細胞工程-動物細胞工程(參考版)
2024-08-26 20:38本頁面
【正文】 制備單克隆抗體 B細胞 抗體 細胞融合 滅活病毒 雙親細胞 分泌抗體 無限增殖 原代 傳代 50 例 3： ：（ ） A．動物細胞融合 B．胚胎移植 C．動物細胞培養(yǎng) D．核移植 Ｃ 課堂練習 。 原理： 培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞 加入氨基嘌呤后 ,使 D合成的途徑阻斷 ,所以僅 D合成途徑的骨髓瘤細胞或彼此融合的細胞就不能增殖 ,但雜種細胞則可以利用淋巴細胞中的 S途徑合成 DNA而增殖 B 體外培養(yǎng) 骨髓瘤細胞 雜交瘤細胞 足夠數(shù)量的細胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術的方法，設計的生產(chǎn)破傷風桿菌單克隆抗體的實驗方案 該方案能達到預期效果嗎？為什么？ 圖中 B為 ________過程，常用_________作為誘導劑，該細胞繼承 ___________的遺傳特性，既能__________,又能 ___________。 （ 2）設計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出 雜種細胞，并說原理。 鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有 S途徑 ，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。 具有一定的流動性 C 有絲 不變 抗體能與抗原發(fā)生特異性結合的特點 [例題 2] （ 1）在用動物細胞融合技術制備單克隆抗體時， 將抗原注射到小鼠體內，可獲得 (多選 ) （ ） A． T淋巴細胞 B．效應 B淋巴細胞 C．抗體 D．記憶細胞 （ 2）下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中， 正確的是 (多選 ) （ ） A． B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般需要滅活的仙臺 病毒或聚乙二醇誘導 B．融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克 隆抗體 C．體外培養(yǎng)時，一個 B淋巴細胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不 能無限增殖 D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強，靈敏度高， 優(yōu)越性明顯 BCD ACD 已知細胞 合成 DNA有 D和 S兩條途徑 ，其中 D途徑能被 氨基嘌呤 阻斷。 (2)單克隆抗體的準確定義應為 ( ) A．一類特殊抗體 B．無性繁殖系 C．單一抗體細胞的無性繁殖第產(chǎn)生的抗體 D．單一抗體細胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體 (3)雜交瘤細胞繁殖進行的是 _______分裂，其遺傳性狀 __________。實驗過程如圖所示。） 單克隆抗體的優(yōu)點： 特異性強，靈敏度高，可大量制備。（單克隆抗體：導向作用。優(yōu)點：療效高，毒副作用小。第 2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞群。 單抗的制備過程要點： 3）、為何要進行兩次篩選？ 4）、如何進行第 2次篩選？ 培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個雜交瘤細胞。 6. 選擇所需要的雜交瘤克隆細胞群， 體外培養(yǎng) 或注射到 小鼠腹腔內增殖 。） 5. 第二次篩選：在“ 多孔培養(yǎng)板上 ”培養(yǎng) 雜交瘤細胞系列 ， 每孔只放一個雜交瘤細胞。但 BG雜交瘤細胞也是一個系列：如 B1G,B2GBnG。BG。注意 B淋巴細胞是一個系列。 如何篩選出培養(yǎng)液中的雜交瘤細胞？ 5 骨髓瘤細胞 多孔細胞培養(yǎng)板 有限稀釋法 將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，在 每個孔只有一個雜交瘤細胞 的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。 人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交細胞中可利用淋巴細胞中的 S途徑合成 DNA而增殖。 鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有 S途徑，但能不斷分裂增殖， 將兩種細胞在培養(yǎng)液中混合，加聚乙二醇促融，在培養(yǎng)液中有 種細胞。 B淋巴細胞 骨髓瘤細胞 動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng) 大量增殖 特定抗體 單克隆抗體制備過程 注射特定抗原 骨髓瘤細胞 在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 免疫的 B淋巴細胞（漿細胞） 細胞培養(yǎng) 誘導融合 雜交瘤細胞 專一抗體檢驗 專一抗
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