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m第十四章基因工程(參考版)

2025-03-06 20:37本頁面
  

【正文】 方式 體細(xì)胞基因治療 (somatic cell gene therapy) 性細(xì)胞基因治療 (germ line gene therapy) 目 錄 1. 產(chǎn)前診斷 2. 攜帶者測試 3. 癥候前診斷 4. 遺傳病易感性 (五)遺傳疾病的預(yù)防 目 錄 演講完畢,謝謝觀看! 。 . 便于完全自動化操作,適合大面積、大人群普查。 三、重組技術(shù)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系 (二)生 物制藥 重組 DNA醫(yī)藥產(chǎn)品 產(chǎn) 品 功 能 組織胞漿素原激活劑 抗凝 血液因子 VIII 促進(jìn)凝血 顆粒細(xì)胞 巨噬細(xì)胞集落剌激因子 剌激白細(xì)胞生成 促紅細(xì)胞生成素 剌激白細(xì)胞生成 生長因子 (bFGF, EGF) 刺激細(xì)胞生長與分化 生長素 治療侏儒癥 胰島素 治療糖尿病 干擾素 (? 1b, ?2a, ? 2b, ?) 抗病毒感染及某些腫瘤 白細(xì)胞介素 激活、剌激各類白細(xì)胞 超氧化物歧化酶 抗組織損傷 單克隆抗體 利用其結(jié)合特異性進(jìn)行診斷試驗、腫瘤導(dǎo)向治療 乙肝疫苗 (CHO, 酵母 ) 預(yù)防乙肝 口服重組 B亞單位菌體霍亂菌苗 預(yù)防霍亂 目 錄 目 錄 基因診斷 (geic diagnosis)是 利用分子生物學(xué)及分子遺傳的技術(shù)和原理 , 在 DNA水平分析 、 鑒定遺傳疾病所涉及基因的置換 、 缺失或插入等突變 。 3180。C 重組體 目 錄 目 錄 4. 人工接頭 (linker)連接 由平端加上新的酶切位點,再用限制酶切除產(chǎn)生粘性末端,而進(jìn)行粘端連接 。 5180。 3180。 5180。 3180。 5180。 3180。 5180。 3180。 5180。 3180。 5180。 3180。C 重組體 載體自連 目的基因 自連 目 錄 目 錄 3. 同聚物加尾連接 在末端轉(zhuǎn)移酶 (terminal transferase)的作用下,在 DNA片段末端加上同聚物序列、制造出粘性末端,再進(jìn)行粘端連接。C GATCC G G CCTAG + 目的基因用 Bam HⅠ 切割 GCC TA GGCC TA GGATCCGGATCCG載體 DNA用 Bam HⅠ 切割 GCC TA GGCC TA GGA TC CGGA TC CG重組體 GCC TA GGCC TA GGA TC CGGA TC CGGCC TAGCC TAGA TC CGGA TC CG載體自連 目的基因自連 同一限制酶切位點連接 目 錄 目 錄 Bam HⅠ Bg lⅡ GGATCC CCTAGG AGATCT TCTAGA G CCTAG GATCC G + + A TCTAG GATCT A 不同限制酶切位點(配伍末端)的連接 配伍末端的連接情況和同一限制酶切位點連接相似。 目 錄 目 錄 λ噬菌體 DNA改造系統(tǒng) λgt系列(插入型,適用 cDNA克隆) EMBL系列(置換型,適用基因組克隆) 2. 噬菌體 (phage) M13噬菌體 DNA改造系統(tǒng)(含 lacZ基因) M13mp系列 pUC系列 目 錄 M13噬菌體 pUC系列的物理圖譜 目 錄 酵母人工染色體 (yeast artificial chromosome, YAC) 細(xì)菌人工染色體 (bacterial artificial chromosome, BAC) 動物病毒 DNA改造的載體 (如腺病毒,腺病毒相關(guān)病毒,逆轉(zhuǎn)錄病毒) 其他 目 錄 二 、 重組 DNA技術(shù)基本原理 克隆基本過程 目的基因的獲取 DNA導(dǎo)入受體菌 外源基因與載體的連接 克隆載體的選擇和構(gòu)建 重組體的篩選 克隆基因的表達(dá) 以 質(zhì) 粒 為 載 體 的 DNA 克 隆 過 程 目 錄 目 錄 (一)目的基因的獲取 1. 化學(xué)合成法 要求:已知目的基因的核苷酸序列或其產(chǎn)物的氨基酸序列 。 目 錄 載體的選擇標(biāo)準(zhǔn) ? 能自主復(fù)制; ? 具有兩個以上的遺傳標(biāo)記物,便于重組體的篩選和鑒定; ? 有克隆位點(外源 DNA插入點),常具有多個單一酶切位點,稱為多克隆位點; ? 分子量小,以容納較大的外源 DNA。 常用載體 質(zhì)粒 DNA
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