【正文】 制備薄層點(diǎn)樣100μg 展距17cm 未見(jiàn)雜質(zhì)斑點(diǎn)，操作同上，只是需配制一定濃度的檢測(cè)液定量點(diǎn)樣。由原位反應(yīng)的結(jié)果判斷原來(lái)化合物的結(jié)構(gòu)上有何集團(tuán)特征。上面的紅棕色斑點(diǎn)是原兒茶堿與2，4－二硝基苯肼所形 成的胺，下面紫藍(lán)色斑點(diǎn)是剩下的部分未成腙的原兒茶醛。為什么？３． 苯氨反應(yīng)取 原兒茶堿乙醇溶液，在同一薄層上點(diǎn)兩個(gè)相同的樣點(diǎn)，其中一份樣點(diǎn)的原點(diǎn)上，在點(diǎn)加2，4二硝基苯肼試劑，給以熱風(fēng)以促使呈腙反應(yīng)，然后以氯仿－丙酮 （8：2）展層，可見(jiàn)出現(xiàn)兩個(gè)棕紅色斑點(diǎn)。用2，4二硝基苯肼顯色，可顯示加酰化劑前后樣品點(diǎn)有什么變化。（用點(diǎn)蒸氣熏顯色，可見(jiàn)其中點(diǎn)加醋酐吡啶試劑的樣點(diǎn)已展來(lái)在前，而未加試劑的樣點(diǎn)仍在起始線）。如氧化，還原，脫水，水解，鹵代，酶的催化作用，酯化，硝化，衍生物的制備，混合反應(yīng)等均可在薄 層板上進(jìn)行。根據(jù)原化合物的Rf值再聯(lián)系產(chǎn)物的層析行為，Rf值，可供鑒別一個(gè)化合物或者提供鑒定一個(gè)化合物有價(jià)值的線索。先將樣品滴加在薄層板上，然后滴上適當(dāng)?shù)娜軇┱归_(kāi)反應(yīng)物。 2，香橙醇避光陰干后于105℃活化半小時(shí)避光儲(chǔ)存?zhèn)溆谩Ｗ詈髧姙?％硫酸》水溶液固色。 第一向展開(kāi)劑展層后，用熱風(fēng)吹使溶劑揮發(fā)，再將樣品已展層的一向作起始線，在第II向溶劑中展開(kāi)。（2） 樣品？？氨基酸（精氨酸，脯氨酸，亮氨酸的1％水溶液）（3） 展開(kāi)劑：第I向?yàn)檎〈迹姿幔?：1：1）（V/V）第II向?yàn)楸椒樱?5：25）（W/W）（苯酚需要蒸后使用） 由展層結(jié)果判斷選用何種展開(kāi)劑為最合適?展開(kāi)劑⑤中為何藥加醋酸。 三氯化鐵 ① 石油醚②氯仿③甲醇④氯仿：丙酮（8：2）⑤氯仿：丙酮：甲醇：醋酸（7：2：：） 香草醛－硫酸（壓板法）點(diǎn)樣展層后，稍干，后扣在一塊同樣大小并涂布一層（不可多加，多了會(huì)使斑點(diǎn)擴(kuò)散）顯色劑的玻璃板上，壓緊稍后一下，取除玻璃片，使薄層面向上，觀察層面向上，觀察顏色變化。 薄荷油,%乙醇溶液（3）展開(kāi)劑 (2) 樣品 （1） 硅膠 CMCNa 薄層 (載玻片板) 1. 單向展層例一. (4) (3) (2) (1) 空白 (1).三氯化鐵1%乙醇溶液(2).三氯化鋁1%乙醇溶液(3).%乙醇溶液(4).碘化鉍鉀(見(jiàn)附錄I)(5).*香草醛硫酸 薄層層析應(yīng)用定形點(diǎn)滴反應(yīng)鑒別天然產(chǎn)物中的化學(xué)成分,類別,純度和異同.薄層板上原位化學(xué)反應(yīng) 然后取樣品溶液約3毫升，置于1cm的石英杯中，用紫外光譜儀，仔細(xì)測(cè)量在上述波長(zhǎng)范圍內(nèi)的各波長(zhǎng)的吸收值，反復(fù)測(cè)定3次。 416 I峰△45 3－OHMeONa5 3‘ 分解 分解 430 I峰△59 4‘－OHNaOH 5‘ 2‘ 分解 分解 （三） 測(cè)定結(jié)果：？皮素加位移試劑結(jié)界表（）加入試劑 編號(hào) II峰 I峰 位移值 羥基無(wú)水甲醇 1 256 371（5） 醋酸鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入過(guò)量的無(wú)水醋酸鈉固體，搖勻；杯底剩有2mm的醋酸鈉后，二分內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。（4） 三氯化鋁光譜：在盛有約3毫升樣品溶液的石英杯中，加入三氯化鋁溶液6滴，放置1分鐘后進(jìn)行測(cè)定。（3） 甲醇鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入甲醇鈉溶液5～7滴后，立即測(cè)定。（2） 氫氧化鈉光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯中，加入氫氧化鈉溶液2～3滴立即測(cè)定。（1） 黃酮光譜：取樣品溶液約3毫升置于石英杯（1CM）中，在200～300nm波段內(nèi)進(jìn)行掃描。6． 硼酸飽和液：將無(wú)水硼酸加入適量無(wú)水甲醇，制成飽和溶液。（二） 試劑配制1． 無(wú)水乙醇：用分析純的甲醇，加入10％CaO，放置24小時(shí)后并加熱回流1小時(shí)，回流時(shí)冷凝管頂端應(yīng)安裝CaCL2干燥管，然后蒸餾得無(wú)水甲醇。8．紫外吸收光譜測(cè)定？皮素（一） 原理記錄：（1） 蘆丁和？皮素的紙層析，聚酰胺薄層層析結(jié)果。7．？皮素降解產(chǎn)物的薄層層析：硅膠－CMC－Na薄層對(duì)照品：原兒茶酸（Protocatechuic acid），間苯三酚9Phlorogluoinol)。4． 紅外光譜測(cè)定：5． ？皮素五甲醚的制備：??？ 皮素結(jié)晶400Mg置于150毫升三頸瓶中，加50毫升無(wú)水丙酮，裝上電動(dòng)攪拌器，冷凝管及溫度計(jì)，加熱回流攪拌， ,繼續(xù)加熱回流攪拌直至溶液黃色完全消退為止,約需4~5小時(shí),停止加熱,取下燒杯, 反應(yīng)液經(jīng)過(guò)濾,沉淀用熱丙酮洗滌數(shù)次,合并系,濾液,蒸餾回收部分丙酮,留存10~15毫升,放置,漸漸析出無(wú)色結(jié)晶,表示過(guò)?的硫酸二甲酯存在,應(yīng)加 5%NaOH數(shù)滴,振搖使硫酸二甲酯水解,此時(shí)又可析出一小部分結(jié)晶(檢查所析出結(jié)晶對(duì)1%FeCL3的反應(yīng),甲基化完全者呈負(fù)反應(yīng)),合并,以乙醇重結(jié) 晶,得?皮素五甲醚(MP152~153℃).甲基化不完全者時(shí)對(duì)三氯化鐵出呈正反應(yīng),主要產(chǎn)品為3,7,3”,4”甲醚,MP161~℃.6．？皮素的降解 測(cè)熔點(diǎn)，進(jìn)行紙層析法鑒定。思考題：提取蘆丁工藝中影響產(chǎn)量和質(zhì)量的因素是什么？為什么藥加硼砂水溶液？記錄：粗蘆丁得率多少？精制蘆丁得率多少？溶點(diǎn)？3． 蘆丁的水解取 蘆丁1克，加2％H2SO4 80毫升，小火加熱微沸回流30分鐘至1小時(shí)。抽濾。合并結(jié)晶再用乙醇重結(jié)晶一次。 易溶于水，吡啶，能溶于甲醇。不溶于石油醚，苯，乙醚，氯仿和水中。？皮素溶于熱乙醇（1：23），冷乙醇（1：300）。易溶于堿液中呈黃色，酸化后又析出。蘆丁溶于熱 水（1：200），難溶于冷水（1：8000）；溶于熱乙醇（1：7），冷乙醇（1：100）；熱乙醇（1：30）。1． 蘆?。ㄊ|香苷 Rutin）本 品為淡黃色細(xì)小針狀結(jié)晶，C27H36O16。二．槐花米中已知主要成分的理化性質(zhì)：3． 通過(guò)？皮素紫外吸收光譜的測(cè)定及應(yīng)用化學(xué)位移確定黃酮類烴基位量的方法。一．實(shí)驗(yàn)的目的和要求1． 以蘆丁為實(shí)例學(xué)習(xí)黃酮類成分的提取分離方法?；被字兴饕煞质|香苷有減少毛細(xì)血管的通透性作用，臨床上主要為防止高血壓病的輔助治療藥物。 蘆丁的提取,分離及鑒定蘆丁(Rutin)亦稱蕓香苷（Rstinoside），廣泛存在于植物界中，其中以槐米和蕎麥葉的含量較高，可作為提取蘆丁的原料。 13(4)。 1977(2):39. 19773. 中國(guó)醫(yī)科院第五研究室: 放射醫(yī)學(xué) 上海人民出版社 (1)滲濾液中是否含有生物堿?(2)滲濾液中生物堿是否可以被交換在樹(shù)脂上? ,溶于15毫升10%鹽酸水溶液中,室溫放置,不時(shí)搖動(dòng),放置24小時(shí)后過(guò)濾,濃度調(diào)到PH=9~10,用 ,無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜,回收乙醚淡黃色粘稠體放置于冰箱中,得淺黃色固體,石油醚重結(jié)晶后得白色結(jié)晶,測(cè)熔點(diǎn). 5. 氧化苦參堿的還原 石油醚：乙醚：甲醇＝9：9：1顯色劑：改良碘化鉍鉀（改良Dragendorff）4 氧化苦參堿的分離與純制（1） ,30克氧化鋁(80~120目,I~III)裝柱(1＊45),先加30毫升氯仿洗脫,再用氯仿和甲醇 (99:1),每10毫升收集一份,經(jīng)薄層檢識(shí),將氧化苦參堿的流份合并,回收溶劑至干,用少量丙酮溶解,放置吸 晶,得氧化苦參堿純品,薄層檢識(shí)后,干燥,側(cè)溶點(diǎn).（2） 吸附劑:薄層用硅膠15克(已用NH4OH減活)洗脫劑:CHCL3 50毫升,CHCL3MeOH(98:2)100毫升,(95:5)100毫升,MeOH100毫升流速1毫升/分 10毫升收集一份.3 苦參生物堿的氧化鋁薄層鑒定。2 總生物堿的洗脫 300克？？(g/v) 6倍量浸泡48小時(shí)，浸出浸液。（2） 浸提法 生物堿 RSO3Na+ ＋ H+CL ——RSO3H+ + NaCL（3） 掌握氧化鋁吸附薄層層離法和柱層層離法鑒定和分離生物堿的方法。二．實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求（1） 通過(guò)苦參生物堿的提取掌握用滲濾法和離子交換法提取生物堿的方法。溶點(diǎn)80～81℃，易溶于甲醇乙醇氯仿，略溶于苯和乙醚，在水中溶解度小。通常室溫下結(jié)晶得到的是α型，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，溶于苯，在乙醚中溶解度小。溶點(diǎn)：207～208℃（不含結(jié)晶水）162～163℃（含一個(gè)結(jié)晶水）77～78℃（含多個(gè)結(jié)晶 水）結(jié)晶水可在145～150℃／0。 氧化苦參堿的提取和鑒定或用100毫升1%吲哚醌丙酮溶液加10毫升醋酸.噴灑后處理: 100~110℃加熱10分鐘.(35) 1,2萘醌4硫磺酸(Folin試劑): 檢查氨基酸.噴灑劑: ,2萘醌4磺酸鈉,溶于100毫升5%碳酸鈉中.噴灑后處理: 室溫放于,不同氨基酸出現(xiàn)不同顏色.有機(jī)酸(36) 酸堿指示劑: 檢查有機(jī)酸.噴灑劑: %溴酚藍(lán)(或溴甲酚綠,或溴麝香草酚藍(lán))的乙醇溶液.(37) 氧化還原顯色劑: 檢查有機(jī)酸.噴灑劑: I. %%溴酚藍(lán)的無(wú)水乙醇液.II. %高錳酸鉀及1%,取I和II按1:1混合后噴酒.噴酒后處理: 穩(wěn)定時(shí)間為5~.(38) ??? (Acridine): 檢查酸.噴灑劑: %的??乙醇溶劑.紫外線分析燈下呈黃色熒光.(39) 芳香胺還原糖: 檢查酸.噴灑劑: 芳香胺(如苯氨5克)和還原糖(如木質(zhì)糖5克)溶于50%含水乙醇中.噴灑后處理: 125~130℃加熱出現(xiàn)棕色斑點(diǎn).氨基酸(33) 茚三酮: 檢查氨基酸及氨基糖.噴灑劑: ,加入3毫升醋酸。（30）KellerKiliani試劑：檢查α－去氧糖，常用于強(qiáng)心甙。噴灑液：I，II，臨用前等體積混合。溶