重組體在原核細胞中的表達與調(diào)控-文庫吧資料
2025-01-24 20:44本頁面
【正文】 的酶系統(tǒng)合成外源蛋白 ?外源基因不能帶有間隔序列（內(nèi)含子），如cDNA或全合成的基因 ?利用原核強啟動子及其兩側(cè)的調(diào)控 ?SD序列與起始子密碼子 ATG有合適的距離 ?外源基因下游加上不依賴 ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止區(qū) ?正確的開放讀碼框架 ?利用宿主調(diào)控系統(tǒng)，調(diào)節(jié)外源基因表達，防止產(chǎn)物毒害宿主 外源基因在原核表達調(diào)控元件 ?啟動子：能被 RNA聚合酶識別、結(jié)合并啟動基因轉(zhuǎn)錄的一段 DNA序列 ? Pribnow box： 10區(qū)； TATAAT（與 RNA聚合酶核心酶結(jié)合，解旋 DNA，合成 RNA） ? 35區(qū)： TTGACA（與 σ因子結(jié)合） ?代表強啟動子：乳糖啟動子（ Lac）；色氨酸啟動子（ Trp）；噬菌體左向啟動子（ λ PL） ； TrpLac雜合啟動子（ Tac）； T7噬菌體啟動子 乳糖操縱元 ?凡能與調(diào)控蛋白特異性結(jié)合、從而影響基因轉(zhuǎn)錄強弱的序列，不論其對基因轉(zhuǎn)錄的作用是減弱、阻止或增強、開放，都可稱為操縱子。重組體在原核細胞中表達與調(diào)控 基因表達概述 ?基因表達：指基因攜帶的遺傳信息，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工修飾等復(fù)雜的生化反應(yīng)，產(chǎn)生具有生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)過程，即DNA→RNA→ 蛋白質(zhì) . ?基因表達調(diào)控 ?轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控 ?轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工 ?mRNA從核到細胞質(zhì) ?mRNA降解 ?翻譯水平 原核與真核生物基因組比較 ?真核基因組比原核基因組大得多，大腸桿菌基因組約 4 106bp，哺乳類基因組在 109bp數(shù)量級 ?真核生物主要的遺傳物質(zhì)與組蛋白等構(gòu)成染色質(zhì)，被包裹在核膜內(nèi)，核外還有遺傳成分（如線粒體DNA等），這就增加了基因表達調(diào)控的層次和復(fù)雜性 ?細菌多數(shù)基因按功能相關(guān)成串排列，組成操縱元的基因表達調(diào)控的單元，共同開啟或關(guān)閉，轉(zhuǎn)錄出多順反子的 mRNA；真核生物則是一個結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一條 mRNA，即 mRNA是單順反子，基本上沒有操縱元的結(jié)構(gòu)，而真核細胞的許多活性蛋白是由相同和不同的多肽鏈
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1