【正文】 ，然后再 換算成每克種子的噬菌斑數(shù) 細(xì)菌的?；允删w測(cè)定 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 (Enzyme linked immunology assay, ELISA)是把抗原、抗體的免疫反應(yīng)和酶的高效催化反應(yīng)有機(jī)結(jié)合而發(fā)展起來的一種綜合技術(shù)。 ? 噬菌體法的主要優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能直接用種子提取液測(cè)定。將大量的細(xì)菌生理生化測(cè)定參數(shù)與先進(jìn)的計(jì)算機(jī)技術(shù)有機(jī)的結(jié)合起來。 ? 操作：細(xì)菌溢膿或分離純化細(xì)菌 ―― 自然或人工接種 ―― 觀察 針刺接種法接種甘藍(lán)葉片中肋 如確系該菌，則接種部 位軟腐、維管束褐變 切片置于 ％水瓊脂平板上， 在 28℃ 和黑暗條件下培養(yǎng) 3d 生理生化及快速測(cè)定法 ? 生化測(cè)定試劑盒：鑒定某一類細(xì)菌的關(guān)鍵碳源、氮源、特殊酶和有機(jī)酸等并附有比較和檢索用的計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫。 接種方法 ? 按照柯赫氏法則，從發(fā)病植物上得到的分離物，在健康的寄主植物上接種發(fā)病并與先前癥狀一致，然后再次從發(fā)病部位分離到與先前相同的分離物，才能證明該分離物是引致這種病害的病原物。 ? 過敏性反應(yīng) (Hypersensitive reaction, HR)是指病原細(xì)菌在非寄主植物上引起枯斑反應(yīng)的現(xiàn)象，腐生性細(xì)菌則不表現(xiàn)典型的枯斑。 ? 例如 水稻細(xì)菌性條斑病－取一小塊病葉組織，低倍鏡下觀察，微管束有噴菌現(xiàn)象。 ? 田間診斷 ―― 了解病害和寄主的群體特征，即病害在田間發(fā)生的情況，以及當(dāng)?shù)氐淖魑镌耘嗉案髑闆r 。葉片上病斑常呈水漬狀，上有細(xì)菌溢膿。 培養(yǎng)皿吸水紙培養(yǎng)檢驗(yàn)法實(shí)例 種子 1％ 2％次氯酸鈉溶液和抗菌 素表面消毒 510 min 植床于培養(yǎng)基平板上，在適宜 溫度和光照下培養(yǎng) 710d 手持放大鏡從培養(yǎng)皿兩面觀察，依 據(jù)菌落形態(tài)、色澤來鑒別真菌種類 必要時(shí)挑取培養(yǎng)物制片，用 高倍顯微鏡檢查 瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)檢驗(yàn) 七、分離培養(yǎng)檢驗(yàn) ? 主要應(yīng)用于檢驗(yàn)潛伏于種子、苗木或其他之物產(chǎn)品內(nèi)部，不易發(fā)現(xiàn)和鑒定的病原菌； ? 當(dāng)種子、苗木或其他植物產(chǎn)品上雖有病斑，但無特殊的病原菌可供鑒定的場(chǎng)合。 缺點(diǎn)－某些菌絲生長(zhǎng)不旺盛和產(chǎn)孢少，雜菌已影響 有利于病原菌形成孢子，同時(shí)又避免因種子萌芽伸長(zhǎng)過快造成相互覆蓋，便于檢查 冰凍吸水法： 含水量均勻一致，有利于病菌生長(zhǎng)，皿內(nèi)潔凈，雜菌少。生長(zhǎng)檢驗(yàn)花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，使其應(yīng)用受到限制。供試材料種植在經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理或干熱滅菌的沙礫、石英砂中，在隔離場(chǎng)所和適宜條件下栽培，根據(jù)幼苗和成株的癥狀鑒定。 ? 缺點(diǎn) ：腐生菌干擾；病菌之間干擾 。 保濕萌芽檢驗(yàn)法 ? 適用于病菌隨種子萌發(fā)或幼苗生長(zhǎng)階段就開始侵然危害，并表現(xiàn)癥狀的病原菌。 ? 視野內(nèi)孢子分布不均勻 。 ? 離心管內(nèi)容已形成一層極難沉降的孢子薄膜 。 鏡檢計(jì)數(shù) 用常規(guī)孢子萌發(fā)測(cè)定法、分離培養(yǎng)法或紅四氯唑（ TTC） 染色法判定孢子死活。 離心富集 棄去離心管內(nèi)的上清液，加入一定量蒸餾水或其它浮載液， 重新懸浮沉集在離心管底部孢子，取懸浮液。 洗滌檢驗(yàn)的操作程序 一定數(shù)量的種子樣品放入容器并加入定量蒸餾水或其它洗 滌液，振蕩 510 min，使孢子脫離種子，轉(zhuǎn)移到洗滌液中。 ? 用于種子、糧谷、豆類中的菌嬰、菌核和病秕籽粒。 二、過篩檢驗(yàn) ? 檢驗(yàn)糧谷、種子、油料、干果和生藥材，檢驗(yàn)病粒，菌嬰、菌核、病殘?bào)w等 ? 種子過篩后可檢出夾雜的菌癭、菌核、病株殘屑和土壤，都需仔細(xì)鑒別。 ? 除洗滌檢驗(yàn)法的檢驗(yàn)結(jié)果用單位重量種子的孢子負(fù)載量表示外，其它檢驗(yàn)方法都能獲得帶菌百分率或發(fā)病百分率。 第一節(jié) 植物病原真菌的檢驗(yàn)檢疫技術(shù) ? 病原真菌的屬、種主要依據(jù)其形態(tài)特征鑒定，有時(shí)形態(tài)相似的近似種類需接種寄主，測(cè)定其致病性。 ? 有害生物的帶有率越低，檢驗(yàn)方法的靈敏度越低，檢驗(yàn)精度要求越高，所需樣品數(shù)量就越多。 ? 貨物種類與特點(diǎn) 。 ? 檢驗(yàn)方法的靈敏度 。 ? 每份送檢樣品量的規(guī)定：谷物、棉籽、瓜子、飼料類為 1000g；大粒種子（玉米、蠶豆等） 1000~1500g；小粒種子（芝麻） 500g；蔬菜、煙草： 10~100g；蔥頭、紅棗、馬鈴薯等： 2022~5000g。 檢驗(yàn)檢疫的樣品 ? 同一國(guó)家和地區(qū)來源，同一運(yùn)輸工具，同一品名（種苗則為同一品種）的貨物統(tǒng)稱為一 批 ，按批進(jìn)行檢驗(yàn)、放行或處理。 重金屬超標(biāo) ? 動(dòng)植物、動(dòng)植物產(chǎn)品在飼養(yǎng)、種植和生產(chǎn)加工過程中會(huì)受到環(huán)境（土壤、水）的污染，造成重金屬超標(biāo)，人類食用后危害嚴(yán)重。 2022年2月 18日，英國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)署就食用含有添加蘇丹紅色素的食品向消費(fèi)者發(fā)出警告，并在其網(wǎng)站上公布了亨氏、聯(lián)合利華等 30家企業(yè)生產(chǎn)的可能含有蘇丹紅 1號(hào)的產(chǎn)品清單。 蘇丹紅 1號(hào) ? 蘇丹紅 1號(hào)是一種紅色染料。一般表現(xiàn)為頭痛、痙攣、口吐泡沫，嗜睡，震顫。主要損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)中樞、小腦、腦干和肝、腎、生殖系統(tǒng)，為致腫瘤物。 硫丹 ? 對(duì)人有致突變作用。 ? 孔雀石綠是一種具有高毒、高殘留及“三致”（致畸、致癌、致突變）的殺菌劑。 鹽酸克倫特羅 ? 俗稱瘦肉精 ? 食用豬肉內(nèi)臟后出現(xiàn)心慌、手腳不由自主抖動(dòng)、頭暈、乏力，心率加速、肌肉顫動(dòng)、頭痛、惡心、發(fā)熱及寒戰(zhàn)。 ? 獸藥殘留 ? 漁藥殘留 ? 添加劑藥殘 綠霉素 ? 出口蝦仁、小龍蝦 ? 出口蜂蜜 ? 飼料添加劑 硝基呋喃 ? 硝基呋喃類（ Nitrofurans）是一類合成的抗菌藥物，它們作用于微生物酶系統(tǒng)，抑制乙酰輔酶 A，干擾微生物糖類的代謝，從而起抑菌作用。由于印度對(duì)農(nóng)藥使用管理很不嚴(yán)格，濫用殺蟲劑，結(jié)果使大部分地下水都受到了污染，可樂罐裝廠抽取地下水制造可樂，自然也受到了污染。而在加爾各答銷售的可口可樂中林丹含量是規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)的 140倍，而孟買附近生產(chǎn)的可口可樂中毒死蜱的含量是規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)的 200倍！ ? 印度的一個(gè)地方法院要求可口可樂和百事可樂公司公布可樂的配方。 農(nóng)作物農(nóng)藥殘留 ? 有機(jī)磷殺蟲劑：甲胺磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、久效磷和磷胺（ 2022年 1月 1日禁用），甲拌磷、乙拌磷、甲基異硫磷、氧化樂果等； ? 有機(jī)氯殺蟲劑：六六六、滴滴涕、硫丹、林丹和七氯等； ? 除蟲菊酯 ：聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯、氯氰菊脂、氰戊菊脂等； ? 殺菌劑：惡醚唑等。長(zhǎng)期飲用“有抗奶”相當(dāng)于經(jīng)常低劑量服用抗生素，會(huì)增加人體耐藥性，對(duì)于過敏體質(zhì)的消費(fèi)者而言，還可能會(huì)引起皮疹、過敏性休克等反應(yīng)。 ? 人類食用農(nóng)、獸殘或重金屬超標(biāo)的食品后會(huì)受到危害。因此在動(dòng)物、植物及其產(chǎn)品中有可能存在一定的藥物殘留。 致病微生物 動(dòng)植物、動(dòng)植物產(chǎn)品在養(yǎng)殖、生產(chǎn)、加工、儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過程中都有可能感染致人生病的微生物，人類接觸或食用后將導(dǎo)致感病，危害健康，嚴(yán)重的將導(dǎo)致死亡。 ? 對(duì)食用性動(dòng)植物產(chǎn)品實(shí)施檢驗(yàn)就是要檢驗(yàn)這些產(chǎn)品是否含有致人生病的微生物，農(nóng)、獸藥和重金屬殘留是否超標(biāo)，以保證人類食用安全。 食用性植物產(chǎn)品檢驗(yàn) ? 由于科學(xué)的發(fā)達(dá)和人類對(duì)健康的重視，發(fā)達(dá)國(guó)家和一些發(fā)展中國(guó)家不僅對(duì)致病微生物十分關(guān)注，而且越來越重視藥物殘留和重金屬超標(biāo)的問題，限量的要求也越來越高。 ? 《 國(guó)