【正文】 檸檬酸提取方法考試題型：填空題10題共10分；選擇題10題共10分；判斷題10題共10分，英漢詞語對照10分；簡答4題20分；分析討論題2題10分；應(yīng)用題（計(jì)算題和工藝流程及發(fā)酵控制）2題或3題共30分；。3)控制Fe2+含量，順烏頭酸酶活力低，檸檬酸進(jìn)一步代謝減少，使檸檬酸積累；4)檸檬酸積累使pH值降低，在低pH值下，順烏頭酸酶和異檸檬酸脫氫酶失活，就更有利于檸檬酸的積累并排出體外。谷氨酸提取的新工藝檸檬酸的發(fā)酵生產(chǎn)工藝以糖質(zhì)原料發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的常用菌種是黑曲霉黑曲霉檸檬酸的積累機(jī)制總結(jié)1)Mn2＋缺乏抑制了蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)NH4＋濃度升高，解除了對磷酸果糖激酶（PFK）的抑制，促進(jìn)了EMP途徑的暢通；2)丙酮酸羧化酶是組成型酶，不被調(diào)節(jié)控制，可以不斷地提供草酰乙酸。當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)耗盡酸濃度不再增加時(shí)，需及時(shí)放罐。這一階段，～，必須及時(shí)流加尿素，又為了促進(jìn)谷氨酸的合成需加大通氣量，并將發(fā)酵溫度提高到谷氨酸合成最適的溫度34～37℃。這個(gè)階段主要是菌體生長，幾乎不產(chǎn)酸，一般為12h左右?！?，必須流加尿素；又由于代謝旺盛，泡沫增加并放出大量發(fā)酵熱，故必須進(jìn)行冷卻，使溫度維持30～32℃。谷氨酸發(fā)酵過程發(fā)酵初期，即菌體生長的遲滯期糖基本沒有利用，尿素分解放出氨使pH值略有上升，一般為2～4h。菌種主要是棒狀桿菌屬、短桿菌屬、小桿菌屬及節(jié)桿菌屬的細(xì)菌。最常用的生產(chǎn)菌株為R30；第二步發(fā)酵采用的菌種為由大、小兩株細(xì)菌組成的混合菌種?！覈t(yī)藥工業(yè)史上首次出口技術(shù)。堿轉(zhuǎn)化雖然流程較長、投資大，但產(chǎn)品質(zhì)量好，故目前絕大部分工廠均采用堿轉(zhuǎn)化工藝。維生素C（2,3,4,5,6五羥基2己烯酸4內(nèi)酯）的合成方法主要有萊氏化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵合成法兩種。提?。汗I(yè)上回收α淀粉酶一般采用硫酸銨鹽析法。停止補(bǔ)料后68h，溫度不再上升，菌體衰老（80%菌體形成空胞），酶活不再提高，發(fā)酵即可結(jié)束。從10h左右開始補(bǔ)加，一般前期、后期少，中期大，根據(jù)菌體的生長情況來調(diào)整。溫度37℃，atm，通氣量0～12～VVM，12～VVM，VVM。種子培養(yǎng)維持罐溫37℃，～atm，10h后加大通風(fēng)，當(dāng)菌體處于對數(shù)生長期后期，立刻接種至大罐，種子培養(yǎng)一般14h左右。（4）可控制酶發(fā)酵生產(chǎn)過程，生產(chǎn)可連續(xù)化、自動(dòng)化。（2）微生物生長繁殖快，易提取酶，特別是胞外酶。過濾。⑧提煉采用溶媒萃取法，醋酸丁酯（BA）作溶媒。⑦過濾宜采用鼓式真空過濾器。⑥泡沫和消泡可用天然油脂如豆油、玉米油或用化學(xué)合成消泡劑“泡敵”（環(huán)氧丙稀環(huán)氧乙烯聚醚類）來消泡。④溫度控制一般前期25～26℃，后期23℃，以減少后期發(fā)酵液中青霉素的降解破壞?！ァ＃?）青霉素G的合成途徑（2）發(fā)酵工藝（3）發(fā)酵控制①％左右，pH上升時(shí)開始加糖。青霉素的生物合成過程：在青霉素發(fā)酵中，已知產(chǎn)黃青霉利用葡萄糖和氨，經(jīng)由a—氨基己二酸、半胱氨酸和纈氨酸在三肽合成酶的催化下合成三肽，異青霉素N合成酶催化發(fā)生環(huán)化生成異青霉素N，再與苯乙酸、苯乙胺、苯乙酰胺、苯乙酰甘氨酸等在異青霉素N?；D(zhuǎn)移酶催化進(jìn)行轉(zhuǎn)?；磻?yīng)，產(chǎn)生青霉素G。青霉素生產(chǎn)工藝青霉素簇和頭孢菌素簇是臨床上最為重要的抗生素，屬于β內(nèi)酰胺類抗生素。前次發(fā)酵21天，蒸餾，加酒糟，再發(fā)酵21天，再蒸餾。五糧液采用五種糧食（高梁、大米、糯米、小麥、玉米）為原料。純小麥制大曲，以糯玉米為原料。濃香型（廬型酒）：廬州老窖——產(chǎn)于四川瀘州市。釀酒師們說“起花了，三花！”就接酒。至60176。釀酒師們總結(jié)出了“觀花論酒”的經(jīng)驗(yàn)。啤酒生產(chǎn)中麥汁煮沸的目的：蒸發(fā)水分，濃縮麥汁；鈍化全部酶和麥汁殺菌；蛋白質(zhì)變性和絮凝；酒花有效組分的浸出；排除麥汁中特異的異雜臭氣。白葡萄酒用白葡萄或紅皮白肉葡萄的果汁制成，酒色呈淺黃、禾稈黃、金黃色或近似無色。蒸餾酒的酒精含量高。第二十章典型發(fā)酵產(chǎn)品介紹釀造酒包括黃酒、啤酒、葡萄酒，酒精含量比較低。在工業(yè)生產(chǎn)中，接觸成核有以下4種方式：(1)晶體與攪拌螺旋槳間的碰撞；(2)湍流下晶體與結(jié)晶器壁間的碰撞；(3)湍流下晶體與晶體的碰撞；(4)沉降速度不同，晶體與晶體的碰撞。②在低過飽和度下進(jìn)行，能得到優(yōu)質(zhì)結(jié)晶產(chǎn)品。其中較大的就是新的晶核。結(jié)晶包括三個(gè)過程：形成過飽和溶液；晶核形成；晶體生長。不穩(wěn)區(qū)：能自發(fā)產(chǎn)生晶核。穩(wěn)定區(qū)：溶液尚未飽和，沒有結(jié)晶的可能。溶液的過飽和度與結(jié)晶的關(guān)系：AB為飽和曲線；CD為過飽和曲線。飽和曲線和過飽和曲線飽和溶液：溶液恰好飽和，溶質(zhì)既無溶解也無結(jié)晶，即溶質(zhì)與溶液處于平衡狀態(tài)，此溶液稱為飽和溶液；未飽和溶液：若添加固體則固體溶解；過飽和溶液：超過飽和點(diǎn)的溶質(zhì)遲早要從溶液中沉淀出來。酒精發(fā)酵醪液蒸餾的理論基礎(chǔ)是拉烏爾定律。蒸發(fā)器的分類：分為膜式蒸發(fā)器和非膜式蒸發(fā)器兩大類。(4)蒸發(fā)器的操作溫度低，系統(tǒng)的熱損失小。(2)溶液沸點(diǎn)低，同樣蒸汽所需的傳熱面小。目的：降低溶液的沸點(diǎn)。凝膠色譜以凝膠為固定相，是一種根據(jù)各物質(zhì)分子大小不同而進(jìn)行分離的色譜技術(shù)，又稱為分子篩色譜（MolecularSieveChromatography，MSC）、空間排阻色譜或尺寸排阻色譜（SizeExclusionChromatography，SEC）。根據(jù)固定相和流動(dòng)相的極性與非極性的差別，分配色譜可分為正相色譜和反相色譜。分類吸附色譜分離是指混合物隨流動(dòng)相通過固定相（吸附劑）時(shí)，由于固定相對不同物質(zhì)的吸附力不同而使混合物分離的方法。當(dāng)注入欲分離的樣品時(shí)，流經(jīng)進(jìn)樣器貯液器的流動(dòng)相將樣品同時(shí)帶入色譜柱進(jìn)行分離，然后依先后順序進(jìn)入檢測器，記錄儀將檢測器送出的信號(hào)記錄下來，由此得到液相色譜圖。調(diào)整保留時(shí)間(AdjustedRetentionTime)：調(diào)整保留時(shí)間指組分的保留時(shí)間扣除死時(shí)間后的時(shí)間，、極性及吸附性質(zhì)的差異，以氣體為流動(dòng)相，以液體或固體為固定相從而達(dá)到分離混合物的色譜方法。死時(shí)間（Deadtime）：不被固定相吸附或溶解的惰性組分，從進(jìn)樣到出峰的峰頂點(diǎn)之間測得的時(shí)間,用tM表示。：兩種組分的理化性質(zhì)原本存在著微小的差異，經(jīng)過反復(fù)多次地吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程使微小差異累積起來，結(jié)果使吸附能力弱的組分先流出色譜柱，吸附能力強(qiáng)的組分后流出色譜柱，從而使各個(gè)組分得到了分離。當(dāng)多組分混合物隨流動(dòng)相流動(dòng)時(shí)，由于各組分物理化學(xué)性質(zhì)的差別，而以不同的速率移動(dòng)，使之分離。轉(zhuǎn)型：再生柱進(jìn)入再生區(qū)經(jīng)過稀硫酸轉(zhuǎn)型后在吸附區(qū)達(dá)到最佳的吸附能力?；靥睿和ㄟ^洗脫液回填壓出柱體內(nèi)的廢水和雜質(zhì)，以提高洗脫液純度。ISEP系統(tǒng)可以處理雜質(zhì)濃度較高的物料，保證產(chǎn)品具有穩(wěn)定的成分和濃度；采用多通道逆向流動(dòng)再生方式，減少了離子交換樹脂及、再生劑和洗滌水的用量。ISEP系統(tǒng)采用多柱(20/30交換柱)吸附以及在穩(wěn)定狀態(tài)下連續(xù)運(yùn)行。4）樹脂的再生：先用清水洗滌，然后用再生劑再生，最后用清水洗至所需pH值。用水洗凈殘留的NaCl，再根據(jù)樹脂類型和使用所需要的型號(hào)分別用酸和堿處理，最后調(diào)pH值至所需范圍。5）樹脂與交換離子間的輔助力凡能與樹脂間形成輔助力，如氫鍵、范德華力等輔助力的離子，樹脂對其吸附力就大；反之，能破壞這些輔助力的溶液就能容易地將離子從樹脂上洗脫下來。3）離子的水化半徑水化半徑較小的離子優(yōu)先吸附。離子交換樹脂的理化性能指標(biāo)1）外觀；2）交聯(lián)度；3）化學(xué)穩(wěn)定性；4）機(jī)械強(qiáng)度；5）交換量影響離子交換樹脂選擇性的因素1）離子價(jià)數(shù)離子交換樹脂總是優(yōu)先選擇高價(jià)離子，而低價(jià)離子被吸附時(shí)則較弱。樹脂按活性離子分類，活性離子是陽離子（和陽離子發(fā)生交換）就稱為陽離子交換樹脂；如果是陰離子，則稱為陰離子交換樹脂。骨架上的活性離子在水溶液中發(fā)生離解，可在較大的范圍內(nèi)自由移動(dòng)，擴(kuò)散到溶液中，同時(shí)，在溶液中的同類型離子也能從溶液中擴(kuò)散到骨架的網(wǎng)格或孔內(nèi)。第十七章離子交換法離子交換原理及分類離子交換樹脂是一種不溶于酸、堿和有機(jī)溶劑的固態(tài)高分子材料。于是有可能將水溶性的酶、蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)從一個(gè)水相轉(zhuǎn)移到另一水相中，從而完成分離任務(wù)。生產(chǎn)過程出現(xiàn)的乳濁液是水包油型（O/W），還是油包水型（W/O），主要由表面活性劑的性質(zhì)決定。稱之為分配系數(shù)K，（2）分離因數(shù)乳化和去乳化乳化：一種液體（分散相）分散在另一種不相混溶的液體（連續(xù)相）中的現(xiàn)象。分配定律和分離因數(shù)（1）分配定律：在一定溫度一定壓力的條件下，溶質(zhì)分配在兩個(gè)互不相溶的溶劑中，達(dá)到平衡時(shí)溶質(zhì)在兩相中的活度之比為一常數(shù)。“相似相溶”原理分子之間可以有兩方面的相似：一是分子結(jié)構(gòu)相似，如分子的組成、官能團(tuán)、形態(tài)結(jié)構(gòu)的相似；二是能量(相互作用力)相似，如相互作用力有極性的和非極性之分，兩種物質(zhì)如相互作用力相近，則能互相溶解。減輕膜污染的方法1）預(yù)處理2）改變膜的表面性質(zhì)市售的超濾器大致有四種型式：管式、中空纖維式、螺旋卷繞式和平板式。膜污染的消除：污染必須通過清洗的辦法才能消除。膜的污染：膜在使用中，盡管操作條件保持不變，但通量仍逐漸降低的現(xiàn)象。濃差極化：當(dāng)溶劑透過膜，而溶質(zhì)留在膜上，使膜面濃度增大，并高于主體中濃度，這種濃度差導(dǎo)致溶質(zhì)自膜面反擴(kuò)散至主體中，這種現(xiàn)象稱為濃差極化。包括微濾（MF）、超濾（UF）、納濾（NF）和反滲透（RO）四種過程?；驹硎呛Y孔分離過程。原理：蛋白質(zhì)是兩性電