藥敏試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析-文庫(kù)吧資料
2024-10-25 11:02本頁(yè)面
【正文】 片擴(kuò)散法 (抑菌圈直徑 ) ? MIC法： – 稀釋法 (肉湯、瓊脂 ) – 自動(dòng)化儀法 – 抗生素連續(xù)梯度法 (Etest ) – 流式細(xì)胞儀 藥敏試驗(yàn)方法的選擇 ? 紙片法有獨(dú)特之處 – 選藥?kù)`活、便宜、易懂 ? MIC法 ：商品肉湯法 (自動(dòng)化法 )↑ – 可用于厭氧菌、苛氧菌 – 計(jì)算機(jī)管理 – 快速，但可能有錯(cuò)誤（ 如誘導(dǎo)型菌 ） – 新藥的評(píng)價(jià) 藥敏試驗(yàn)方法 1（紙片擴(kuò)散法 〕 ? 材料：浸有一定 Abs的干燥的園濾紙片 ? 步驟：制備菌懸液－涂平板－貼紙片－孵育－卡尺測(cè)量抑菌圈直徑－判定 R、 I、 S ? 優(yōu)點(diǎn) ：選藥?kù)`活、便宜、一個(gè)平皿可測(cè)多個(gè)藥 ? 缺點(diǎn) ：影響因素多 ? 適用于快生長(zhǎng)菌、部分苛養(yǎng)菌 紙片擴(kuò)散法－影響因素 ? MIC ? 接種菌量 ? 細(xì)菌生長(zhǎng)率 ? 抗生素含量、擴(kuò)散性 ? 平皿厚度 ? 溫度，預(yù)孵育時(shí)間 紙片擴(kuò)散法－標(biāo)準(zhǔn)化 ? NCCLS：美國(guó)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(National Committee for Clinical Laboratory Standards) ? 每年修訂更改 – 包括質(zhì)控 – 新藥的判定標(biāo)準(zhǔn) – 特殊耐藥性的檢測(cè) NCCLS的法規(guī) ? 規(guī)定紙片含量、接種濃度、培養(yǎng)基、平皿厚度、判定標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控 ? 規(guī)定常規(guī)測(cè)試報(bào)告的抗生素 ? 不同的藥判定標(biāo)準(zhǔn)不同 ? 不同的菌判定標(biāo)準(zhǔn)也不同 常規(guī)測(cè)試并報(bào)告的藥物分組 (1) 腸桿菌科 綠膿和非腸桿菌科 一 級(jí) 氨芐 頭孢他啶 唑林，慶大 慶大，替卡，哌拉 二級(jí) 阿米卡星 阿米卡星 氨芐 /舒，阿莫 /克 吡肟，哌酮，氨曲南 頭孢膚肟，頭霉 環(huán)丙，亞胺培南，替卡 /克 噻肟，曲松，環(huán)丙 妥布，磺胺 亞胺培南，替卡，哌拉 三級(jí) 氨曲南，頭孢他啶 頭孢曲松 卡那，奈替，妥布 氯霉素，奈替 四環(huán)素，氯霉素 常規(guī)測(cè)試并報(bào)告的藥物分組 (2) 葡萄球菌 腸球菌 一級(jí) 苯唑，青霉素 青霉素，氨芐 二級(jí) 紅霉素類 萬(wàn)古霉素 克林，萬(wàn)古 三級(jí) 氯霉素 慶大 常規(guī)測(cè)試并報(bào)告的藥物分組 (3) 流感嗜血桿菌 肺炎鏈球菌 一級(jí) 氨芐，青霉素 青霉素，紅霉素 TMP/SMZ TMP/SMZ 二級(jí) 頭孢膚肟，噻肟 氧氟，四環(huán)素 他啶，氯霉素 萬(wàn)古霉素 三級(jí) 阿奇，頭孢克羅 氯霉素，利福平 環(huán)丙，亞胺培南 利福平，四環(huán)素 預(yù)報(bào)用藥 (一 ) 測(cè)試藥 菌名 推測(cè)其它藥物的敏感性 ? 苯唑西林 葡萄球菌 所有 β－ 內(nèi)酰胺類 ? 四環(huán)素 所有（除葡 多西環(huán)素，米諾環(huán)素 萄球菌和不 動(dòng)桿菌〕 ? 紅霉素 G＋ 球菌 羅紅，克拉，阿奇 ? 克林霉素 所有 林可霉素 預(yù)報(bào)用藥 (二 ) 測(cè)試藥 菌名 推測(cè)其它藥物的敏感性 ? 氨芐西林 腸球菌 青霉素 ? 青霉素 G 葡萄球菌 氨芐，美洛，替卡 ? 頭孢噻吩 腸桿菌科 拉定，頭孢氨芐，克羅 ? 奈啶酸 s 腸桿菌科 所有 FQs ? 萬(wàn)古霉素 s 所有 替考拉寧 s 紙片擴(kuò)散法操作規(guī)程 (一 ) ? 培養(yǎng)基 ： MH (重復(fù)性好，低抑制劑，營(yíng)養(yǎng)好 ) – 厚度： 4mm – PH： ~ ? pH低時(shí)，氨基糖甙 ,大環(huán)內(nèi)酯 ↓ ? pH高時(shí)，青霉素類的活性 ↑ – 離子濃度 (Ca 2+ , Mg 2+ ) ? 影響 氨基糖甙類、四環(huán)素對(duì) Pae活性 ? 高時(shí)，抑菌圈 ↓； 紙片擴(kuò)散法操作規(guī)程 (二 ) ? 接種： –純的新鮮菌落， –菌懸液在 15分鐘內(nèi)種入平皿內(nèi) ? 紙片中心的間距 =24mm ? 孵育 ： CO2影響 Ags, Tet, Macrolides ? 質(zhì)控 : – ATCC25922, 35218 – ATCC27853, ATCC25923 紙片擴(kuò)散法結(jié)果的判定 1. 先看菌名（鑒定到種 〕 2. 不同的藥物使用不同的折點(diǎn) 藥名 菌名 R S 菌株 1 菌株 2 Pip/Taz 綠膿 ≤17 ≥18 16R 30S CAZ 綠膿 ≤14 ≥18 16I 19S 3. 同是 S時(shí)，偏離敏感折點(diǎn)越高的藥 , MIC越低，活性也越高 抑菌圈的分布 北京協(xié)和醫(yī)院 127 株表葡菌對(duì)萬(wàn)古霉素的敏感性0 0 0 01833441420 0 0 0 005101520253035406 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34抑菌環(huán)直徑(mm)株數(shù)(%)抑菌圈的分布 北京協(xié)和醫(yī)院89株金葡菌對(duì)苯唑西林的敏感性54212 2 21310432 201020304050606 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34抑菌環(huán)直徑(mm)株數(shù)(%)非 NCCLS系統(tǒng)的擴(kuò)散試驗(yàn) 方法 國(guó)家
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