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正文內(nèi)容

第5講基因工程(參考版)

2024-10-11 15:34本頁面
  

【正文】 哈哈, 下 課 了 ! 。 轉(zhuǎn)基因植物 亦已在大田中廣為播種。 ( 3)轉(zhuǎn)基因動物和植物 轉(zhuǎn)基因動物首先在 小鼠 獲得成功。 ( 2)提高奶酪產(chǎn)量 生產(chǎn)奶酪的 凝乳酶 傳統(tǒng)上來自哺乳小牛的胃。 基因工程的最后一步 , 是把所獲得的蛋白質(zhì)分離純化 , 得到蛋白質(zhì)產(chǎn)品 。 蛋白質(zhì)的分離純化 ——生物分離技術(shù) 重組 DNA 分子進入寄主細(xì)胞后 ,其中的目的基因能否表達 , 表達效率高低 , 還有很大差別 。若受體細(xì)胞是細(xì)菌,通常稱 轉(zhuǎn)化 ;若受體細(xì)胞是 動 /植 物細(xì)胞,通常稱 轉(zhuǎn)染 。 此酶識別一定堿基序列,有的還可切出 “粘性”末端 ,使得目的基因和載體的連接非常容易。 其次要把目的基因“裝”到載體中去。 載體有好幾種,常用的有: 質(zhì)粒 --環(huán)狀雙鏈小分子 DNA,適于做小片斷基因的載體。 經(jīng)過 20 次循環(huán) ,即可擴增 106 倍 , 總共只需 幾個小時 。 FLASH: PCR PCR 的三個步驟為一次循環(huán) , 約需5- 10 分鐘 。 第二步 —— 50 0 C 溫度下,引物 DNA結(jié)合在適于 配對 的 DNA片斷上。 PCR 法 ,全稱 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ,是近年來開發(fā)出來的基因工程新技術(shù),它的最大優(yōu)點是把目的基因的尋找和擴增,放在一個步驟里完成。獲得相當(dāng)數(shù)量的目的基因后,才能繼續(xù)下一步操作。 探針 DNA 片斷從何而來? 根據(jù)目的蛋白的氨基酸序列,只要其中 N-端 15- 20 個氨基酸序列,按三聯(lián)密碼轉(zhuǎn)為 4060 核苷酸序列,人工合成,即為 探針 DNA 片斷 。 ( 5)探針 DNA 片斷已用放射性元素 標(biāo)記,使膠片 感光 后可看出。 ( 3)電泳后,通過 印跡 技術(shù)轉(zhuǎn)到酯酰 纖維薄膜上,以便操作。 ( 1)獲得目的基因 印跡法的主要步驟: ( 1) 基因文庫 - DNA 用 限制性內(nèi)切 酶 處理。如何從中把需要的基因找出來? 采取 “ 釣 ” 的辦法。
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