【正文】 高速度、高效率進行。 ? 真核生物僅有 eRF一種釋放因子 ， ? 所有 3種終止密碼子均可被 eRF識別 。 終止密碼子不被任何氨基酰 tRNA識別，只有釋放因子 RF能識別終止密碼子而進入 A位，這一識別過程需要水解 GTP。 目錄 真核生物肽鏈延長過程 目錄 肽鏈上每增加一個氨基酸殘基，就需要經(jīng)過一次進位、成肽和轉(zhuǎn)位反應(yīng)。 移位的結(jié)果是：① 成肽后位于 P 位的 tRNA所攜帶的氨基酸或肽在反應(yīng)中交給了 A位上的氨基酸，空載的 tRNA從核糖體直接脫落；② 成肽后位于 A位的帶有合成中的肽鏈的 tRNA（肽酰 tRNA）轉(zhuǎn)到了 P位上；③ A位得以空出，且準確定位在mRNA的下一個密碼子，以接受一個新的對應(yīng)的氨基酰 tRNA進位。 目錄 成肽是指 肽基轉(zhuǎn)移酶（轉(zhuǎn)肽酶） 催化兩個氨基酸間肽鍵形成的反應(yīng)。 二、在核糖體上重復(fù)進行的三步反應(yīng) 延長肽鏈 目錄 1. 進位 (positioning)/注冊 (registration) 2. 成肽 (peptide bond formation) 3. 轉(zhuǎn)位 (translocation) ? 肽鏈延長在核糖體上連續(xù)循環(huán)式進行 ， 又稱為核糖體循環(huán) (ribosomal cycle)， 包括以下三步： ? 每輪循環(huán)使多肽鏈增加一個氨基酸殘基 。 IF2 GTP GDP Pi 起始復(fù)合物形成過程 目錄 （二）真核生物翻譯起始復(fù)合物的形成 1. 核糖體大小亞基分離； 2. MettRNAiMet定位結(jié)合于小亞基 P位； 3. mRNA與核糖體小亞基定位結(jié)合； 4. 核糖體大亞基結(jié)合。 目錄 IF3 IF1 A U G 539。 目錄 IF3 IF1 IF2 GTP GDP Pi A U G 539。 目錄 IF3 IF1 IF2 GTP 3. fMettRNAfMet結(jié)合在核糖體 P位 A U G 539。 目錄 ?mRNA上鄰近 RBS下游 ， 還有一段短核苷酸序列 ，可被小亞基蛋白 rpS1識別并結(jié)合 。 一條多順反子mRNA序列上的每個基因編碼序列均擁有各自的 SD序列和起始 AUG。 339。 1. 核糖體大小亞基分離； 2. 核糖體小亞基結(jié)合于 mRNA的起始密碼子附近； 3. fMettRNAfMet結(jié)合在核糖體 P位 ； 4. 核糖體大亞基結(jié)合形成起始復(fù)合物。 ?真核生物的肽鏈合成過程與原核生物的肽鏈合成過程基本相似 ， 只是反應(yīng)更復(fù)雜 、 涉及的蛋白質(zhì)因子更多 。 ?原核生物 ?起始氨基酰 tRNA: fMettRNAfMet 目錄 fMettRNAfMet的生成是一碳化合物轉(zhuǎn)移和利用的過程之一 ， 反應(yīng)由轉(zhuǎn)甲?；复呋?， 甲?；鶑?N10甲酰四氫葉酸轉(zhuǎn)移到甲硫氨酸的 α氨基上 。 ?起始氨基酰 tRNA: MettRNAiMet ?參與肽鏈延長的甲硫氨酰 tRNA： MettRNAMet ?真核生物 目錄 具有起始功能的 tRNAfMet與甲硫氨酸結(jié)合后 ， 甲硫氨酸很快被甲?；癁?N甲酰甲硫氨酸(Nformyl methionine, fMet)， 于是形成 N甲酰甲硫氨酰 tRNA(fMettRNAfMet) ， 可以在mRNA的起始密碼子 AUG處就位 ， 參與形成翻譯起始復(fù)合物 。起始密碼子只能辨認 MettRNAiMet。 目錄 氨基酸 ＋ ATPE 氨基酰 AMPE ＋ PPi ?第一步反應(yīng) 目錄 ?第二步反應(yīng) 氨基酰 AMPE ＋ tRNA 氨基酰 tRNA ＋ AMP ＋ E 目錄 ? 氨 基 酰 tRNA 合 成 酶 還 有 校 對 活 性（ proofreading activity） ， 能將錯誤結(jié)合的氨基酸水解釋放 ， ? 即將任何錯誤的氨基酰 AMPE復(fù)合物或氨基酰 tRNA的酯鍵水解 ， 再換上與密碼子相對應(yīng)的氨基酸 ， 改正反應(yīng)的任一步驟中出現(xiàn)的錯配 ， 保證氨基酸和 tRNA結(jié)合反應(yīng)的誤差小于 104。 目錄 ? 反應(yīng)過程 一、 氨基酰 tRNA合成酶識別特定氨基酸和 tRNA 氨基酸 + tRNA 氨基酰 tRNA ATP AMP＋ PPi 氨基酰 tRNA合成酶 氨基酸與 tRNA連接的專一性由氨基酰 tRNA合成酶保證。 目錄 ?起始因子 （ initiation factor， IF） ?延長因子 （ elongation factor， EF） ?釋放因子 （ release factor， RF） 目錄 參與原核生物翻譯的各種蛋白質(zhì)因子及其生物學(xué)功能 種類 生物學(xué)功能 起始因子 IF1 占據(jù)核糖體 A位，防止 A位結(jié)合其他 tRNA IF2 促進 fMettRNAfMet與小亞基結(jié)合 IF3 促進大、小亞基分離；提高 P位對結(jié)合 fMettRNAfMet的敏感性 延長因子 EFTu 促進氨基酰 tRNA進入 A位，結(jié)合并分解 GTP EFTs EFTu的 調(diào)節(jié)亞基 EFG 有轉(zhuǎn)位酶活性，促進 mRNA肽酰 tRNA由 A位移至P位；促進 tRNA卸載與釋放 釋放因子 RF1 特異識別 UAA、 UAG，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)變?yōu)轷ッ? RF2 特異識別 UAA、 UGA，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)變?yōu)轷ッ? RF3 具有 GTP酶活性，介導(dǎo) RF1及 RF2與核糖體的相互作用 參與真核生物翻譯的各種蛋白質(zhì)因子及其生物學(xué)功能 種類 生物學(xué)功能 起始因子 eIF1 多功能因子，參與翻譯的多個步驟 eIF2 促進 MettRNAiMet與小亞基結(jié)合 eIF2B 結(jié)合小亞基，促進大、小亞基分離 eIF3 結(jié)合小亞基，促進大、小亞基分離；介導(dǎo) eIF4F復(fù)合物 mRNA與小亞基結(jié)合 eIF4A eIF4F復(fù)合物成分；有 RNA解螺旋酶活性，解除 mRNA 5?端的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，使其與小亞基結(jié)合 eIF4B 結(jié)合 mRNA，促進 mRNA掃描定位起始 AUG eIF4E eIF4F復(fù)合物成分，識別結(jié)合 mRNA 的 5?帽結(jié)構(gòu) eIF4G eIF4F復(fù)合物成分，結(jié)合 eIF4E、 eIF3和 PAB eIF5 促進各種起始因子從小亞基解離 eIF6 促進大、小亞基分離 延長因子 eIF1α 促進氨基酰 tRNA進入 A位，結(jié)合分解 GTP，相當(dāng)于 EFTu eIF1βγ 調(diào)節(jié)亞基，相當(dāng)于