【正文】 ，張志雄，1995，8（2）：185～186.，何俊，鄭善曲. 重慶地區(qū)2005例健康人靜脈血血細(xì)胞各參數(shù)參考值調(diào)查分析. 廠礦醫(yī)藥衛(wèi)生，2000， 16（3）：219～220.[思考題]1．綜合實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果，與紅、白細(xì)胞的正常值相對(duì)照，有何變異？為什么？2．為什么機(jī)體正常血細(xì)胞數(shù)可維持在相對(duì)穩(wěn)定的數(shù)量水平？3．試討論紅細(xì)胞的正常值及其應(yīng)用意義？白細(xì)胞數(shù)量的變化有何生理意義？4．實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果，與血紅蛋白正常值相對(duì)照，有何變異？為什么？血紅蛋白含量相對(duì)穩(wěn)定有何生理意義？試討論血紅蛋白含量與生理機(jī)能的關(guān)系。[建議實(shí)驗(yàn)課題方向][參考文獻(xiàn)]，（第二版）. 高等教育出版社.，嚴(yán)定友，. 科學(xué)出版社. .. 衛(wèi)生檢驗(yàn)員. 人民衛(wèi)生出版社：1998年. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）.東南大學(xué)出版社：1997年。10．ABO血型鑒定時(shí)，注意是否有溶血，切不可將溶血當(dāng)作凝集。7H2O）二份加NaOH一份，在研缽中研細(xì)，配成100g／L的懸液。HiCN廢液遇酸則產(chǎn)生氰化鉀。應(yīng)注意廢液處理，可用除毒液除毒。測(cè)定后的廢液不能與酸性溶液混合，因?yàn)榍杌浻鏊峥僧a(chǎn)生劇毒的氰氫酸氣體。若進(jìn)入體內(nèi)，高鐵氰化鉀氧化血紅蛋白，生成高鐵血紅蛋白。9．廢液的處理：氰化鉀是劇毒品，配制稀釋液時(shí)要按劇毒品管理程序操作。應(yīng)該貯存在棕色的試劑瓶中， 4℃冰箱保存一般可用數(shù)月，但不能在0℃以下保存，因?yàn)榻Y(jié)冰可引起高鐵氰化鉀還原，使溶液褪色失效。6．血紅蛋白試劑中，氰化鉀為劇毒藥品，雖然濃度較低，但配制和保存過(guò)程中必須提高警惕，防止污染。4．如果遇冷凝集現(xiàn)象，可把標(biāo)本置37℃溫箱中溫育幾分鐘，搖勻后計(jì)數(shù)。各種稀釋液嚴(yán)防混入雜質(zhì)或有細(xì)菌生長(zhǎng)。2．所用吸管、試管、計(jì)數(shù)板等必須十分干凈，清洗吸管時(shí)按照蒸餾水（兩次）→ 95%酒精（兩次）→ 乙醚（兩次）的方法清洗。血細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量與年令、性別、性周期、營(yíng)養(yǎng)狀況、活動(dòng)情況、季節(jié)變化等有關(guān)，營(yíng)養(yǎng)不良或長(zhǎng)期饑餓可引起血細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白量顯著降低。紅細(xì)胞數(shù)量正常情況下保持相對(duì)穩(wěn)定的。另外，高球蛋白血癥和白細(xì)胞明顯增高的標(biāo)本可導(dǎo)致反應(yīng)液渾濁而影響結(jié)果。HiCN法操作簡(jiǎn)便，試劑單一，除SHb外所有血紅蛋白均可迅速轉(zhuǎn)化為HiCN，顯色快且穩(wěn)定，可以根據(jù)吸光度直接計(jì)算結(jié)果，因此被列為國(guó)際血紅蛋白測(cè)定的參考方法，也是我國(guó)推薦的首選方法，但其試劑中氰化鉀為劇毒藥品，須妥善保存、處理。[方法評(píng)估]采用顯微鏡目視計(jì)數(shù)法為血液紅、白細(xì)胞數(shù)量測(cè)定的最常用的基本方法，目前雖有各種自動(dòng)化分析方法，但該方法由于經(jīng)典、方便、實(shí)用，仍較廣泛用于血液檢驗(yàn)和科研實(shí)踐中。4．用消毒過(guò)的牙簽一端蘸取少許的血液迅速與雙凹片的抗A或抗B試劑混勻，然后用牙簽的另一端蘸取少許的血液迅速與雙凹片另一端的試劑混勻。2．在兩端的凹陷內(nèi)分別加一滴生理鹽水。（3）251是稀釋倍數(shù)。4．計(jì)算： 血紅蛋白（g/L）= 測(cè)定管光密度（64458/44000）251 = 測(cè)定管光密度 式中：（1）64458 是目前國(guó)際公認(rèn)的血紅蛋白分子量。3．將混合液放置3分鐘以后，倒入光徑1cm比色皿，用分光光度計(jì)在540nm進(jìn)行比色。三、血紅蛋白含量的測(cè)定（分光光度計(jì)測(cè)量）1．，作為測(cè)定管。3．以標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，調(diào)節(jié)斜率使數(shù)顯顯示出標(biāo)準(zhǔn)品的含量。二、血紅蛋白含量的測(cè)定（血紅蛋白儀測(cè)量）1．取全血20μl，加到5ml的HiCN試劑中，充分混合，靜置5min。計(jì)算公式為：白細(xì)胞數(shù)/ mm3 = 4個(gè)大方格白細(xì)胞數(shù)稀釋倍數(shù)/ 計(jì)數(shù)的4 個(gè)大格容積（3）+血20μL（）/，為20倍。（2）計(jì)數(shù)室5 5 = mm3。圖153 血細(xì)胞計(jì)數(shù)方式（實(shí)心圈表示計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞，空心圈表示不應(yīng)計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞）紅細(xì)胞數(shù)目：將5個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞總數(shù)乘以10，000．即得每立方mm血液中紅細(xì)胞總數(shù)。計(jì)數(shù)室內(nèi)細(xì)胞分布要均勻。計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)數(shù)中央大方格四角的四個(gè)中方格和中央的一個(gè)中方格（共5個(gè)中方格）內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)循一定的路徑以免遺漏或重復(fù)。使視野較暗）。但必須注意，如滴入過(guò)多時(shí)，流出室外凹溝中，易造成蓋玻片浮起，體積不準(zhǔn)；過(guò)少時(shí)，經(jīng)多次充液，易造成氣泡，所以都應(yīng)洗去重新充液。因此，放上蓋玻片后，此為計(jì)數(shù)室的高度。四角的大方格每個(gè)又分為16個(gè)中方格，這是用以計(jì)數(shù)白細(xì)胞的。其中央橫溝的兩邊各有一計(jì)數(shù)室，兩計(jì)數(shù)室的劃分完全相同（圖151）。（1）熟悉血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的構(gòu)造：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板為一長(zhǎng)方形厚玻璃板。[方法與步驟]一、紅、白血細(xì)胞計(jì)數(shù)，用l 。由于這種現(xiàn)象，臨床上在輸血前必須進(jìn)行血型鑒定．以確保安全輸血；在血型系統(tǒng)中最重要的是ABO血型系統(tǒng)(只要ABO血型系統(tǒng)相合，％)，其次為Rh系統(tǒng)。血型通常是指紅細(xì)胞的血型．是根據(jù)存在于紅細(xì)胞膜外表面的特異性抗原(鑲嵌于紅細(xì)胞膜上的特異性糖蛋白)來(lái)確定的，這種抗原或稱凝集原是由遺傳基因決定的。氰化高鐵血紅蛋白法 血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白（Hi），再與氰結(jié)合成穩(wěn)定的紅棕色氰化高鐵血紅蛋白（HiCN），在規(guī)定的波長(zhǎng)540nm和液層厚度的條件下，具有一定的吸光系數(shù)，根據(jù)其吸光度，即可求得血紅蛋白濃度。將一定量的血液經(jīng)一定倍數(shù)的等滲鹽水稀釋后，置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)，計(jì)數(shù)一定容積溶液內(nèi)的血細(xì)胞、白細(xì)胞，然后推算出1mm3或1L血液內(nèi)的紅、白細(xì)胞數(shù)。[基本原理]本實(shí)驗(yàn)采用稀釋法計(jì)數(shù)單位容積血液內(nèi)的紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)。三、思考題根據(jù)實(shí)驗(yàn)錄像，簡(jiǎn)述家兔實(shí)驗(yàn)手術(shù)步驟及每步的主要操作過(guò)程。③導(dǎo)管內(nèi)肝素濃度不宜過(guò)低，以防導(dǎo)管內(nèi)凝血，堵塞導(dǎo)管。②動(dòng)脈導(dǎo)管頂部要光滑，不能過(guò)尖，以防刺破動(dòng)脈壁，引起大出血。注意：①頸總動(dòng)脈剪口不宜過(guò)大或過(guò)小，過(guò)小時(shí)導(dǎo)管不易插入，過(guò)大時(shí)易于使頸總動(dòng)脈插斷。角剪開(kāi)頸總動(dòng)脈，剪口的大小約為頸總動(dòng)脈直徑的1/3～1/2，將動(dòng)脈導(dǎo)管向心臟端插入頸總動(dòng)脈1～，用絲線結(jié)扎動(dòng)脈與動(dòng)脈導(dǎo)管，并固定導(dǎo)管，以防導(dǎo)管滑脫（見(jiàn)圖62）。用一根絲線結(jié)扎游離頸總動(dòng)脈段遠(yuǎn)心端，用動(dòng)脈夾夾閉其近心端，另一絲線置于結(jié)扎部位與動(dòng)脈夾之間。術(shù)者用左手拇、食指捏起頸部皮膚切口緣和部分頸前肌肉稍向外側(cè)牽拉，中指和無(wú)名指從外面將背側(cè)皮膚向腹側(cè)輕輕頂起，即可清晰顯露頸總動(dòng)脈；右手持玻璃分針順頸總動(dòng)脈走行方向輕輕劃開(kāi)其周圍的結(jié)締組織，游離頸總動(dòng)脈2～3cm，并在其下方穿兩根絲線備用。體外抗凝還可用6%的枸櫞酸鈉溶液。所需實(shí)驗(yàn)器材與上述“氣管插管”的相同，但需增加動(dòng)脈導(dǎo)管、動(dòng)脈夾、三通管、1%肝素生理鹽水。b 初學(xué)者手術(shù)操作要細(xì)致，力戒粗暴，分離頸前肌群時(shí)，要順著肌纖維方向，而且止血鉗插入不宜過(guò)深，以防損傷深層的氣管和血管。注意：a由于頸部大血管和重要神經(jīng)均在中線兩側(cè)，而且愈往頸根部方向，愈向中線靠攏，因此頸部皮膚切口，皮下組織和頸前肌群的分離均一定要沿正中線進(jìn)行。然后術(shù)者左手輕提棉線，右手持組織剪在喉部下方2～3cm處的氣管環(huán)狀軟骨之間橫向剪開(kāi)氣管前壁約1/3氣管直徑，使整個(gè)氣管切口成一“⊥”形。用止血鉗反復(fù)撐開(kāi)組織的方法，沿正中線縱向分離皮下組織，暴露頸前肌肉群，再沿正中線順肌肉走行方向鈍性分離肌肉，暴露氣管。氣管插管所用器材包括哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、兔或大鼠手術(shù)臺(tái)、棉繩、紗布、氣管插管、注射器、20%氨基甲酸乙酯或1%戊巴比妥鈉。8．插管技術(shù)（1）氣管插管 氣管插管是指將一個(gè)金屬、玻璃或塑料Y形或T形導(dǎo)管插入動(dòng)物氣管，普遍應(yīng)用于哺乳動(dòng)物急性實(shí)驗(yàn)中。分離家兔和大鼠較細(xì)的神經(jīng)、血管時(shí)，宜用玻璃分針完成，方法是用玻璃分針順著神經(jīng)、血管走行方向輕輕劃開(kāi)神經(jīng)血管之間、神經(jīng)神經(jīng)之間、動(dòng)脈靜脈之間及周圍的結(jié)締組織，使神經(jīng)、血管游離。分離狗的較大神經(jīng)、血管時(shí)（如頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)），可用止血鉗分離，方法是順著神經(jīng)、血管走行方向輕輕反復(fù)撐開(kāi)止血鉗，將其與周圍組織分離。其中迷走神經(jīng)最粗，交感神經(jīng)次之，減壓神經(jīng)最細(xì)（細(xì)如兔毛）且常與交感神經(jīng)或迷走神經(jīng)緊貼，這時(shí)可反復(fù)變換中指位置，使減壓神經(jīng)清晰顯露，然后按照減壓神經(jīng)、交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、頸總動(dòng)脈的順序分離各神經(jīng)和血管，并穿過(guò)不同顏色的彩線做標(biāo)記。分離神經(jīng)、血管時(shí)，應(yīng)首先明確其解剖位置及其與周圍組織器官之間的關(guān)系，仔細(xì)辨認(rèn)所要分離的神經(jīng)、血管，確定后再行分離。7．神經(jīng)、血管分離技術(shù)電刺激各神經(jīng)干、引導(dǎo)記錄神經(jīng)干放電、各種血管插管均需事先將它們游離，故神經(jīng)、血管分離技術(shù)是機(jī)能實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)之一。較大血管損傷出血時(shí)，可用止血鉗夾住出血點(diǎn)及周圍的少量組織，然后用絲線結(jié)扎止血，結(jié)扎后將血管鉗取下并剪去多余絲線。止血的方法酌情而定。順肌纖維或神經(jīng)血管走行方向反復(fù)撐開(kāi)血管鉗，分離筋膜或腱膜，必要時(shí)用血管鉗夾持并提起筋膜或腱膜，用組織剪剪開(kāi)一個(gè)小口，然后順皮膚切口的方向剪開(kāi)擴(kuò)大剪口，直到需要暴露的器官。切開(kāi)皮膚時(shí)，術(shù)者一般站在動(dòng)物右側(cè)，也可根據(jù)需要站在距手術(shù)野較近的位置，助手站在對(duì)面。例如要顯露頸總動(dòng)脈、迷走神經(jīng)時(shí)應(yīng)選用頸前正中線切口；顯露膈肌時(shí)應(yīng)在劍突下切口；顯露心臟時(shí)應(yīng)在胸前正中線或左胸部切口；顯露膀胱、輸尿管應(yīng)在恥骨聯(lián)合上方正中線切口；顯露腎臟、腎神經(jīng)應(yīng)在左肋緣下、骶棘肌腹側(cè)緣切口；顯露股動(dòng)脈、股靜脈應(yīng)在股部切口；切口一般應(yīng)與血管或器官走行方向平行，必要時(shí)可做出標(biāo)記。剪毛后用濕紗布擦拭局部，以清除剪落的被毛。剪毛部位及范圍由擬定皮膚切口部位和大小而定，應(yīng)大于皮膚切口。動(dòng)物固定后，應(yīng)將手術(shù)部位皮膚被毛剪去，以顯露皮膚。側(cè)臥位適用于耳蝸和腎臟（腹膜后入路）部位的實(shí)驗(yàn)。四肢的固定方法是先用四根棉繩分別打活結(jié)套在動(dòng)物四肢腕、踝關(guān)節(jié)近端并稍拉緊，另一端縛于手術(shù)臺(tái)兩側(cè)的四個(gè)木鉤上即可。仰臥位是機(jī)能實(shí)驗(yàn)中最常用的固定姿勢(shì)，適合于頸部、胸部、腹部和股部的手術(shù)及實(shí)驗(yàn)。（7）自動(dòng)頻率刺激：相鄰的刺激串的頻率呈線性分布。（5）自動(dòng)波寬刺激：相鄰的刺激脈沖的波寬呈線性分布。（3）周期刺激：刺激波為周期性的串刺激。（1）單刺激：?jiǎn)螕粢淮喂ぞ邫谏系摹按碳ぁ卑粹o只發(fā)一個(gè)刺激脈沖，用于單次單脈沖的刺激方式。3．6．4 刺激器使用說(shuō)明刺激器采用全程控方式，輸出電壓共分三檔，分別是0~5V檔，0~10V檔，0~100V檔，用戶可以根據(jù)需要來(lái)選擇輸出的電壓分檔。3．6．3 時(shí)間軸使用說(shuō)明時(shí)間軸用于顯示時(shí)間信息，用戶可以通過(guò)它來(lái)同時(shí)選擇幾個(gè)通道的同一段數(shù)據(jù)?？赡芡ㄟ^(guò)鼠標(biāo)單擊在對(duì)應(yīng)通道的區(qū)域內(nèi)來(lái)改變當(dāng)前通道，也可以通過(guò)鍵盤(pán)上的FFFF4來(lái)切換當(dāng)前通道。雙擊空白處，可以把此窗口放大到整個(gè)采樣窗大小，其他幾個(gè)采樣窗被隱藏，這樣便于觀察。如果鼠標(biāo)右擊標(biāo)記線附近，會(huì)彈出“編輯標(biāo)記”和“刪除標(biāo)記”的菜單，用戶可以對(duì)標(biāo)記進(jìn)行修改和刪除。3．6．2 采樣窗使用說(shuō)明PclabUE軟件提供了4個(gè)相同的采樣窗，界面如下：每個(gè)采樣窗分為三個(gè)部分：（1）坐標(biāo)區(qū)：如圖，顯示了縱坐標(biāo)軸，其刻度單位由控制面板中的通道功能決定，用戶如果想要改變刻度線的距離，可以右擊此區(qū)域在彈出的菜單中選擇“增大刻度間距”或“減小刻度間距”（2）觀察區(qū)：如圖，用來(lái)顯示波形曲線、標(biāo)記、刺激標(biāo)記、選擇區(qū)域、測(cè)量線等信息。E、聯(lián)系我們：打開(kāi)郵件收發(fā)程序向本公司發(fā)送電子郵件。C、每日提示：打開(kāi)“每日提示”對(duì)話框。（6）幫助菜單打開(kāi)“幫助”菜單如圖：A、目錄：打開(kāi)幫助文件的目錄。J、媒體播放器：用來(lái)進(jìn)行多媒體教學(xué)課件的播放如下圖。H、計(jì)算器：用來(lái)打開(kāi)Windows的計(jì)算器程序。導(dǎo)出后如圖：F、導(dǎo)出數(shù)據(jù)到EXCEL：用來(lái)將數(shù)據(jù)導(dǎo)出到EXCEL當(dāng)中供進(jìn)一步的數(shù)值處理或統(tǒng)計(jì)分析。E、導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告到WORD：用來(lái)將實(shí)驗(yàn)報(bào)告連同當(dāng)前屏幕的波形導(dǎo)出WORD當(dāng)中供進(jìn)一步處理。單擊另一通道則可測(cè)量另一通道的值。B、平滑濾波：用來(lái)對(duì)當(dāng)前屏幕或所選數(shù)據(jù)進(jìn)行平滑濾波的，分五點(diǎn)平滑和七點(diǎn)平滑兩種，如果濾波后發(fā)現(xiàn)效果不好，可以通過(guò)“編輯”菜單下的“取消”功能取消濾波操作。L、管理員設(shè)置：此功能對(duì)實(shí)驗(yàn)管理人員開(kāi)放，他將通過(guò)此功能來(lái)限制某些操作是否向?qū)W生開(kāi)放。 J、顏色設(shè)置：本功能是讓用戶可以自由調(diào)整采樣窗口各通道中的波形顏色、背景顏色、網(wǎng)格顏色、標(biāo)記顏色，以便于用戶更好的觀察采樣的結(jié)果。I、標(biāo)準(zhǔn)配置：本功能的目的是幫助用戶將軟硬件系統(tǒng)重新調(diào)整到出廠時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)配置狀態(tài)。定標(biāo)的操作步驟見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。G、當(dāng)前通道定標(biāo)：對(duì)當(dāng)前通道進(jìn)行定標(biāo)。接好傳感器（換能器）后開(kāi)始采樣，如果發(fā)現(xiàn)采樣的結(jié)果偏離了零線，則可以使用此項(xiàng)功能由硬件進(jìn)行調(diào)零，以使采樣的結(jié)果與零線重合，當(dāng)調(diào)零結(jié)束后屏幕會(huì)彈出對(duì)話框進(jìn)行提示。想打標(biāo)記時(shí)用戶只需在標(biāo)記列表框中選擇要打的標(biāo)記然后右擊要打標(biāo)記的位置即可。例如經(jīng)過(guò)右上圖所示的設(shè)置后，用戶單擊工具欄上的“采樣”按鈕后，系統(tǒng)并不立刻采樣，而是隔2分鐘后開(kāi)始采樣，持續(xù)采樣4分鐘后停止采樣，再隔5分鐘后又是開(kāi)始采樣，持續(xù)采樣1分鐘后停止采樣。當(dāng)采用示波器方式時(shí)就可以選擇觸發(fā)方式為自動(dòng)觸發(fā)還是刺激器觸發(fā)，刺激器觸發(fā)是通過(guò)工具欄上的“刺激”按鈕來(lái)啟動(dòng)設(shè)備采樣的，因此可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行設(shè)置。例如輸入“神經(jīng)干傳導(dǎo)速度”，則再次打開(kāi)“新建實(shí)驗(yàn)”對(duì)話框時(shí)即可在“自定義實(shí)驗(yàn)”類中找到“神經(jīng)干傳導(dǎo)速度”如圖：C、采樣條件：采樣條件的設(shè)置對(duì)一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)是非常關(guān)鍵的，通過(guò)它主要是設(shè)置采樣的頻率，顯示方式和觸發(fā)方式以及通道個(gè)數(shù)，因此在做一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)之前都要把采樣條件設(shè)置妥當(dāng)。如果選擇波形回放后，工具欄上的“采樣”按鈕將會(huì)變成“回放”按鈕，具有回放和停止回放波形的功能。再次執(zhí)行此菜單命令則可以解除鎖定使四個(gè)通道的時(shí)間單位可以獨(dú)立調(diào)整。E、當(dāng)前通道信號(hào)反相：用來(lái)對(duì)當(dāng)前通道的信號(hào)進(jìn)行反相操作，通常用于電極接反或必要的場(chǎng)合。C、控制面板：用來(lái)顯示或隱藏控制面板，當(dāng)軟硬件參數(shù)已經(jīng)調(diào)整到適當(dāng)時(shí)用戶可以關(guān)閉控制面板來(lái)增大采樣窗的可視面積。清除前如下圖：清除后如下圖：（3）視圖菜單：打開(kāi)視圖菜單如圖：A、