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免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)培訓(xùn)講義(ppt53)-石油化工-文庫吧資料

2024-08-23 15:15本頁面
  

【正文】 抗體的結(jié)構(gòu) (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)中所用的抗體有兩種: 抗 血 清 — 多克隆抗體,是用提純的抗原 免疫動(dòng)物后從動(dòng)物血清制備得 到的 單克隆抗體 — 是指由單個(gè)產(chǎn)生特異抗體的 B淋巴細(xì)胞分化增殖形成的 細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗 體 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 1 免疫熒光技術(shù) 2 免疫酶技 術(shù) 3 免疫親和技 術(shù) 4 膠體金技 術(shù) 五、標(biāo)記物及其在光鏡和電鏡下的可見性 標(biāo)記物 使抗體或抗原 抗體復(fù)合物在 各種顯微鏡下 可的物質(zhì) (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 免疫熒光技術(shù)將 熒光素作為標(biāo)記物 使組織細(xì)胞中形成的抗原抗體復(fù)合 物在 熒光顯微鏡 下可見,從而顯示 抗原物質(zhì)的定位 ( 一) 免疫熒光技術(shù) (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 1 .異硫氰酸熒光素 2 .四乙基羅達(dá)明 3 .四甲基異硫氰酸羅達(dá)明 4 .藻紅蛋白 ▲ 分子量不同 ▲ 最大吸收光譜不同 ▲ 最大發(fā)射光譜不同 ▲ 與蛋白結(jié)合方式不同 ▲ 呈現(xiàn)不同的熒光: 黃綠色熒光 橙色熒光 橙紅色熒光 等 熒光素 能產(chǎn)生熒光并能作為染料的一類化合物 熒 光 : 在激發(fā)光(熒光顯微鏡提供)的照射下,能發(fā)出較激發(fā)光波長更長的可見光并隨照射停止而消失 熒光 顯微鏡 : 熒光顯微鏡的光源提供各種 激發(fā)光 ,如 紫外光、藍(lán)紫光(有不同的波長范圍) 使受檢標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)光 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 是將 酶作為標(biāo)記 物 使組織細(xì)胞中形成的抗原抗體復(fù)合物得到標(biāo)記,再通過酶細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生顯微鏡下可見的顯色物質(zhì),間接顯示抗原物質(zhì)的定位 (二) 免疫酶技術(shù) (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) ,顏色對(duì)比清晰 免疫酶技術(shù) 優(yōu)點(diǎn): 酶 抗原 一抗 二抗 酶標(biāo)二抗 酶 — 抗酶抗體復(fù)合物 抗酶抗體 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 酶標(biāo)抗體法 抗酶抗體法 復(fù)合物法 酶標(biāo)記的三種形式 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 用交聯(lián)劑將酶與抗體聯(lián)接成酶標(biāo)抗體 用于直接法和間接法 酶標(biāo)抗體法 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 用酶免疫動(dòng)物獲得抗酶抗體,通過二抗的橋梁作用把抗酶抗體連接在一抗上 ,再加入酶及其底物,達(dá)到用酶標(biāo)記抗原抗體反應(yīng)的效果 由于產(chǎn)生抗酶抗體的動(dòng)物與產(chǎn)生第一抗體的動(dòng)物是同一種屬,兩種抗體具有相同的免疫源性,所以在反應(yīng)中本來針對(duì)一抗的二抗也能與抗酶抗體結(jié)合 抗酶抗體法或稱酶橋法 (海量營銷管理培訓(xùn)資料下載 ) 先獲得抗酶抗體并將抗酶抗體與酶一起預(yù)先制成酶-抗酶抗體復(fù)合物 在反應(yīng)中,由二抗的橋梁作用把復(fù)合物與一抗連接在一起
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