【正文】
8 9 %,RSD=%。(四)回收率測(cè)定結(jié)果表2 回收率測(cè)定結(jié)果NO 對(duì)照品加入理論濃度 實(shí)測(cè)濃度 回收率(%) 平均回收率(%) (mg(三)穩(wěn)定性考察結(jié)果 在2小時(shí)內(nèi)吸光度值分別為:, ,RSD=%。(二)精密度測(cè)定結(jié)果表1蒽酮硫酸法的精密度測(cè)定結(jié)果(n=5) 次數(shù) 測(cè)得濃度(mg結(jié)果與分析一、香菇多糖的純化(一) Sevage法去蛋白 圖1香菇多糖溶液 圖2 香菇多糖去蛋白效果 (二)雙氧水脫色 圖3 脫色后香菇多糖溶液 二、 蒽酮硫酸法(一)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備用吸收度(A )與濃度(C)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程如下: 圖4 蒽酮硫酸法標(biāo)準(zhǔn)曲線A=(r=),線性范圍:~, mg樣品取出后放入離心管中4000轉(zhuǎn)mL1, mgmL1,根據(jù)吸光度計(jì)算香菇多糖含量,計(jì)算每個(gè)時(shí)間段香菇多糖的累積吸收量和吸收率。樣品取出后放入離心管中4000轉(zhuǎn)放入含有不同濃度香菇多糖小腸緩沖液的小試管中,通入空氣,置于水浴鍋中37℃保溫。(三) 小腸吸收實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)方法[10],選取健康大鼠,禁食24h(自由給水),用烏拉坦麻醉,立即打開腹腔,分離出小腸,放入小腸緩沖液中,用緩沖液沖洗小腸表面,并仔細(xì)清除漿膜層外面的脂肪組織。精密稱取葡萄糖對(duì)照品適量,﹑﹑ mg﹑﹑,﹑﹑,搖勻,沸水浴15min后冷卻至室溫,以空白管調(diào)零,連續(xù)測(cè)定五次吸光度,計(jì)算RSD。,分別置于干燥試管中,搖勻?!”痉椒ǜ鶕?jù)香菇多糖與蒽酮在酸性條件下發(fā)生顯色反應(yīng)的原理進(jìn)行含量測(cè)定。L1)。L1),NaH PO3( gL1),CaCl2(小腸緩沖液組成:NaCl(mL1的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液。min1,離心24min,沉淀進(jìn)行冷凍干燥。脫蛋白后的多糖溶液用4mon(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wister大鼠 250300g (齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院動(dòng)物室)。 材料與方法一、實(shí)驗(yàn)材料(一)儀器、設(shè)備722N可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司);數(shù)顯恒溫水浴鍋HH2(國華電氣有限公司);低速離心機(jī)(上海手術(shù)器械廠);集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司);FA2004N電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(鞏義市英峪予華儀器廠);DT系列電子天平(常熟市意欣儀器儀表有限公司);天孚牌JYT—2架盤藥物天平 (常熟市金羊砝碼儀器有限公司);磁力攪拌機(jī) (北京金紫光科技發(fā)展有限公司);凍干箱 (YAMATO)。本文以香菇多糖為模型藥,采用大鼠外翻腸囊法,分別考察吸收時(shí)間、吸收部位、給藥濃度對(duì)香菇多糖小腸吸收的影響,初步預(yù)測(cè)香菇多糖的小腸吸收特征。多糖因其獨(dú)特的藥理活性和低毒特征,在臨床應(yīng)用中已呈現(xiàn)出極大的潛力,成為中藥研究的一個(gè)新的增長點(diǎn)。研究對(duì)象涉及真菌類、地衣類、植物、動(dòng)物等;研究范圍包括多糖的分離純化,結(jié)構(gòu)分析、理化性質(zhì)、藥理學(xué)及治療應(yīng)用等,對(duì)其免疫增強(qiáng)作用機(jī)理的研究已經(jīng)深入到分子、受體水平,研究方法涉及化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)藥學(xué)等諸多領(lǐng)域。 從中藥制劑中抽取出已經(jīng)肯定藥效作用的中藥成分或部位進(jìn)行胃腸吸收的過程和機(jī)制的研究,有預(yù)見性地針對(duì)吸收性質(zhì)不良的中藥成分或其制劑提出新的口服劑型方案,將對(duì)中藥口服劑型的現(xiàn)代化發(fā)展和走向世界起到重要作用。前 言 中藥胃腸轉(zhuǎn)運(yùn)研究是中藥現(xiàn)代化基本問題之一。而香菇多糖具有抗腫瘤的作用,毒副作用小且安全有效。隨著現(xiàn)代社會(huì)生活節(jié)奏的加快以及人們工作壓力的加大,使得人類免疫系統(tǒng)功能降低,各種疾病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。蒽酮羥甲基糠醛糠醛衍生物(綠色)當(dāng)前研究藥物小腸吸收機(jī)制的方法有多種,主要分為在體法,離體法和細(xì)胞模型法,其中離體法中的外翻腸囊法具有操作簡單,易于實(shí)現(xiàn),受其它身體條件影響少等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛的用于研究藥物小腸吸收行為以及藥物在吸收中的相互作用[4]。色氨酸含量較高的蛋白質(zhì)對(duì)顯色反應(yīng)有一定干擾[2]。.蒽酮硫酸法:糖類遇濃硫酸脫水生成糠醛或其衍生物,可與蒽酮試劑縮合產(chǎn)生顏色物質(zhì),反應(yīng)后溶液呈藍(lán)綠色,于625 nm處有最大吸收,顯色與多糖含量呈線性關(guān)系。苯酚硫酸法:苯酚硫酸試劑可與游離的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起顯色反應(yīng),己糖在490 nm處(戊糖及糖醛酸在480 nm)有最大吸收,吸收值與糖含量呈線性關(guān)系。用水提醇沉法提取香菇多糖,正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳提取工藝為:溫度:85℃,時(shí)間:5h,加水量:15倍水量,除蛋白的最優(yōu)工藝條件:樣液:氯仿正丁醇(體積比)=3,氯仿:正丁醇(體積比)=5[13]。傳統(tǒng)香菇多糖的提取方法有水提醇沉法、稀堿浸提法、稀酸浸提法和酶法等,隨著對(duì)香菇研究的不斷深入,又出現(xiàn)超濾法、微波輔助浸提法以及超聲波法等。近年來,LNT的藥理作用研究取得了很大進(jìn)展。平均分子量約為50萬道爾頓[7]。多糖以甘露糖為主,含少量的葡萄糖、微量的巖藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等,肽鏈由天冬氨酸、組氨酸、絲氨酸、賴氨酸、谷氨酸等18種氨基酸組成。中醫(yī)認(rèn)為,香菇味甘、性平,具有補(bǔ)氣健脾、和胃益腎、滋味助食之功效[9]。它不僅素以色、香、味俱佳而著稱,而且營養(yǎng)豐富,能醫(yī)治多種疾病。涉密論文按學(xué)校規(guī)定處理。作者簽名: 日期: 年 月 日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。In this paper,Rat evered gut sac system of different intestinal section (jejunum,ileum and duodenum)was used for the study on absorption characteristics and the absorption mechanism of :The linearity,the revovery and the accuracy of the metho