分離方法 1. 根據(jù) 溶解度 差別進(jìn)行分離 結(jié)晶法 （純化時(shí)常用） 條件：合適的溶劑；濃度；溫度 沉淀法： a 溶劑沉淀法：改變極性，如水提醇沉法 b 酸堿沉淀法：改變 pH，處理酸、堿、兩性成分； c 沉淀試劑：如鉛鹽沉淀法，酸性、酚性成分加中性PbAc2， 形成沉淀。介質(zhì)中不同組分的介電常數(shù)、比熱、含水量不同，吸收微波能的程度不同，由此產(chǎn)生的熱量和傳遞給周圍環(huán)境的熱量也不相同 微波提取法的特點(diǎn)和裝置 ? 優(yōu)點(diǎn) 具有穿透力強(qiáng) 、選擇性高 、 加熱效率高 、 試劑用量少等顯著特點(diǎn) ， 而且其操作簡便 、 快速 、 節(jié)能 、高效 。 ?微波 ：指頻率在 300 MHz 和 300 kMHz 之間的電磁波。高能量的超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)大壓力造成植物細(xì)胞壁及生物體破裂，導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解。 中小型SFE裝置圖 第四節(jié) 提取分離方法 （ ultrasonic wave extraction) ?超聲波提取技術(shù)：是利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈的空 化效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)、高的加速度、乳化、擴(kuò)散、擊碎和攪拌作用，增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，從而加速藥物有效成分進(jìn)入溶劑，促進(jìn)提取的進(jìn)行。 ? 如從煙草中提取尼古丁，從咖啡中提取咖啡因。 20世紀(jì) 90年代用于天然藥化的研究。 藥材 +水 冷凝 揮發(fā)油測(cè)定 第四節(jié) 提取分離方法 （ sublimation ） 用于具有升華性的成分提取，如某些小分子香豆素，蒽醌，樟腦等。 常用提取溶劑 乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、石油醚 親水性有機(jī)溶劑 甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇 親脂性有機(jī)溶劑 水 大 小 小 極 性 第四節(jié) 提取分離方法 滲漉法裝置圖 1)冷提： 適用于受熱不穩(wěn)定的成分。 （ Amino Acid Pathway） 合成生物堿 (1)醋酸 丙二酸 莽草酸途徑 (2) 醋酸 丙二酸 甲戊二羥酸途徑 (3) 氨基酸 甲戊二羥酸途徑 (4) 氨基酸 醋酸 丙二酸途徑 (5) 氨基酸 莽草酸途徑 三、生物合成的意義： 對(duì)天然化合物結(jié)構(gòu)分類，結(jié)構(gòu)推測(cè)；植物化學(xué)分類 學(xué)；仿生合成及組織培養(yǎng)等有指導(dǎo)意義。 由一次代謝產(chǎn)物產(chǎn)生 ， 常為有效成分 。 (5)無機(jī)成分 本章內(nèi)容 ? 第一節(jié) 概述 ? 第二節(jié) 各類成分簡介 ? 第三節(jié) 生物合成 ? 第四節(jié) 提取分離方法 ? 第五節(jié) 結(jié)構(gòu)研究方法 一 基本概念