農(nóng)業(yè)微生物學(xué)河南農(nóng)業(yè)大學(xué)(參考版)
2024-12-31 12:03本頁(yè)面
【正文】 用來(lái)培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的微生物，或用以 富集（數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)） 和分離某中微生物 . EMB(Eosin Methylene Blue) Figure 14. Left: Escherichia coli cells. Right: E. coli colonies on EMB Agar. 學(xué)習(xí)要點(diǎn) ? 微生物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ? 微生物的營(yíng)養(yǎng)類型及特征 ? 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的四種方式及特點(diǎn) ? 培養(yǎng)基的概念及類型 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。 ★ 5 按特殊用途劃分 ①基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (minimum medium): 是含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基； ②選擇性培養(yǎng)基 (selective medium)： 是根據(jù)某種或某一類群微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需要，或?qū)δ撤N化合物的敏感性不同而設(shè)計(jì)出來(lái)的一類培養(yǎng)基。可依使用目的不同而制成斜面、平板等形式 . ②半固體培養(yǎng)基 (semisolid medium)： 在液體培養(yǎng)基中加入 ％的瓊脂構(gòu)成的培養(yǎng)基。為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)表面。 如高氏培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等 . ③半合成培養(yǎng)基 (semidefined medium)： 在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加些天然成份，以更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的需要 .如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基 ★ 4 按制備后培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來(lái)分 ③液體培養(yǎng)基 (liquid medium)： 液體培養(yǎng)基不含任何凝固劑，菌體與培養(yǎng)基充分接觸，操作方便，常用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)以及在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物生理代謝等基本理論的研究工作。缺點(diǎn)是成分不清。 利用 化學(xué)成分還不完全清楚或不恒定 的天然物質(zhì)，（如動(dòng)植物、微生物體及其提取物 等）制成的培養(yǎng)基，如 細(xì)菌培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。 NaNO3 3g。 FeSO4 水 1000ml。 KCl 。 FeSO4?7H2O 水 1000ml。 高壓蒸氣滅菌 一般培養(yǎng)基 : Kg/cm2, ℃ , 1530 min 含糖培養(yǎng)基 : Kg/cm2, ℃ , 1530 min 過(guò)濾除菌 , 分別滅菌 , 間歇滅菌的應(yīng)用 附：培養(yǎng)基的滅菌 附圖：過(guò)濾滅菌 附：器皿的滅菌及無(wú)菌室的消毒 器皿的滅菌： 干熱空氣： 160℃ ， 2 小時(shí) 無(wú)菌室的消毒： 紫外光 化學(xué)藥物熏蒸（苯酚；高錳酸鉀 +甲醛） 二、培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用 ★ 1 根據(jù)所培養(yǎng)微生物的微生物類群來(lái)分 ①細(xì)菌培養(yǎng)基 ②放線菌培養(yǎng)基 ③霉菌培養(yǎng)基 ★ 2 根據(jù)培養(yǎng)目的來(lái)分 ①種子培養(yǎng)基 (seed culture medium) ②發(fā)酵培養(yǎng)基 (fermentation medium) ★ 1 細(xì)菌培養(yǎng)基 —— 營(yíng)養(yǎng)肉湯（ nutrient broth)： 牛肉膏 3g； 水 1000ml； 蛋白胨 5g ； pH ~ 放線菌培養(yǎng)基 —— 高氏 1號(hào)： 可溶性淀粉 20g； KNO3 1g。 對(duì)微生物影響最大的是：分子氧的濃度 培養(yǎng)基中常用的還原劑：巰基乙酸 、 抗壞血酸 、 硫化氫 、半胱氨酸 、 谷胱甘肽 、 二硫蘇糖醇等 。能在高鹽環(huán)境（ ~） 生長(zhǎng)的微生物常被稱為 嗜鹽微生物（ Halophiles） 。 （三）物理化學(xué)條件適宜 （ 1） pH: 各類微生物的最適生長(zhǎng) pH值各不相同 ： 在微生物的生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中 ， 由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累 ， 培養(yǎng)基的初始 pH值會(huì)發(fā)生改變 ， 為了維持培養(yǎng)基 pH值的相對(duì)恒定 ， 通常采用下列兩種方式： 內(nèi)源調(diào)節(jié) ：在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽（ CaCO3） ； 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的碳氮比 。 經(jīng)濟(jì)節(jié)約： 根據(jù)培養(yǎng)目的選擇原料及其來(lái)源 （一）培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn) 按微生物的主要 類群 來(lái)說(shuō)，它們所需要的培養(yǎng)基成分也不同： 細(xì) 菌： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 LB (LuriaBertani) 放線菌： 高氏一號(hào)培養(yǎng)基 真 菌： 察氏合成培養(yǎng)基 PDA (PotatoDextroseAgar) 酵母菌； 麥芽汁 （二）營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng) ● 濃度過(guò)高 —— 微生物的生長(zhǎng)起抑制作用， 濃度過(guò)小 —— 不能滿足微生物生長(zhǎng)的需要。 營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)： 營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng) 3。 一、培養(yǎng)基的配制原則 1。一旦配成必須立即滅菌。 基團(tuán)移位 模式圖 細(xì)胞膜外 細(xì)胞膜內(nèi) S S S S 細(xì)胞膜 Enz2 Enz2 Enz2 Enz2 S S HPr P ~ P HPr ~ Enz1+ PEP 丙酮酸 四種運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方式的比較 比較項(xiàng)目 單純擴(kuò)散 促進(jìn)擴(kuò)散 主動(dòng)運(yùn)輸 基團(tuán)轉(zhuǎn)位 特異載體蛋白 運(yùn)輸速度 物質(zhì)運(yùn)輸方向 胞內(nèi)外濃度 運(yùn)輸分子 能量消耗 運(yùn)輸后物質(zhì)的結(jié)構(gòu) 無(wú) 慢 由濃至稀 相等 無(wú)特異性 不需要 不變 有 快 由濃至稀 相等 特異性 不需要 不變 有 快 由稀至濃 胞內(nèi)濃度高 特異性 需要 不變 有 快 由稀至濃 胞內(nèi)濃度高 特異性 需要 改變 第四節(jié) 培養(yǎng)基 (medium) 定義 ：根據(jù)微生物的營(yíng)養(yǎng)要求，由人工配制的、微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。這時(shí)，糖被 PHPr上的磷酸激活，并通過(guò)酶 2的作用將 糖 磷酸 釋放到細(xì)胞內(nèi)。 酶 1 PEP+HPr 丙酮酸 +PH
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