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國家標準-羊胚胎移植技術規(guī)程-文庫吧資料

2025-06-12 21:17本頁面
  

【正文】 應關系 胚胎發(fā)育期與受體移植時間的對應關系見附錄E。第二次注射后12 h~72 h觀察發(fā)情。 PG法:第一次注射:任意一天肌注PGO.1 mg/只。 b)受體羊單獨組群、編號,保持環(huán)境相對穩(wěn)定,避免應激反應。c)產羔90 d以上,發(fā)情正常。7受體羊的選擇及飼養(yǎng)管理7 1受體羊的選擇4Nv/T 1571 2007a)繁殖性能良好,發(fā)情周期正常,無繁殖機能疾病,經檢疫無傳染疾病,營養(yǎng)狀況良好。/I.蔗糖)冷凍胚胎的解凍(一步細管法): 裝胚細管空氣浴(18℃~25。b)1.5 moL/I。6.2 3胚胎解凍方法a) lO%甘油冷凍胚胎的解凍:裝胚細管一空氣浴(18℃25℃)10 s一32。/I。6.2.2胚胎解凍所需溶液 保存液:含0.4%牛血清白蛋白或20%血清的PBS液。C/ min的速率下降一一32℃~一35℃一平衡5 min一投入液氮。C)一平衡5 min一植冰一繼續(xù)平衡5 min一以0.3。乙二醇/保存液一平衡15 min~20 min裝管一冷凍儀(一5.5。其中M表示發(fā)育期,1M,左側“大1”表示數(shù)量,右側“小1”表示質量。6 1 3胚胎冷凍保存操作步驟6.1 3.1胚胎裝管及記錄2級胚胎用于冷凍,冷凍前將胚胎在保存液中沖洗4次~6次,然后直接放人冷凍液,并將胚胎裝 入細管。10%甘油冷凍液:用保存液配制。6胚胎的冷凍保存及解凍6.1胚胎的冷凍保存6 1 1胚胎冷凍保存所需儀器、器材 體視顯微鏡、胚胎冷凍儀、吸胚管、細管、細管塞、裝管器、細菌過濾器、培養(yǎng)皿。3級:輪廓不清楚,色澤過暗或過淡,細胞密度小,細胞變性率為30%~40%。細胞 變性率不超過10%,見附錄C。b)子宮胚胎:處于3~7發(fā)育期的胚胎質量鑒定,分為4級。C內鏡檢,將檢出的胚胎放人盛有保存液的035 rnm培養(yǎng)皿中。5.2胚胎發(fā)育期鑒定5 2 1檢胚 盛有沖胚回收液的表面皿放在體視顯微鏡下,在18。即腹膜與肌肉進行縫合;皮膚進行節(jié)結縫合;針角間距1 cm。C的生理鹽水將子宮及卵巢洗干凈。 沖胚完畢后,用25。每側子宮角需40 mI,沖胚液。用中180 mm表面皿接收沖胚液。方法:用188~208針頭在子宮角基部扎一小孔,然后將88~104沖卵管從此孔導入子宮角大彎 處,給沖卵管氣囊,充氣(充氣量2mI。另一側輸卵管操作同上。 方法:用64~84頭皮針從宮管連接部的子宮端導入到輸卵管峽部,將沖卵管從輸卵管喇叭口插入2 cm左右,沖卵管遠端與唾,120 clfiq表面皿相接,事先用10mL注射器抽取5~8mI。j)在骨盆腔,恥骨前沿觸膜子宮角,并將子宮、卵巢引出刀VI外,記錄兩側卵巢黃體和卵泡數(shù)。h)避開血管,用手術刀將手術部位縱向切開3 cm~5 cm長的刀口,將皮下結締組織分離,暴露肌 膜。f) 用70%酒精棉球對手術的部位脫碘、晾干。d)用0.1%的新潔爾滅消毒手術部位。 c)剪去手術部位的毛,剪毛范圍約20 crnX 20 cm。 a)手術前空腹24 h~36 h,適量飲水。5 1 4供體羊手術沖胚步驟 按附錄c做好采胚記錄。,NY/T 1571—20075.1.2沖胚所需藥品 酒精、碘酊、新潔爾滅、0.9Vo生理鹽水、青霉素、全麻藥和解麻藥(山羊麻醉用)等。5羊手術沖胚及胚胎質量鑒定5 1手術沖胚5.1.1沖胚主要器材 手術臺、剃毛刀、創(chuàng)布、止血紗布、剪毛剪、手術刀柄、手術剪、止血鉗、巾帕鉗、持針器、腸鉗(帶乳膠管)、手術刀片、縫合針、鑷子、q5120 mm表面皿、qal80 mm表面皿、64~88頭皮針(尖端磨鈍)、184~204針頭(尖端磨鈍)、中l(wèi)o mm透明硅膠管、10 mI。4.2.3配種的最適時間確認發(fā)情時立即進行第一次輸精,之后每隔12 h輸精1次。 c)稀釋后的精液溫度要保持在25℃左右。采
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