酯酶和過(guò)氧化物酶ppt課件-文庫(kù)吧資料
2024-10-25 05:43本頁(yè)面
【正文】 ：超氧化物歧化酶（ SOD）、過(guò)氧化氫酶（ CAT）、過(guò)氧化物酶（ POD）谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ GSHPX）等和非酶保護(hù)系統(tǒng)的抗壞血酸（ ASA）、維生素 E（ VE）類(lèi)胡蘿卜素（ Car）等的活性氧清除系統(tǒng)在果蔬成熟衰老中有著重要的作用。 ? 果蔬中活性氧物質(zhì)主要包括 H2O羥自由基（ ? 好氧生物能夠通過(guò)多種途徑產(chǎn)生各種自由基和活性氧，同時(shí)生物體內(nèi)又存在著清除這些自由基和活性氧的機(jī)制，在正常條件下這兩種機(jī)制處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，生物生長(zhǎng)正常。 ? 果實(shí)后熟衰老是一個(gè)復(fù)雜的生理生化過(guò)程， 自由基衰老學(xué)說(shuō)認(rèn)為：衰老與活性氧代謝平衡密切相關(guān)，這個(gè)平衡即活性氧物質(zhì)產(chǎn)生與清除的動(dòng)態(tài)平衡。 ? 過(guò)氧化物酶活力可能與果蔬成熟時(shí)葉綠素降解有關(guān)。 ) H2O2 + AH2 2 H2O + A ? 過(guò)氧化氫酶 2 H2O2 2 H2O + O2 ? 雖然過(guò)氧化物酶和過(guò)氧化氫酶在作用機(jī)制上有一些共同點(diǎn)，但是它們?cè)诿傅鞍捉Y(jié)構(gòu)上有顯著的差別。酯酶 (E )作用的底物是水溶性的，并且其最適底物是由短鏈脂肪酸 (≤C8) 形成的酯。 溶于水的酶作用于不溶于水的底物，反應(yīng)是在 2個(gè)彼此分離的完全不同的相的界面上進(jìn)行。 脂肪酶不同活性的發(fā)揮依賴(lài)于反應(yīng)體系的特點(diǎn) ，如在油水界面促進(jìn)酯水解，而在有機(jī)相中可以酶促合成和酯交換。 即底物體系的穩(wěn)定乳狀液，橄欖油甘油三油酸酯激烈攪拌乳化劑油 ???? ??????? CaOH 2脂酶水解甘油三酯的速度可通過(guò)下列方法測(cè)定 ： ① 在反應(yīng)體系中加入溶劑以終止反應(yīng)，然后滴定在反應(yīng)中釋出的脂肪酸； ② 采用 pHstat法，在 pH8連續(xù)地測(cè)定整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中游離脂肪酸含量隨時(shí)間而增加的速度； ③ 加入 NaHCO3與反應(yīng)中釋出的 H+作用釋出的 CO2，用量壓法測(cè)定； ④ 測(cè)定因脂肪酸的產(chǎn)生而導(dǎo)致的反應(yīng)體系表面張力的下降； ⑤ 采用生色底物，例如乙酸 α 萘酯。 五、脂酶活力的測(cè)定 ? 不溶解的甘油三酯的乳狀液是被優(yōu)先考慮的。到目前為止還沒(méi)有發(fā)現(xiàn) 2特異性脂酶。 R C O C HC H 2 O C RC H 2 O C ROOOH 2 OOOC H 2 O HO C RC H 2R C O C H H 2 OO C H 2 O HO HC H 2R C O C H R C O O H1,2（ 2,3） 甘油二酯 2甘油一酯 ? 由于 1,2（ 2,3） 甘油二酯，特別是 2甘油一酯是不穩(wěn)定的，它們分子中的酰基能轉(zhuǎn)位而分別生成 1,3甘油二酯和 1甘油一酯，因此， 1,3特異性脂酶長(zhǎng)時(shí)間地作用于脂肪時(shí)，脂肪中的甘油三酸酯將被完全水解而產(chǎn)生甘油。 R C O C HC H 2 O C RC H 2 O C ROOO3 H 2 O 3 R C O O H H O C HC H 2 O HC H 2 O H1,2（ 2,3） 甘油二酯， 1,3甘油二酯和甘油一酯是水解過(guò)程中的中間物。 四、微生物脂酶 ? 根據(jù)位置特異性可將微生物脂酶分為兩類(lèi)。 NaCl對(duì)于豬胰脂酶的活力是必需的，但是當(dāng) NaCl濃度超過(guò) 7mmol/L時(shí)，酶的活力開(kāi)始下降。 ? 由于脂酶作用于處在油 水界面的酯分子，因此，任何能增加底物 水界面的條件都能提高脂酶的活力。 二、底物特異性 豬胰脂酶作用于甘油酯時(shí)相對(duì)速度 : 甘油三酯＞甘油二酯＞甘油一酯 豬胰脂酶水解甘油三酯的進(jìn)程 a甘油三酯 b甘油二酯 c甘油一酯 d甘油 ? 豬胰脂酶作用于甘油三酯時(shí)的特異性表現(xiàn)為它選擇 1位和 3位的酯鍵作為作用點(diǎn)。 脂酶 —— 能水解不溶解或多相體系中處在油水界面的酯。 酶 底物絡(luò)合物 在均相反應(yīng)體系
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