【正文】 樣點 1 0 0 0 合格取樣點 2 0 1 0 合格（B）級設(shè)備取樣點 3 0 0 0≤5合格取樣點 1 1 0 1 合格取樣點 2 1 1 0 合格(C)級墻面取樣點 3 0 1 1≤25合格取樣點 1 1 0 1 合格取樣點 2 0 14 14 合格(C)級地面取樣點 3 0 14 14≤25合格取樣點 1 1 0 0 合格取樣點 2 1 1 0 合格(C)級設(shè)備取樣點 3 0 2 3≤25合格取樣點 1 3 3 3 合格取樣點 2 0 1 0 合格(D)級墻面取樣點 3 0 0 0≤50合格取樣點 1 0 0 0 合格取樣點 2 0 1 0 合格(D)級地面取樣點 3 0 0 0≤50合格取樣點 1 0 0 0 合格取樣點 2 1 0 0 合格(D)級清洗取樣點 3 0 0 0≤50合格由于第二次、第三次試驗結(jié)果相同，均合格，故此處略去表格。消毒后，使用Rodac碟進行取樣（對于消毒后的不同時間的采樣，應(yīng)于首次采樣的部位比較接近）培養(yǎng)：所有試驗樣本均在3035℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)三天觀察最終結(jié)果。（9）試驗的記錄表514 消毒劑對物體表面模擬現(xiàn)場鑒定試驗第一次試驗記錄驗證菌種 C0(cfu/片) N0 CX(cfu/片) NX KL(N0NX) 可接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 105 1 12 ≥合格大腸埃希菌 105 2 0 0 ≥合格表515 消毒劑對物體表面模擬現(xiàn)場鑒定試驗第二次試驗記錄驗證菌種 C0(cfu/片) N0 CX(cfu/片) NX KL(N0NX) 可接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 105 1 1 0 ≥合格大腸埃希菌 105 8 45 ≥合格表516 消毒劑對物體表面模擬現(xiàn)場鑒定試驗第三次試驗記錄驗證菌種 C0(cfu/片) N0 CX (cfu/片) NX KL(N0NX) 可接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 105 1 0 0 ≥合格大腸埃希菌 105 8 33 ≥合格（10）試驗結(jié)論%優(yōu)潔消毒劑三次物體表面模擬現(xiàn)場鑒定試驗（）均符合標準，故判定合格。消毒劑消毒效果的驗證 13培養(yǎng)：所有試驗樣本均在3035℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)48h觀察最終結(jié)果。采樣后以無菌操作方式將棉簽剪入原中和劑中，電動混勻器上混勻20s，按活菌培養(yǎng)計數(shù)法測定存活菌數(shù)，每管接種2個平皿，作為陽性對照組，必要時進行稀釋。采樣后以無菌操作方式將棉簽剪入原中和劑試管中，電動混勻器上混勻20s，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管接種2個平皿，作為試驗組，必要時進行稀釋。（1）試驗所需要用的試劑中和劑：（%）活菌計數(shù)用培養(yǎng)基：TSA培養(yǎng)基消毒劑配制用水：純化水（2）試驗所需要用的儀器刻度吸管、移液器、電動混勻器、計時器、培養(yǎng)箱、規(guī)格板（用不銹鋼材料制備，中） 、無菌棉簽、無菌接種環(huán)（3）試驗所需要用的菌種本次試驗主要是驗證該消毒劑對物體表面微生物的消毒效果，故選擇金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌作為試驗菌（4）試驗所需要用的消毒液的濃度及作用時間%的優(yōu)潔消毒液作用30s（5）試驗所需要用到的場所微生物實驗室陽性間（6）試驗的操作步驟（%的消毒劑對金黃色葡萄球菌作用30s為例）菌懸液：濃度為510 5cfu/ml5106cfu/ml試驗組：取大小合適的無菌呼吸袋作為試驗樣本，將無菌規(guī)格板按壓在樣本上，用無菌棉簽沾以菌懸液均勻涂抹被試驗表面的6區(qū)塊（各區(qū)塊25cm 2） 。消毒劑消毒效果的驗證 12 消毒劑對物體表面消毒效果驗證 車間用于該消毒劑消毒的物體表面主要有不銹鋼設(shè)備表面、地面、墻面以及呼吸袋，經(jīng)過小試，將高濃度菌液（10 4cfu/ml）涂抹于不銹鋼設(shè)備表面、地面、墻面及呼吸袋，選擇回收率較高的載體作為物體表面消毒效果試驗室部分的試驗載體。15min取樣后無需重新消毒）（6）試驗的判斷標準在消毒劑作用不同時間后的菌落數(shù)的合格標準見下表511，每個時間段的6份樣品必須全部符合標準，才可判斷合格，本次試驗應(yīng)重復(fù)進行三次，用來判斷該方法是否穩(wěn)定。各自按照標準洗手操作規(guī)程進行洗手，將手烘干。（9）試驗的記錄表58 無菌手套載體噴霧定量殺菌試驗第一次試驗記錄驗證菌種 C0(cfu/片) N0 CX(cfu/片) NX KL(N0NX) 接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 105 0 0 ≥ 合格大腸埃希菌 106 22 ≥ 合格白色念珠菌 104 0 0 ≥ 合格表59 無菌手套載體噴霧定量殺菌試驗第二次試驗記錄驗證菌種 C0 (cfu/片) N0 CX(cfu/片) NX KL(N0NX) 接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 105 0 0 ≥ 合格大腸埃希菌 106 11 ≥ 合格白色念珠菌 104 0 0 ≥ 合格消毒劑消毒效果的驗證 11表510 無菌手套載體噴霧定量殺菌試驗第三次試驗記錄驗證菌種 C0(cfu/片) N0 CX(cfu/片) NX KL(N0NX) 接受標準 結(jié)果判斷金黃色葡萄球菌 104 0 0 ≥ 合格大腸埃希菌 105 12 ≥ 合格白色念珠菌 104 0 0 ≥ 合格（10）試驗的結(jié)論%優(yōu)潔消毒劑，三次對無菌手套載體噴霧定量殺菌試驗均符合標準，判定手套載體噴霧定量殺菌試驗合格。培養(yǎng)：所有細菌試驗用樣本均在3035℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)至48h，觀察最終結(jié)果；真菌試驗用樣本在2328℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)至72h，觀察最終結(jié)果。將試管用電動混勻器混合20s。噴霧量以不使樣本濕透、流液為度，計時。陰性對照組：取無菌剪刀從同批無菌手套上剪取三個手指樣品，大小為10mm10mm均勻排布于一塊未沾有任何消毒劑的無菌平皿內(nèi)用。將試管用電動混勻器混合20s，理鹽水溶液中。噴霧量以不使樣本濕透、流液為度，計時。陽性對照組：取無菌剪刀從無菌手套上剪取3個大小為10mm10mm的手指樣品，均勻排布于一塊未沾有任何消毒劑的無菌平皿內(nèi)，用制備好的符合菌液濃度的金黃色葡萄球菌滴加進去，必要時用涂布棒涂布均勻。將試管用電動混勻器混合20s，使菌片。噴霧量以不使樣本濕透、流液為度，計時。（4）試驗所需要用的消毒液的濃度及作用時間%（5）試驗所需要用到的場所微生物實驗室陽性間（6）試驗的操作步驟①菌懸液：濃度為110 8cfu/ml5108cfu/ml②消毒液：%的消毒液500ml③稀釋液：磷酸鹽緩沖液（）試驗組:取無菌剪刀從無菌手套上剪取三個手指樣品，大小為10mm10mm以三角形陣列，均勻排布于一塊未沾有任何消毒劑的無菌平皿內(nèi)，逐片滴加10d的金黃色葡萄球菌，必要時用無菌接種環(huán)涂布均勻。 試驗記錄表55 對裸手消毒效果試驗第一次試驗記錄培養(yǎng)時間（cfu/皿）試驗人員第一天 第二天 第三天可接受標準（cfu/皿） 結(jié)果判斷8001 0 2 9 ≤5 不合格8002 0 39 39 ≤5 不合格8003 0 1 3 ≤5 合格8004 0 40 40 ≤5 不合格8005 0 16 14 ≤5 不合格8006 0 2 4 ≤5 合格QA 左手 0 0 0 0 合格QA 右手 0 0 0 0 合格表56 對裸手消毒效果試驗第二次試驗記錄培養(yǎng)時間（cfu/皿）試驗人員第一天 第二天 第三天可接受標準（cfu/皿） 結(jié)果判斷8001 0 33 31 ≤5 不合格8002 0 8 6 ≤5 不合格8003 0 100 105 ≤5 不合格8004 0 55 51 ≤5 不合格8005 0 33 36 ≤5 不合格8006 0 4 3 ≤5 合格QA