果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)(ppt42頁)(參考版)
2025-01-06 18:55本頁面
【正文】 八 ,酶抑制率法對部分農(nóng)藥的檢出限 農(nóng)藥名稱 檢出限 /(mg/kg) 農(nóng)藥名稱 檢出限 /(mg/kg) 敵敵畏 氧化樂果 對硫磷 甲基異柳磷 辛硫磷 滅多威 甲胺磷 丁硫克百威 馬拉硫磷 敵百蟲 樂果 呋喃丹 九 , 酶抑制率方法的符合率 ? 在檢出的抑制率 ≥ 50%的 30份以上樣品中 ,經(jīng)氣相色譜法驗證 ,陽性結(jié)果的符合率在80%以上 . 十 ,酶活性的測定方法 ? 酶抑制率法中 ,我們僅使用了四種試劑 ,其中酶試劑在購買 ,運輸 ,使用和儲存中 ,容易造成失活 ,活性降低等現(xiàn)象 。 2 檢測結(jié)果說明 檢測結(jié)果中有時抑制率會出現(xiàn)以下兩種情況： ⑴抑制率出現(xiàn)負值 ⑵抑制率大于 100％ 只要抑制率在 10%和 110％之間，均屬正常情況，按照測定結(jié)果要求進行判定。陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗 2次以上。 ? 果菜及水果類：用取樣器沿果菜表面處取約 1厘米厚的樣本。 ? 保存：固體及溶解后的提取試劑均可在常溫下保存。 ? 保存：固體及溶解后的顯色劑均應(yīng)在凍箱的冷藏室內(nèi)（ 35℃ ）保存。溶解后如長時間不用，應(yīng)貯存在凍箱的冷凍室內(nèi)，用時解凍。 2. 底物 (硫代乙酰膽堿 ) 配制：取 25mg底物 ,加 溶解 ,搖勻后置 4℃ 冰箱內(nèi)保存 .保存期不超過兩周 。 ? B：氨基甲酸酯類： ? 克百威、涕滅威、滅多威、丙硫克百威、丁硫克百威（ ）。 ⑵活性 ? 指酶在常態(tài)下，能完成物質(zhì)的合成或分解 ⑶適宜的條件 ? PH＝ 8 溫度 3738℃ 2 乙酰膽堿酯酶的酶促反應(yīng) ? 酶 + 底物 (硫代乙酰膽堿 )→ 硫代膽堿 +乙酸 ? 乙酰膽堿酯酶 +擬除蟲菊酯類等農(nóng)藥 → 酶活性不被抑制 ? 酶 顯色劑 ? 底物 ――→ 分解產(chǎn)物 ――――→ 黃色溶液 3 存在有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的酶反應(yīng) ? 乙酰膽堿酯酶 +有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥 → 酶活性被抑制 ? 顯色劑 ? 酶 ――→ 無分解產(chǎn)物 ―――→ 無色溶液 ? 底物 ―――― → ∣ 顯色劑 ? (硫代乙酰膽堿 ) ――→ 少量分解產(chǎn)物 ―――→ 淺黃色溶液 ? → 活性被抑制 → 含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥 ? 底物 +丁酰膽堿酯酶 +樣本 ―― ? → 活性正常 → 不含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥 ? 在一定條件下 ,有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的正常功能有抑制作用 ,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān) .在正常情況下 ,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物 (乙酰膽堿 )水解 ,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng) ,產(chǎn)生黃色物質(zhì) ,用分光光度計在 412nm處測定吸光度隨時間的變化值 ,計算出抑制率 ,通過抑制率可以判定出樣品中
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