【正文】 檸檬酸緩沖液(ml)DNS試劑吸取量(ml)濃度（μg/ml）吸取量（ml）00120024003600480051000 61200　 樣品的測定　 待測酶液的制備固體酶：根據(jù)樣品酶活大小，稱取2g－10g固體酶樣，加入40－200ml蒸餾水，溶解后置40oC水浴浸提30min，用濾紙過濾，再根據(jù)樣品酶活性大小，二次稀釋至適宜濃度（，下同）。線性回歸系數(shù)（r）（否則須重做）。用10mm比色杯，以空白管（0號管）調儀器零點，在分光光度計波長550nm處測吸光度?！?測定步驟　 標準曲線的制作，分別吸取標準木糖使用溶液、緩沖液和DNS試劑于各管中（每管號平平行3個樣），混勻?！?分析天平　?！?分光光度計　 酸度計　精度177?！?儀器和設備 　除普通實驗室儀器外，還應有：　 恒溫水浴鍋(40177。2）℃ g，用蒸餾水溶解后定容至100 ml，即為1%濃度的木糖標準溶液?！?:注：在黑色或棕色瓶中于室溫下貯存，該試劑最多穩(wěn)定6個月?！?3,5－二硝基水楊酸（DNS）試劑: 取酒石酸鉀鈉182g，溶于500ml蒸餾水中，加熱。. 使用溶液：取甲液515ml，加乙液485ml混合均勻，用pH計校正至pH為（ 177?！?磷酸氫二鈉檸檬酸緩沖液: 甲液：稱取磷酸氫二鈉（ ） g, 用蒸餾水溶解，并定容至1000ml?！?1%（W/V）木聚糖底物 精確稱取燕麥木聚糖(xylan from Oat spelts, 美國Sigma公司) g，溶于80ml蒸餾水中，水浴加熱至溶解，冷卻后轉入100 ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度。）℃、pH ，在1min內水解木聚糖底物，產(chǎn)生相當于1微克木糖的還原糖的酶量，為1個酶活單位，以u/g(u/ml)表示。以此代表木聚糖酶的總酶活力。在堿性、煮沸條件下，能將3,5二硝基水楊酸中硝基還原成橙黃色的氨基化合物，其顏色的深淺與還原糖（以木糖計）含量成正比。 　　　 　 精密度同一試樣兩次測試結果的絕對差值，不得超過算術平均值的10%。通過查標準曲線或用線性回歸方程求出生成的酪氨酸的含量。）oC水浴中放置20min，取出，迅速冷卻至室溫。――三支試管中反應液用濾紙（Whatman1號濾紙或新華1號濾紙）過濾。將三支試管繼續(xù)置（40177。―― 1%酪素溶液，準確計時，反應10min，取出。――將三支試管放入（40177?！?測定程序――取三支15150mm試管（一支空白管，二支樣品管）?！±野彼針藴是€管　　號標準酪氨酸使用溶液碳酸鈉溶液(ml)稀Folin試劑(ml)濃度（μg/ml）吸取量（ml）00110220330440550 660 　 樣品的測定　 待測酶液的制備固體酶：根據(jù)樣品酶活大小，稱取2g－10g固體酶樣，加入40－200ml蒸餾水，溶解后置40oC水浴浸提30min，用濾紙過濾，再根據(jù)樣品酶活性大小，二次稀釋至適宜濃度（，下同）。線性回歸系數(shù)（r）（否則須重做）。以酪氨酸量為橫座標，以吸光度為縱座標，繪制標準曲線，獲得線性回歸方程。　 測定步驟　 標準曲線繪制，分別吸取標準酪氨酸標準使用溶液、（每管號平行作3個樣），混勻?！?分析天平　。　 分光光度計　 酸度計　精度177。　 儀器和設備 　除普通實驗室儀器外，還應有：　 恒溫水浴鍋(40177。此溶液在4oC冰箱貯存，有效期為3天?！?%酪素溶液，先用少量（3ml4ml）濃乳酸濕潤后，（ mol/L氫氧化鈉溶液），再加入相應pH緩沖液約80ml,在沸水浴中邊加熱邊攪拌直至完全溶解。. 使用溶液：取甲液610ml，加乙液390ml混合均勻，用pH計校正至pH為（ 177?！?磷酸緩沖液（pH=）,適用于中性蛋白酶 甲液：稱取磷酸氫二鈉（ ） g, 用蒸餾水溶解，并定容至1000ml。乙液：稱取70%乳酸鈉16 g，加水稀釋并定容至1000ml。使用時，以1份原Folin試劑與2份蒸餾水混勻，制成稀Folin試劑。混勻、過濾?！?福林（Folin）試劑于2000ml磨口回流裝置中加入鎢酸鈉()100g、鉬酸鈉()25g、蒸餾水700ml、85%磷酸50ml、濃鹽酸100ml。分別吸取100μg/ml L酪氨酸標準液 0ml、 ml于10ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，制成每ml分別含L酪氨酸0μg、10μg、20μg、30μg、40μg、50μg、60 μg的標準使用溶液?！?1mg/ml L酪氨酸標準貯備溶液精確稱取預先于105 ，用20ml 左右1mol/L鹽酸l溶解后，再用蒸餾水定容至100ml，即為1mg/ml酪氨酸標準溶液?！?試劑和溶液 除非另有規(guī)定外，試驗中所用試劑均為分析純，所用水為蒸餾水或去離子水?！?酶活單位定義在（40177。附　錄　A（規(guī)范性附錄）蛋白酶活力的測定方法　 原理蛋白酶在一定的溫度和pH條件下，水解酪素底物產(chǎn)生含有酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸），在堿性條件下，將福林試劑（Folin）還原，生成鉬藍與鎢藍，其顏色的深淺與酚基氨基酸含量成正比?！?保質期產(chǎn)品原包裝需注明保質期。貯存?zhèn)}庫需保持清潔、陰涼、干燥、通風，防受熱、受潮。不得與有毒有害及其它污染物品混裝混運。　 運輸產(chǎn)品含有生物活性物質，光線、溫度、濕度易引起失活?！?標簽按GB 10648執(zhí)行。復檢結果仍有指標不合格，則判為不合格產(chǎn)品?！?判定方法對抽取的樣品按型式檢驗項目進行檢驗，如果檢驗結果中有任何一項指標不合格時，應重新取樣進行復檢，但衛(wèi)生指標如有一項不合格時，即判為不合格產(chǎn)品，不得復檢。型式檢驗項目為本標準“5　要求”中各項指標?！?判定結論每批產(chǎn)品應由生產(chǎn)廠質量檢驗部門進行出廠檢驗，只有檢驗合格后方可簽發(fā)合格證出廠。　 出廠檢驗　 出廠檢驗項目　　感官指標、酶活力、水分、粒度、凈重。用清潔適用的取樣工具伸入所取樣品的四分之三深處，用交叉法取出足夠量的樣品，將采得的樣品充分混合均勻按四分法縮分至250g，平分裝入兩個清潔、干燥具有密閉性和避光性的具塞樣品瓶中，貼上標簽，注明生產(chǎn)廠名稱、產(chǎn)品名稱、批號、取樣日期等。7　 　檢驗規(guī)則　 組批的定義生產(chǎn)廠以每一班次生產(chǎn)且經(jīng)包裝的、具有同樣工藝條件、同一產(chǎn)品名稱、批號、規(guī)格和同樣質量證明書的產(chǎn)品為一個組批?！?粒度　　按GB/T 59171986執(zhí)行?！?黃曲霉毒素B1按GB/T 174801998執(zhí)行?！?沙門氏菌按GB/T 130912000執(zhí)行。 　 鉛（Pb）按GB/T 130801991執(zhí)行?！?纖維素CMC酶活力按附錄D測定?！?木聚糖酶活力按附錄B測定。6　 試驗方法　 感官要求取樣品適量，進行感官檢驗，觀察、嗅聞或觸摸。　 水分不大于10%。表2　飼料用復合酶制劑的衛(wèi)生指標砷，mg/kg,（以As 計）≤鉛，mg/kg,（以 Pb計）≤鎘，mg/kg,（以 Cd計）≤沙門氏菌，不得檢出大腸菌群，MPN/100g≤3000黃曲霉毒素B1, mg/kg≤　注： 不得檢出國家明令禁止的藥物和物質。表1　飼料用復合酶制劑的酶活力指標產(chǎn) 品 型 號產(chǎn) 品 成 份 標 簽 值(u/g)通用小麥型復合酶酸性蛋白酶≥1000木聚糖酶≥25000β葡聚糖酶≥5000纖維素酶≥2500 通用玉米型復合酶酸性蛋白酶≥2000 木聚糖酶≥10000β葡聚糖酶≥5000纖維素酶≥1500通用稻谷型復合酶酸性