儀器教學：從基因組到蛋白質(zhì)組-文庫吧資料
2025-05-20 00:05本頁面
【正文】 的鑒定結果 耐多藥菌株菌體蛋白比較蛋白質(zhì)組學分析 2DE分析 M.tb H37Rv株菌體蛋白2DE圖譜 pH:4 7 — — — — — 臨床全敏感菌株 耐多藥菌株 耐多藥菌株差異蛋白的鑒定結果 謝 謝 。 質(zhì)譜法 (Mass Spectroscopy, MS) 一般采用高速電子束撞擊氣態(tài)分子，將分解出的陽離子加速導入質(zhì)量分析器中，然后按質(zhì)荷比 (m/e)的大小順序進行收集和記錄下來，即得到質(zhì)譜圖。目前質(zhì)譜廣泛應用在蛋白質(zhì)的純度鑒定、分子量測定、序列測定、肽譜分析、二硫鍵、乙?；⑻腔?、磷?；?，以及非共價鍵結合等研究中。 蛋白質(zhì)活性位點的分析 蛋白樣品 SDS－ PAGE 轉(zhuǎn)移到 NC， PVDF Western Blot 陽性條帶 考馬斯亮藍 R250染色 對應條帶甲醇脫色測序 PSAPGLPVGT 抗原抗體免疫反應的高度特異性 PVDF膜作載體測序的高度敏感性 對于蛋白質(zhì)活性位點的分析和基因工程表達產(chǎn)物的快速鑒定，蛋白質(zhì)組學中極微量蛋白分析提供一個特別有用的新手段。 微量測序 在 Edman 降解的基礎上，目前已實現(xiàn)蛋白質(zhì)微量測序的自動化。因此需要進一步進行肽譜分析。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列分析 Edman 降解法測定的蛋白質(zhì)和多肽的氨基酸序列非常準確，但每次只能測定從 N端起 1－ 15個氨基酸。組成分析對雜質(zhì)污染較敏感。一種細胞或組織的蛋白質(zhì)組雙向電泳后可分離到幾千甚至上萬種蛋白質(zhì)，一般對它們采取分級鑒定，即先用快速、低廉的方法，再采用耗時、耗資的方法去鑒定蛋白質(zhì)。 各類層析分離技術 蛋白質(zhì)分析鑒定的基本要求（一 〕 檢查指標 分析方法 鑒定標準 分子量 SDS－ PAGE 電泳銀染色一條帶符合設計要求指標 等電點 等電聚焦電泳 電泳銀染色一條帶，掃描 95％以上 濃度 紫外分光光度法 濃度 (mg/ml)＝ OD260 純度 HPLC（或 FPLC） 層析一個峰（ 95％） Western Blot 有一條活性蛋白帶 蛋白質(zhì)分析鑒定的基本要求（二） 檢查指標 分析方法 鑒定指標 生物學活性 細胞學實驗 符合國際規(guī)定的比活性和 動物實驗 特定生物學檢測指標 結構分析 氨基酸組成分析 各種氨基酸組分比例符合預計標準 氨基酸序列分析 N－末端 15個氨基酸符合要求
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