吸光光度法學(xué)時(shí)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-01-20 11:32本頁(yè)面
【正文】 可得核酸量 . H3PO4+12(NH4)2MoO4+21HNO3 =(NH4)3PO4 4. 干擾組分與顯色劑有反應(yīng) ,又無(wú)法掩蔽消除時(shí)： 1） 掩蔽被測(cè)組分 ，再加入顯色劑，作參比 . 2） 加入等量干擾組分 到空白溶液中 ,作參比 . 選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤? 1 測(cè)定波長(zhǎng)選擇 選擇原則： “吸收最大，干擾最小” 靈敏度 選擇性 測(cè)量波長(zhǎng)和吸光度范圍的選擇 2 測(cè)定濃度控制 控制濃度 吸光度 A： ～ 減少測(cè)量誤差 參比溶液的選擇 儀器調(diào)零 消除吸收池壁和溶液對(duì)入射光的反射和吸收 扣除干擾 試劑空白 試樣空白 褪色空白 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 0 1 2 3 4 5 6 7 8Aco n ce n t ra t i o n理論基礎(chǔ)：朗伯 比爾定律 標(biāo)準(zhǔn) （ 工作 ） 曲線繪制方法： 在 ?、 b固定的情況下 ， 測(cè)定一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 ， 作A~c圖 ， 在相同條件下測(cè)定樣品溶液的吸光度 ， 從曲線上可查出被測(cè)樣品的濃度 。 如 phen—Fe2+ 標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 被測(cè)液 作參比。H2O2]2+ 有機(jī)顯色劑 : 有機(jī)顯色劑 CH3－ C－ C－ CH3 HO－ N N－ OH ＝ ＝ N N OH COOH SO 3 H OO型： N N N O H OH ON型 ： 吡啶偶氮間苯二酚 (PAR) N H N H N S N S型 ： 雙硫腙 NN型： 丁二酮肟 (Ni2+) 鄰二氮菲(Fe2+) 磺基水楊酸 Fe3+ ： Nb5BrPADAP酒石酸， VPARH2O2 ： AuCl4羅丹明 B 主要用于萃取光度測(cè)定 －絡(luò)合劑－表面活性劑體系： AuI4CTMAB ： HSASiW Spectroscopy and Spectral Analysis ,pp16301633,December,2022 Chinese Journal of Applied Chemistry ,pp833837, 1. 顯色反應(yīng)酸度 （ c(M)、 c(R)一定） pH1pHpH2 pH 顯色條件的選擇 c(R) c(R) c(R) 2. 顯色劑用量 （ c(M)、 pH一定） Mo(SCN)32+ 淺紅 Mo(SCN)5 橙紅 Mo(SCN)6 淺紅 Fe(SCN)n3n 3. 顯色溫度及顯色時(shí)間 T1(℃ ) T2(℃ ) t(min) A 有機(jī)溶劑 : 降低有色化合物的解離度， 提高顯色反應(yīng)的靈敏度 影響有色絡(luò)合物的溶解度和組成， 提高顯色反應(yīng)的速率 Co2＋ , Fe3+ Co2+ FeF63 Co(SCN)2 (藍(lán) ) ⑴ NaF SCN－ Co2+ Fe2+,Sn4+ (2)Sn2+ Co(SCN)2 SCN－ 測(cè) Co2＋ (含 Fe3+) : (掩蔽法 ) (1)化學(xué)法 Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ CoR,ZnR NiR,FeR CoR, Zn2+ , Ni2+ , Fe2+ 鈷試劑 R H+ 測(cè) Co2＋ :(生成絡(luò)合物性質(zhì)不同 ) 如不能通過(guò)控制酸度和掩蔽的辦法消除干擾， 則需采取分離法。 *顯色條件易于控制， 重現(xiàn)性好 。 對(duì)照性好 , 對(duì)比度 ?λmax60nm。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池 檢測(cè)器 ：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成 電流訊號(hào)。 單色器 入射狹縫 準(zhǔn)直透鏡 棱鏡 聚焦透鏡 出射狹縫 白光 λ 1 λ 2 800 600 500 400 光柵： 在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的 等寬度等間距 條痕 (600、 1200、 2400條 /mm )。 可見光區(qū)： 鎢燈 (360～ 800nm) 紫外區(qū)： 氫燈，氘燈 (180～ 375nm) 單色器 ：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的 裝置。這一規(guī)律稱吸光度的加和性。 吸光度的加和性與吸光度的測(cè)量 A = A1 + A2 + … +An 用參比溶液調(diào) T=100%（ A=0） ， 再測(cè)樣品溶液的吸光度 ， 即消除了吸收池對(duì)光的吸收 、 反射 ， 溶劑 、 試劑對(duì)光的吸收等 。 ? 104為低靈敏度 . 解： c (Fe) = mg/L = 103/ mol/L = 105 mol/L 1145 101110812380 ??? ??????? cmm olL...?1%1cmE例 1 鄰二氮菲光度法測(cè)鐵 ? (Fe) = mg/L, b= cm , A = 計(jì)算 ? 和 cbEA %cm ??? 11c = mg/L = 10￣3 g/1000 mL = 10￣4 g/100mL ??1% m 431c = 0 .3 8 /2 .0 1 0 = 1 .9 1 0E二、朗伯 比爾定律的適用條件 1. 單色光： 應(yīng)選用 ?max處或肩峰處 ?測(cè)定 2. 吸光質(zhì)點(diǎn)形式不變 離解 、 絡(luò)合 、 締合會(huì)破壞線性關(guān)系 應(yīng)控制條件 (酸度 、 濃度 、 介質(zhì)等 ) 3. 稀溶液 (一般 molcm1) ? 越大 , 靈敏度越高 : ? 1 104～ 5 104 為中等靈敏度 。100mL1表示時(shí)，用 表示， A＝ bc， 叫做比消光系數(shù) 靈敏度的表示方法 :摩爾吸光系數(shù) (?) A= ? b c ? =A/bc (Lcm1 當(dāng) c的單位用 molL1表示時(shí)，用 a表示，
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1