ch6-細(xì)胞重組與克隆動(dòng)物-文庫吧資料
2025-01-23 06:10本頁面
【正文】 就。 （ 5）體細(xì)胞核移植法 體細(xì)胞核移植法 （ 1）綿羊克隆成功 1997年 2月 23日，英格蘭愛丁堡羅斯林研究所和PPL制藥公司宣布，胚胎學(xué)家伊恩 牛、豬、羊兔已分離克隆出胚胎干細(xì)胞，但未成功克隆后代。突出的特點(diǎn)是能在體外培養(yǎng)，并能以克隆形式保存。 （ 3）胚胎干細(xì)胞核移植法 ☉胚胎干細(xì)胞 (embryonic stem cell , ES )是從早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán) (ICM)分離出來的、能在體外培養(yǎng)的一種高度未分化的多能細(xì)胞。 ☉ 有關(guān)的實(shí)驗(yàn)說明：哺乳動(dòng)物的胚胎細(xì)胞在分裂成 8細(xì)胞前均為全能細(xì)胞，每個(gè)分裂球的基因均能全部表達(dá)。 （ 2）胚胎細(xì)胞核移植法 ☉ 將未著床的早期胚胎分散成單個(gè)的細(xì)胞球，在電流作用下，單個(gè)細(xì)胞與去除染色體的未受精的成熟卵母細(xì)胞融合，發(fā)育成胚胎后，移入受體妊娠產(chǎn)仔。這樣，一個(gè)胚胎就可克隆出多個(gè)遺傳相同的個(gè)體。 ☉ 1977年，世界衛(wèi)生組織將克隆定義為遺傳上同一的機(jī)體或細(xì)胞系（株）的無性生殖。如，克隆羊。 克隆原作名詞的內(nèi)涵是指無性繁殖群，外延作動(dòng)詞是指無性繁殖的操作過程。在不發(fā)生突變的情況下，它們的遺傳結(jié)構(gòu)是相同的。 （ 2）克隆的內(nèi)涵及延伸 ☉ clone,cloning,根據(jù)我國遺傳學(xué)家吳旻的建議，音譯為克隆。二者必取其一，難以兩全其美。 細(xì)胞全能性與細(xì)胞機(jī)能的特化是相互矛盾的，細(xì)胞全能性的一個(gè)結(jié)果是使它的機(jī)能發(fā)展受到限制，而細(xì)胞機(jī)能的特化必須以其特定的物質(zhì)結(jié)構(gòu)和數(shù)量為前提。實(shí)驗(yàn)的失敗，使很多人一度放棄了克隆動(dòng)物的研究。 圖 66 小鼠核移植試驗(yàn) 其后兩年，很多學(xué)者都不能重復(fù)上述試驗(yàn)，甚至有人懷疑研究成果是偽造的。 （ 1）純系 (LT/SV或 CBA/HT6)灰色小鼠作核供體親本； （ 2）第四天，從雌鼠中收集胚泡，去透明帶，使內(nèi)細(xì)胞團(tuán) (ICM)與滋胚層（ TE）分離； （ 3）在酶的作用下， ICM和 TE分散為單個(gè)細(xì)胞； （ 4）用微細(xì)管把單細(xì)胞中帶一層細(xì)胞質(zhì)的核，移入剛剛受精的黑色純系（ C57BL/6）核受體親鼠的受精卵中； （ 5）將黑鼠受精卵中原來的雌、雄兩核吸出； （ 6）將接受核移植的胚胎在體外試管中培養(yǎng) 4天至囊胚期； （ 7）把胚胎與白色 (ICR/Swiss或 BALB/C)純系對(duì)照組鼠胚胎一起植入 ICR/Swiss的白色假孕母鼠的子宮中發(fā)育； （ 8）產(chǎn)下 3只灰色小鼠（ 2♀ 1♂ ）。 ☉ 1981年，瑞士的卡爾 .伊爾門澤 ()等首次獲得小鼠卵核移植成功。核移植需在顯微操作儀 (micromanipulator)下進(jìn)行。 ☉ 1989年，童第周等將鯽魚胚胎細(xì)胞核移入去核的未受精卵中，實(shí)現(xiàn)了不同種間的核質(zhì)雜交，無性繁殖出“鯉鯽核魚”。 ☉ 1979年，武漢水生所，將鯽魚囊胚期細(xì)胞經(jīng)過385天 59世代連續(xù)繼代培養(yǎng)后，再將此培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核移植到同種鯽魚的未受精卵中。 ☉ 1961年，我國學(xué)者童第周等進(jìn)行魚類不同亞科間細(xì)胞核移植獲得成功。
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