國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-羊胚胎移植技術(shù)規(guī)程-文庫吧資料
2025-06-12 21:17本頁面
【正文】 應(yīng)關(guān)系 胚胎發(fā)育期與受體移植時(shí)間的對(duì)應(yīng)關(guān)系見附錄E。第二次注射后12 h～72 h觀察發(fā)情。 PG法：第一次注射：任意一天肌注PGO．1 mg／只。 b)受體羊單獨(dú)組群、編號(hào)，保持環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定，避免應(yīng)激反應(yīng)。c)產(chǎn)羔90 d以上，發(fā)情正常。7受體羊的選擇及飼養(yǎng)管理7 1受體羊的選擇4Nv／T 1571 2007a)繁殖性能良好，發(fā)情周期正常，無繁殖機(jī)能疾病，經(jīng)檢疫無傳染疾病，營(yíng)養(yǎng)狀況良好。／I．蔗糖)冷凍胚胎的解凍(一步細(xì)管法)： 裝胚細(xì)管空氣浴(18℃～25。b)1．5 moL／I。6．2 3胚胎解凍方法a) lO％甘油冷凍胚胎的解凍：裝胚細(xì)管一空氣浴(18℃25℃)10 s一32。／I。6．2．2胚胎解凍所需溶液 保存液：含0．4％牛血清白蛋白或20％血清的PBS液。C／ min的速率下降一一32℃～一35℃一平衡5 min一投入液氮。C)一平衡5 min一植冰一繼續(xù)平衡5 min一以0．3。乙二醇／保存液一平衡15 min～20 min裝管一冷凍儀(一5．5。其中M表示發(fā)育期，1M，左側(cè)“大1”表示數(shù)量，右側(cè)“小1”表示質(zhì)量。6 1 3胚胎冷凍保存操作步驟6．1 3．1胚胎裝管及記錄2級(jí)胚胎用于冷凍，冷凍前將胚胎在保存液中沖洗4次～6次，然后直接放人冷凍液，并將胚胎裝 入細(xì)管。10％甘油冷凍液：用保存液配制。6胚胎的冷凍保存及解凍6．1胚胎的冷凍保存6 1 1胚胎冷凍保存所需儀器、器材 體視顯微鏡、胚胎冷凍儀、吸胚管、細(xì)管、細(xì)管塞、裝管器、細(xì)菌過濾器、培養(yǎng)皿。3級(jí)：輪廓不清楚，色澤過暗或過淡，細(xì)胞密度小，細(xì)胞變性率為30％～40％。細(xì)胞 變性率不超過10％，見附錄C。b)子宮胚胎：處于3～7發(fā)育期的胚胎質(zhì)量鑒定，分為4級(jí)。C內(nèi)鏡檢，將檢出的胚胎放人盛有保存液的035 rnm培養(yǎng)皿中。5．2胚胎發(fā)育期鑒定5 2 1檢胚 盛有沖胚回收液的表面皿放在體視顯微鏡下，在18。即腹膜與肌肉進(jìn)行縫合；皮膚進(jìn)行節(jié)結(jié)縫合；針角間距1 cm。C的生理鹽水將子宮及卵巢洗干凈。 沖胚完畢后，用25。每側(cè)子宮角需40 mI，沖胚液。用中180 mm表面皿接收沖胚液。方法：用188～208針頭在子宮角基部扎一小孔，然后將88～104沖卵管從此孔導(dǎo)入子宮角大彎 處，給沖卵管氣囊，充氣(充氣量2mI。另一側(cè)輸卵管操作同上。 方法：用64～84頭皮針從宮管連接部的子宮端導(dǎo)入到輸卵管峽部，將沖卵管從輸卵管喇叭口插入2 cm左右，沖卵管遠(yuǎn)端與唾，120 clfiq表面皿相接，事先用10mL注射器抽取5～8mI。j)在骨盆腔，恥骨前沿觸膜子宮角，并將子宮、卵巢引出刀VI外，記錄兩側(cè)卵巢黃體和卵泡數(shù)。h)避開血管，用手術(shù)刀將手術(shù)部位縱向切開3 cm～5 cm長(zhǎng)的刀口，將皮下結(jié)締組織分離，暴露肌 膜。f) 用70％酒精棉球?qū)κ中g(shù)的部位脫碘、晾干。d)用0．1％的新潔爾滅消毒手術(shù)部位。 c)剪去手術(shù)部位的毛，剪毛范圍約20 crnX 20 cm。 a)手術(shù)前空腹24 h～36 h，適量飲水。5 1 4供體羊手術(shù)沖胚步驟 按附錄c做好采胚記錄。，NY／T 1571—20075．1．2沖胚所需藥品 酒精、碘酊、新潔爾滅、0．9Vo生理鹽水、青霉素、全麻藥和解麻藥(山羊麻醉用)等。5羊手術(shù)沖胚及胚胎質(zhì)量鑒定5 1手術(shù)沖胚5．1．1沖胚主要器材 手術(shù)臺(tái)、剃毛刀、創(chuàng)布、止血紗布、剪毛剪、手術(shù)刀柄、手術(shù)剪、止血鉗、巾帕鉗、持針器、腸鉗(帶乳膠管)、手術(shù)刀片、縫合針、鑷子、q5120 mm表面皿、qal80 mm表面皿、64～88頭皮針(尖端磨鈍)、184～204針頭(尖端磨鈍)、中l(wèi)o mm透明硅膠管、10 mI。4．2．3配種的最適時(shí)間確認(rèn)發(fā)情時(shí)立即進(jìn)行第一次輸精，之后每隔12 h輸精1次。 c)稀釋后的精液溫度要保持在25℃左右。采
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