植物脫毒快繁技術(shù)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-18 08:42本頁(yè)面
【正文】 木本植物莖尖培養(yǎng)難以生根成植株，將實(shí)生苗砧木在人工培養(yǎng)基上種植培育，再?gòu)某赡隉o(wú)病樹(shù)枝上切取 ，在砧木上進(jìn)行試管微體嫁接，以獲得無(wú)病毒幼苗。 愈傷組織的某些細(xì)胞不帶病毒原因： 病毒的復(fù)制速度趕不上細(xì)胞的增殖速度； 有些細(xì)胞通過(guò)突變獲得了抗病毒的抗性。 （四）其它途徑脫毒 愈傷組織培養(yǎng)脫毒 莖尖微體嫁接 化學(xué)療法脫毒 愈傷組織培養(yǎng)脫毒 愈傷組織細(xì)胞帶病原菌不均一，部分細(xì)胞不帶病毒，由這些細(xì)胞再生的植株是無(wú)病毒的。 取莖尖（或莖段）培養(yǎng)獲得無(wú)菌苗。 （三）莖尖與熱處理相結(jié)合方法 能克服單獨(dú)莖尖培養(yǎng)時(shí)，莖尖過(guò)小成活率太低，莖尖太大又脫除不掉病毒的缺點(diǎn)。 取芽的時(shí)間也很重要，一般選 萌動(dòng)期 較好。 （ 2）培養(yǎng)條件 在莖尖培養(yǎng)中， 光下培養(yǎng) 的效果通常比暗培養(yǎng)效果好，如馬鈴薯莖尖培養(yǎng)時(shí)，當(dāng)莖已長(zhǎng)到 1cm高時(shí)，光照強(qiáng)度便增加到 4000lx。 （ 2）外植體大小 在最適培養(yǎng)條件下， 外植體的大小 決定莖尖的存活率，外植體越大，產(chǎn)生再生植株的機(jī)會(huì)也就越多。 莖尖培養(yǎng)脫毒，由于其脫毒效果好，后代穩(wěn)定，所以是目前培育無(wú)病毒苗最廣泛和最重要的一個(gè)途徑。微莖尖需數(shù)月才能成功。 20223000lx 16h/d 光照下培養(yǎng)。當(dāng)一個(gè)半圓球的頂端分生組織充分暴露出來(lái)之后，用解剖刀片將帶 12個(gè)葉原基 的分生組織切下，接到培養(yǎng)基上。 莖尖長(zhǎng)（ｍｍ） 葉原基數(shù) 小植株數(shù) 脫毒植株數(shù) 脫毒率（％） 1 50 24 48 2 42 18 4 64 0 0 離體莖尖大小對(duì)馬鈴薯脫毒效果的影響 切取莖尖越小脫毒效果越好，但太小不易成活，過(guò)大又不能保證完全除去病毒，所以 莖尖大小要合適。有時(shí)消毒處理會(huì)增加培養(yǎng)物的污染率。 剝離莖尖要 迅速 并盡快接種，或在一個(gè)襯有無(wú)菌濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行操作， 以防莖尖變干 。在生長(zhǎng)素中應(yīng)避免用易促進(jìn)愈傷組織化的 2， 4D，宜用 NAA或 IBA； 細(xì)胞分裂素用 KT或 BA； GA3對(duì)某些植物莖尖培養(yǎng)有用。 MS培養(yǎng)某些植物莖尖時(shí)，有些離子濃度過(guò)高應(yīng)稀釋。在植物體內(nèi)存在有一種“病毒鈍化系統(tǒng)”（抑制因子假說(shuō)），在分生組織中的活性最高，因而使分生組織不受侵染。在旺盛分裂的分生組織中，代謝活動(dòng)很高，正常核蛋白合成占優(yōu)勢(shì)，使病毒無(wú)法進(jìn)行復(fù)制。當(dāng)植物細(xì)胞分裂 DNA復(fù)制時(shí)，病毒 DNA隨著復(fù)制。莖尖中缺乏病毒合成所需的酶系，存在高水平內(nèi)源激素，可抑制病毒的增殖。植物體 病毒的移動(dòng) 主要靠 2條途徑：一是通過(guò)維管系統(tǒng)，而分生組織中尚未形成維管系統(tǒng)；二是通過(guò)胞間連絲，但這條途徑病毒移動(dòng)速度非常慢， 趕不上 莖尖和根尖 細(xì)胞不斷分裂和活躍的生長(zhǎng)速度。 （二）莖尖培養(yǎng)脫毒 莖尖培養(yǎng)脫
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